Метод за диагностициране на началния стадий на хронична бъбречна недостатъчност
Собственици на патент RU 2492481:
Изобретението се отнася до медицината, по-специално до лабораторната диагностика на бъбречни заболявания, и може да се използва при изследване на пациенти за диагностициране на началния стадий на хронична бъбречна недостатъчност.
Първите симптоми, свързани с бъбречна недостатъчност, могат да се появят сравнително късно. В началния стадий на хронична бъбречна недостатъчност клиничните прояви се свеждат главно до симптомите на основното заболяване.
Диагнозата на хронична бъбречна недостатъчност, особено в късните стадии на заболяването, не създава затруднения. Важно е своевременно да се идентифицират първите признаци на хронична бъбречна недостатъчност и правилно да се разпознае в латентен, атипичен ход - с проява на екстремни нарушения на очите, кожата, ставите и други системи на тялото.
Алгоритъмът за диагностициране на хронична бъбречна недостатъчност се изразява чрез скорост на гломерулна филтрация и относителна плътност на урината. Така че техните сравнителни характеристики (т.е. намаляване на скоростта на гломерулна филтрация до 70 ml / min и максимална стойност на относителната плътност на урината до 1,018) за 3 месеца могат да показват хронична бъбречна недостатъчност от 1-ва степен, докато креатинемията не трябва да надвишава 0,35 mmol / l. Най-надеждният маркер за следващите етапи на хронична бъбречна недостатъчност е концентрацията на креатинин в кръвта: с CRF II степен - 0,35-0,65 mmol / l, с CRF III степен - над 0,65 mmol / l. За да се изключат грешки в диагнозата, трябва да се съсредоточите върху стойностите на гломерулната филтрация, която при хронична бъбречна недостатъчност II степен е 35-15 ml / min, при хронична бъбречна недостатъчност III степен - под 15 ml / min. Също така е важно да се определи нивото на урея вкръв, хемоглобин, еритроцити за оценка на отделителната функция на бъбреците (http://www.stomed.ru/directions/articles.php?article_ >
Но концентрацията на креатинин в кръвта не може да служи като идеален маркер за бъбречно заболяване, тъй като нивото на креатинина варира в зависимост от много небъбречни фактори.
Това се дължи на факта, че синтезът на креатинин е многоверижен, т.е. се среща в различни органи (черен дроб, мускули, миокард и мозъчни клетки) и зависи от тяхното функционално състояние и не може да бъде точен маркер за бъбречна дисфункция.
В допълнение, повишаването на креатинина започва само след намаляване на скоростта на гломерулната филтрация с 50% или по-малко. Креатининът "не вижда" ранните етапи на намаляване на скоростта на гломерулната филтрация.
Недостатъкът на този метод е ниската точност на диагностицирането на началните етапи на хронична бъбречна недостатъчност, поради ниската информативност на показателите за осморегулаторната функция на бъбреците под влияние на велоергометрията и сложността на нейната интерпретация. В допълнение, методът може да се счита за опасен за пациента, тъй като на фона на 18-часово ограничение на течностите кръвта се сгъстява, което допълнително влошава функционалното състояние на бъбреците.
Недостатъкът на този метод е, че функционалното състояние на сърдечно-съдовата система е косвен признак за ранно разрушаване на бъбреците. Съдържанието на алфа-токоферол в неутрофилните мембрани не може напълно да отразява състоянието на антиоксидантната защита на липидния биослой на клетъчните мембрани и следователно ранните бъбречни нарушения, което намалява точността на диагностицирането на началните стадии на хронична бъбречна недостатъчност.
В допълнение, синтезът на церулоплазмин в черния дроб се извършва от хепатоцити, скоростта на този процес се регулира от хормони, така че товаиндикаторът може само косвено да показва бъбречна дисфункция. Трябва да се отбележи и високата цена на този метод.
Целта на настоящото изобретение е да се повиши точността на изследването, както и да се намалят разходите и да се намали времето за изследване.
Техническият резултат, постигнат в резултат на постигането на поставената задача, е диагностициране на началния стадий на хронична бъбречна недостатъчност чрез определяне на концентрацията на еритропоетин в кръвната плазма и определяне на модела на синтез на еритропоетин от перитубулните тубули на бъбреците.
Заявената комбинация от функции позволява да се повиши точността и да се намали времето на изследването чрез определяне на концентрацията на еритропоетин в кръвната плазма и в зависимост от нейните промени да се диагностицира степента на бъбречна исхемия.
Това се дължи на факта, че синтезът и секрецията на еритропоетин в бъбреците се определят от нивото на снабдяване на тъканите на тези органи с кислород. Протеинът, съдържащ хема, цитохром b, който е неразделна част от NADP-зависимата оксидаза на пери- и тубулните клетки, е чувствителен към нивото на кислород в бъбречната тъкан. При нормално ниво на парциално налягане на O2 в бъбречната тъкан, кислородните радикали, произведени от оксидазата, предимно водороден пероксид, предотвратяват образуването на "индуциран от хипоксия фактор-1 (IGF-1)" в бъбречната тъкан, който стимулира транскрипцията на еритропоетин иРНК и синтеза на еритропоетин. С намаляване на доставката на кислород към бъбречната тъкан (pO2 до 20-40 mm Hg), производството на водороден пероксид от оксидазата намалява. Увеличава се активирането на IGF-1 в цитозола и движението му към клетъчното ядро, където IGF-1 се свързва специфично с ДНК, причинявайки експресията на гена за еритропоетин.
По този начин, според количественото съдържание на еритропоетин в кръвната плазма, е възможно да сеДиагностицирайте началния стадий на хронична бъбречна недостатъчност.
Методът се осъществява по следния начин: кубиталната вена се пунктира с помощта на затворена система за вземане на кръв, взема се венозна кръв (системата позволява вземане на кръв директно в епруветка), получената кръв се центрофугира за 10 минути. Автоматичен анализатор Immulight - устройство, което използва "затворена" имунолуминесцентна патентована технология - антителата са маркирани с луминофор, има висока чувствителност и точност. Тестовата единица се обработва автоматично (добавяне на реагенти, високоскоростно въртене на тестовата единица, измерване на интензитета на светлината). Турбо режимът ви позволява да получите резултати в рамките на 15 минути. Метод на изследване: ензимно усилена хемилуминесценция.
Според резултатите от съдържанието на еритропоетин в кръвната плазма се диагностицира наличието или отсъствието на начален стадий на хронична бъбречна недостатъчност, докато началният стадий се диагностицира, когато стойността на еритропоетина е над 17,6 IU / l.
Изследвани са 76 пациенти с хронична бъбречна недостатъчност и е установено, че средните стойности на еритропоетин при пациенти с 1-2 стадия на хронична бъбречна недостатъчност са удвоени в сравнение с контролната група. На етап 3 CRF нивото на еритропоетин се поддържа на високо ниво. На 4-ия етап на CRF се наблюдава рязък спад в нивото на изследвания показател, което очевидно показва началото на етапа на "декомпенсация" на производството на еритропоетин.
Резултатите от проучването са представени в таблица.
| ХБН стадий | Средна стойност на еритропоетин, IU/l | тримесечни интервали |
| здрав пациент | 10.4 | М-7,76 [6,58; 9,47] |
| 1 етап | 17.6 | М-13,7 [9,08; 16.4] |
| 2 етап | 17.2 | М-12,8 [9,15; 24.8] |
| 3 етап | 16.6 | М-12,9 [9,3; 16.5] |
| 4 етап | 6.7 | M-6,83 [5,52; 8.7 |
По този начин е възможно да се проследи моделът на синтез на еритропоетин от перитубулните тубули на бъбреците по време на нарастваща исхемия при пациенти с хронична бъбречна недостатъчност.
Етапът на "нарастваща" компенсация съответства на най-началните исхемични лезии на интерстициалните клетки, които произвеждат еритропоетин. Благодарение на активирането на IGF-1 в цитозола и движението му в клетъчното ядро се стимулира експресията на еритропоетин гена. Етапът на "стабилизирана" компенсация (етап на "плато") също поддържа нивото на еритропоетин на достатъчно високо ниво, което осигурява процесите на хемопоеза. И накрая, етапът на "декомпенсация" поради изчерпването на компенсаторните механизми позволява ясно да се проследи спадът на нивото на еритропоетина поради нарушение на взаимодействието между тубулите, перитубулните фибробласти и ендотела, което е необходимо за осъществяването на нормална хемопоеза.
Влошаването на исхемията засяга не само функционалното състояние, но и жизнеспособността на епитела на перитубулните капиляри. На този фон концентрацията на лактат в бъбречната медула се увеличава с паралелно изместване на рН към киселинната страна и допълнително влошаване на интерстициалната хипоксия. Това води до нарушаване на функционалното състояние на перитубулните фибробласти, произвеждащи еритропоетин. Не може да се изключи ролята на оксидативния стрес в развитието на болестта. Реактивните кислородни видове, взаимодействайки с азотния оксид в ендотела, образуват междинни продукти като пероксинитрит, който намалява общата наличност на азотен оксид (NO). В резултат на това съдовият тонус се повишава паралелноувеличаването на консумацията на кислород и по този начин влошената хипоксия на фона на липсата на азотен оксид увеличава увреждането на бъбречния интерстициум от свободните радикали. Функцията и оцеляването на перитубулните фибробласти страдат и производството на еритропоетин рязко намалява. Може да се предположи, че увреждането на интерстициалните клетки, които произвеждат еритропоетин, или нарушението на взаимодействието между тубулите, перитубулните фибробласти и ендотела, което е необходимо за нормалната хематопоеза, допринася за влошаване на секрецията на еритропоетин. Очевидно е, че тези процеси съответстват на етапа на "декомпенсация". Според резултатите от нашите изследвания, етапът на "декомпенсация" в производството на еритропоетин съответства на стадий 4 на ХБН, изчислен по формулата MDRD.
Формулата MDRD за оценка на скоростта на гломерулна филтрация (GFR) е получена от определяне на бъбречния клирънс на 125 йод-йоталамат при голяма група пациенти с широк спектър от бъбречни заболявания. Основният недостатък на тази формула е липсата на точност при изчисляване на GFR при пациенти с нормална или леко намалена бъбречна функция. При скрининга използването на формулата MDRD значително надценява броя на пациентите с ХБН.
Установяването на началния стадий на хронична бъбречна недостатъчност е важно в урологичната практика, тъй като позволява прогнозиране на хода на заболяването и определяне на рисковата група за развитие на тежка уремия.