Сравнителна характеристика на вирусния хепатит

сем. Flaviviridae

Не е класифициран,сателитен вирус(вироид)HBV

сем. Flaviviridae

Морфология (форма, размер, наличие на суперкапсид)

прост вирус, капсиден икосаедър

сложен вируссферичен и пръчковиден

сложен вируссферична форма

прост вирусикосаедър

сложен вируссферична форма

+ PHK, линеен, нефрагментиран

ДНК е кръгла, двуверижна с едноверижен регион

+ PHK, линеен, нефрагментиран

14 дни - 3 месеца

14 дни - 6 месеца

Често хроничен хепатит, цироза, често рак

Често хроничен хепатит, цироза,често рак

Често хроничен хепатит, цироза, често рак

Остър хепатит,тежък при бременни жени

Често хроничен хепатит

Инактивирана култура епид. от 3 години, реваксинация след 4 години

Рекомбинантен, планиран от 1996 г. 12 часа, 1 месец, 3 месеца реваксинация след 5 години

Ваксина срещу хепатит B поради обща повърхност на HBsAg

Инактивирана култура епид. от 3 годишна възраст.

кръвен серум, фекалии, вода и храна.

серум, чернодробна биопсия

кръвен серум, фекалии, вода и храна

серум, чернодробна биопсия

HAV РНК, HAV Ag, анти-HAV IgM, IgG

HBV ДНК, HBsAg, HBeAg, анти-HBsAg, анти-HBeAg, анти-HBc IgM, IgG

HCV РНК, анти-HCV IgM, анти-HCV IgG

HDV РНК, HDAg, анти-HDV IgM, IgG

HEV РНК, HEV Ag, анти-HEV IgM, IgG,

HGV РНК, анти-HGV

1)PCR- РНК на вируса (HAVRNA) се открива в кръвен серум, изпражнения, вода и храна.

2)ELISA- вирусен антиген (HAVAg) се открива във фекални екстракти;

3) Имунна електронна микроскопия (IEM).

1) PCR, метод на молекулярна хибридизация- вирусна ДНК (HBV ДНК) в кръв, проби от чернодробна биопсия.

2)ELISA, RPHAв кръвния серум определят антигените на вируса: повърхностен антиген (HBsAg), „инфекциозен антиген“ (HBeAg);

PCR,метод на молекулярна хибридизацияв кръвен серум - вирусна РНК (HCV РНК)2)

1) PCR,иметод на молекулярна хибридизация- вирусна РНК (HDV РНК) ;

2) ELISA, RIA, имуноблотинг-aвирусен антиген (HDV Ag).

1) PCRоткриване на вирусна РНК (HEV RNA) вcсерум, изпражнения

2)ELISA- вирусен антиген (HEVAg),

PCRс предварителна обратна транскрипция(RT-PCR)откриване на вирусна РНК (HGV RNA);

Инфекция на клетъчни култури, маймуни (шимпанзета) само за научни и промишлени цели, не се използва в диагностиката

Инфекция на маймуни (шимпанзета) само за научни цели, не се използва за диагностика

ELISA, RIAв кръвния серум откриват Ig M-антитела (anti-HAV IgM) и Ig G-антитела (anti-HAV IgG).

ELISA, RPHAв кръвния серум определят антивирусни антитела: антитела към повърхностния антиген (anti-HBsAg); антитела към основния антиген (anti-HBcAg IgM, IgG; антитела към „антигена на инфекциозността“ (anti-HBeAg);

ELISA,серумни антитела срещу вируса (анти-HCV IgM, анти-HCV IgG)

В дарена кръв

1) ELISA сотделно определяне на антитела към различни протеини на вируса,

2) имуноблотинг с рекомбинантни антигени към капсидни протеини (C22) и функционални протеини (NS3-NS5) за откриване на антитела.

ELISAв кръвен серум - антитела срещу вируса (anti-HDV IgM, anti-HDV IgG).

ELISAв кръвен серум - антитела срещу вируса (anti-HEV IgM, anti-HEV IgG

ELISAв кръвен серум - антитела срещу вирусен протеин E2 (anti-HGV E2)

Имуноблотинг—метод за откриване на протеин, базиран на комбинация от електрофореза и ELISA или RIA. Антигените на патогените се разделят с помощта наелектрофореза в полиакриламиден гел, след което се прехвърлят (блотинг - от англ. blot, петно) от гела върху нитроцелулозна мембрана и се проявяват с помощта наELISA. Ленти с "петна" от антигени се произвеждат от различни компании. 1. Серумът на пациента се нанася върху тези ленти. 2. След това, след инкубация, пациентът се измива от несвързаните антитела на пациента и се прилага серум срещу човешки имуноглобулини, белязани с ензим. 3. Комплексът, образуван върху лентата [антиген + антитяло на пациента + антитяло срещу човешки Ig] се открива чрез добавяне на хромогенен субстрат, който променя цвета си под действието на ензима.

Ензимно-свързан имуносорбентен анализ или метод (ELISA) - откриване на антигени, като се използват съответните им антитела, конюгирани с белязан ензим (пероксидаза от хрян, бета-галактозидаза или алкална фосфатаза). След като антигенът се комбинира с ензимно белязаните имунни серуми, субстратът/хромогенът се добавя към сместа. Субстратът се разцепва от ензима и цветът на реакционния продукт се променя - интензитетът на цвета е право пропорционален на броя на свързаните антигенни и антитяло молекули

Имунна електронна микроскопия - електронна микроскопия по-често от третираните вирусисъответните антитела. Вирусите, третирани с имунен серум, образуват имунни агрегати (микропреципитати). Около вирионите се образува „венче” от антитела, контрастирано с фосфоволфрамова киселина или други електронно-оптически плътни препарати, което се вижда ясно в електронен микроскоп.

Радиоимунен анализ (RIA),е високочувствителен метод, базиран на реакцията антиген-антитяло, използваща антигени или антитела, маркирани с радионуклид (125J, 14C, 3H, 51Cr и т.н.). След тяхното взаимодействие, полученият радиоактивен имунен комплекс се отделя и неговата радиоактивност се определя в подходящ брояч (бета или гама лъчение): интензитетът на лъчението е правопропорционален на броя на свързаните молекули антиген и антитяло.

Полимеразна верижна реакция (PCR)се основава наамплификация, т.е. увеличаване на броя на копията на специфичен (маркерен) патогенен ген. За да направите това, двойноверижната ДНК, изолирана от тестовия материал a, се денатурира („разплита“ при нагряване) и завършени (когато се охладят) нови комплементарни вериги се добавят към неусуканите ДНК вериги. В резултат на това от един ген се образуват два гена. Този процес на генно копиране се повтаря многократно при определени температурни режими. Завършването на нови комплементарни ДНК вериги става, когато праймери (семена от къса едноверижна ДНК, комплементарни на 3' краищата на ДНК на желания ген), ДНК полимераза и нуклеотиди се добавят към желаните гени.За амплификацията на вирусна РНК се използва PCRс предварителен етап на обратна транскрипция(RT-PCR).