Метод за ендоскопска корекция на везикоуретерален рефлукс
Собственици на патент RU 2316246:
Изобретението се отнася до медицината, по-специално до урологията, и се отнася до ендоскопска корекция на везикоуретерален рефлукс. За да направите това, под лигавицата на уретера на разстояние 4-5 mm под отвора му в аваскуларната зона на 5-6-7 ендоскопски час се инжектира автофибронектин в доза от 5-10 ml до пълно затваряне на устието на върха на образуваната туберкула. ДЕЙСТВИЕ: Методът осигурява ефективно елиминиране на везикоуретералния рефлукс, ускорява активирането на фибробластите и мобилизирането на колаген в областта на инжектиране на фибронектин, предотвратява локални възпалителни и общи алергични реакции.
Изобретението се отнася до областта на медицината, а именно урологията.
За да се защити бъбрекът при везикоуретерален рефлукс, се използват различни методи на антирефлуксна пластика. Ендоскопската корекция, предложена през 1981 г. от E. Matoushek, е алтернатива на хирургичното лечение на везикоуретералния рефлукс.
Същността на метода е да се възстанови нарушената антирефлуксна функция на уретера чрез въвеждане на течен инертен ("безразличен" към човешките тъкани) полимер под изходния му участък. Полимерът образува туберкула, която след втвърдяване служи като твърда опора за уретера, чиято горна стена, плътно прилепнала към долната, осигурява клапна антирефлуксна функция.
Като фиксиращи вещества, инжектирани под устието на уретера, Неменова А.А., Чепуров А.К. 1993, Kumar R., Puri P. 1998 Използва се тефлонова паста, Herz D., Hafez A. 2001 силикон, Lackgren G., Wahlin N., Stenberg A. 1999 - препарати с хиалуронова киселина, Solovyov A.E. - гел "Interfall", Островски Н.В., Долгов Б.В. - гел "Формакрил".
Проучване на дългосрочни резултати показа, че тефлонътопасен за употреба, тъй като е канцероген. Съществува риск от съдова миграция на лекарството към жизненоважни органи: мозък, черен дроб, бели дробове. Освен това е възможна стеноза на уретера на мястото на въвеждането му. Силиконът също е синтетичен материал, има същите недостатъци като тефлона, поради което използването му в практиката също трябва да бъде ограничено.
Колагенът Бабанин И. Л., Казанская И. В., Коноплев В. Д. се използва най-широко като фиксатор при ендоскопско лечение на везикоуретерален рефлукс. 2002. A.Haferkamp и др. използвайте говежди колаген в концентрация 35 mg / ml на 1,5-1,6 ml разтвор, който се прилага субуретерално. Поради честото повтаряне на рефлукса се налага колагенът да се инжектира два-три пъти. Тъй като веществото е от животински произход, е възможно да се развие имунен отговор при въвеждането му.
При ендоскопско лечение на везикоуретерален рефлукс се използват автоложни вещества: хондроцити, мускулни клетки. A.A.Caldamone, D.A.Diamond използваха ендоскопско трансуретерално инжектиране на автоложни хондроцити в тригоналната зона при 29 деца с везикоуретерален рефлукс II-I степен с добър ефект.
Прототипът на изобретението е методът на Н.Б.Киреев, Л.А.Хафизова, В.В.Паршиков, М.Ю. Първоначалният материал за култивиране на фибробласти се получава от биопсия на собствената кожа на пациента за 3-4 седмици. преди операция. Биопсичен образец от 5-10 mm се взема от кожата на предмишницата или зад ухото след анестезия с 0,5% разтвор на новокаин във флакон със среда на игла с антибиотик и антимикотин. източникалогенните фибробласти са здрава кожа, получена след операцията “circumcisio”. Отстранената по време на операцията кожа се поставя във флакон със средата Needle и се доставя в лабораторията. Кръвта на пациента преди операцията се изследва за HbsAg, HIV, RW.
Клетъчните култури се получават по традиционния метод. За трансплантация използваме култури от 4-10 пасажа, стерилни, незамърсени с микоплазми и вируси. Стерилитетът се следи ежедневно микроскопски, замърсяването - чрез полимеразна верижна реакция в лабораторията на Научноизследователския институт по епидемиология и микробиология в Нижни Новгород преди трансплантация на култура.
За трансплантация се използват култури с добро качество, които са образували сливащ се монослой, клетките трябва да са ясно дефинирани, с плътни ядра, изразени процеси. В деня на операцията клетките се отстраняват от повърхността на съда за култура чрез трипсинизация, промиват се два пъти със стерилен физиологичен разтвор на натриев хлорид, концентрацията на клетките се регулира до 3,5-7 милиона / ml, поставят се в стерилна епруветка и се доставят в операционната зала в стерилен флакон. Човешки авто- и алофибробласти се получават в лабораторията за консервиране на тъкани на отдела за научна лаборатория на Научно-изследователския институт по травматология и ортопедия в Нижни Новгород на Министерството на здравеопазването на Руската федерация.
За извършване на операцията се използват цистоскопи Karl Shtorz с подходящи за възрастта диаметри. Ендоскопията се извършва под венозна анестезия с Calipsol. С помощта на специална инжекционна игла, прекарана през работния канал на цистоскопа, човешки авто- и алофибробласти в количество от 3,5-7 милиона клетки, съдържащи се в 1,5-2,0 ml физиологичен разтвор, се инжектират под лигавицата на уретера на разстояние 4-5 mm под неговия отвор, в аваскуларната зона, на 5-6-7-ия ендоскопски час допълно затваряне на устата на върха на образуваната субмукозна туберкулоза. Извършва се дренаж на пикочния мехур с уретрален катетър на Foley за 24 ч. Ехография на бъбреци и пикочен мехур се извършва на 1-2 ден след манипулацията. Пациентите се изписват за 2-3 дни. След 6 месеца се извършва контролна цистография.
Въпреки това, с този метод има значителни технически трудности на етапа на подготовка на културата на автофибробласти.
Техническият резултат е опростяване на метода, терапевтичният ефект се постига в краткосрочен план поради механичното затваряне на везикоуретералната фистула, в дългосрочен план поради активирането на фибробластите и заместването на инжектирания фибронектин със собствен колаген, както и, както предполагаме, ускоряване на узряването на собствените му антирефлуксни механизми. В допълнение, използването на собствен автофибронектин на пациента предотвратява локални възпалителни и общи алергични реакции.
Предложеният метод се осъществява по следния начин.
За да се приготви автофибронектин, кръвта се взема от периферната вена на пациента в двоен сак за събиране на кръв "Teruflex" или "hemacon" със стабилизатор SRDA-1. След това кръвта се фрагментира в центрофуга PC-6 за 20 минути при скорост 1800 rpm. Плазмата се изстисква в свободна торба с помощта на плазмен екстрактор, добавя се хепарин в размер на 1 000 единици на 100 ml ексфузирана плазма. Еритроцитната маса се връща на пациента. Сакът с плазмата се поставя в хладилник за 12 часа при температура 4°C (за хепаринова криопреципитация на AFN). След 12 часа плазмената торба отново се поставя в центрофугата за 15 минути при 3000 rpm. Супернатантата се отстранява с плазмен екстрактор. Останалият AFN плазмен концентрат е готов за употреба (може да се замразява при 20-40°C,използвайте в рамките на една седмица).
За извършване на операцията се използват цистоскопи R.Wolf с подходящи за възрастта диаметри. Ендоскопията се извършва под венозна анестезия с Calipsol. С помощта на специална инжекционна игла, прекарана през работния канал на цистоскопа, автофибронектин в обем от 5-10 ml се инжектира под лигавицата на уретера на разстояние 4-5 mm под отвора му, в аваскуларната зона, на 5-6-7 ендоскопски час до пълното затваряне на отвора на върха на образуваната субмукозна туберкулоза. Ехографията на бъбреци и пикочен мехур се извършва на 1-2 ден след манипулацията. Пациентите се изписват за 2-3 дни. След 6-9 месеца се извършва контролна цистография.
В резултат на тази интервенция спира обратния поток на урината, стимулират се локални фибробласти.
Методът е илюстриран със следните примери.
Пример 1. Пациент X., на 12 години, е приет в урологичния отдел на Републиканската детска клинична болница на Република Беларус с оплаквания от болки в корема. Болен от ранна възраст. История на повтарящи се екзацербации на пиелонефрит (повече от 3 пъти годишно).
Изследвани в урологичния отдел: клинични и лабораторни изследвания, функционални тестове (проба на Реберг, Зимницки), ултразвуково сканиране на ретроперитонеалните органи, екскреторна урография, цистография на уринирането. Разкрит везикоуретерален рефлукс 2 градуса. Рефлуксът се коригира съгласно описания метод. Детето е изписано на 3-тия ден след интервенцията. Тримесечните контролни прегледи включваха контрол на урината, ултразвук. През периода на наблюдение не е имало обостряне на пиелонефрит. При контролния преглед е направена микробна цистография, година след интервенцията няма данни за везикоуретерален рефлукс.
Пациентът М. на 10 години е приет в урологичното отделениеотделение на Републиканската детска клинична болница на Република Беларус с оплаквания от болки в корема. Анализът на урината показва левкоцитурия, протеинурия. Болен от ранна възраст. През 2003 г. е извършена уретероцистонеостомия от двете страни по Cohen. След това повтарящи се екзацербации на пиелонефрит (повече от 2 пъти годишно). Тя е прегледана в урологичния отдел: извършени са клинико-лабораторен преглед, функционални тестове (проба на Реберг, Зимницки), ултразвуково сканиране на ретроперитонеалните органи, екскреторна урография, цистография на уринирането. Открит левостранен везикоуретерален рефлукс 1-2 градуса. След спиране на възпалението рефлуксът се коригира по описания метод. Детето е изписано на 5-ия ден след интервенцията. Тримесечните контролни прегледи включваха контрол на урината, ултразвук. През периода на наблюдение не е имало обостряне на пиелонефрит. При контролния преглед е извършена микробна цистография, година след интервенцията няма данни за везикоуретерален рефлукс.
По тази техника са извършени 16 операции, във всички случаи е получен положителен ефект, следоперативният период е наблюдаван в продължение на 1 година, всички пациенти са извършени повторно: ултразвуково изследване на коремните органи, цистография на изпразване, екскреторна урография, данни за рецидив на заболяването не са открити. Операцията е технически лесна за изпълнение, не изисква продължителна анестезия и ефективно елиминира везикоуретералния рефлукс.
Метод за ендоскопска корекция на везикоуретерален рефлукс, включващ въвеждане на автотрансплантант под лигавицата на уретера на разстояние 4-5 mm под отвора му в аваскуларната зона на 5-6-7 ендоскопски час до пълно затваряне на отвора на върха на образуваната туберкулоза, характеризиращ се с това, че като такъвтрансплантация, инжектирана с автофибронектин в доза 5-10 ml.