1.4. Кръвен серум на животни и хора
Кръвният серум е богат на биологично активни съединения, значението на много от които по отношение на микроорганизмите е неясно. Освен това е един от източниците на желязо, което е от съществено значение за много видове бактерии. Характеристиките на кръвния серум на различни животински видове и хора са добре проучени. Показани са разлики в протеиновия състав (Кармолиев Р. Х., 1971) и други биохимични свойства (Радаева И. Ф., Костина Г. А., 1998). При култивиране на микобактерии се използва кръвен серум от различни видове бозайници за обогатяване на течни хранителни среди. В естествено състояние се препоръчва да се включи в средата за култивиране на L-форми на Mycobacterium tuberculosis Дорожкова И. Р., Волк А. В. (1972) и Мордовская Г. Г., Птицына Е. А. (1982). Според Mysak J. (1974), средата Banich с добавяне на 10% кръвен серум е по-добра по отношение на културните свойства на средата
Левенщайн-Йенсен и Шул. Максималното подобрение на културните свойства на течните хранителни среди се отбелязва при използване на кръв (Dickinson J. et al., 1989) и кръвен серум от говеда (говеда) или фракция V на говежди серумен албумин (BSA). Това са среда на Школникова с 10% кръвен серум от говеда и среда на Мидълбрук без агар, но с добавка на комплекс олеин-албумин-декстроза-каталаза. Съхраняването на търговски среди, съдържащи V фракция на BSA, влошава техните културни свойства (Culter S., 1988). Bibergal VA (1991) показа 9-кратно подобрение в културните свойства на средата на Shkolnikova, когато се добави прясна човешка плазма. Възможно е, според нея, за това да се използва инактивиран кръвен серум от говеда. Според Ilinykh L.A. (1990), когато се добави кръвен серум от говеда към средата на Гелберг, се отбелязва по-ранен и по-интензивен растеж на колонии от микобактерии. Свеж кръвен серум от говеда в средатаMiddlebrook 7H11 ускорява растежа на M. bovis (Galaciner J., Horwill D., 1977). Кръвният серум на едрия рогат добитък съдържа среда Renja-ra за култивиране на M. paratuberculosis (цитирано по Sidorov M.A. et al., 1995). Средата за изолиране на микобактерии, съдържаща конски кръвен серум, е предложена от Dudnitsky I. A. et al. (1991). Dhople A. и др. (1996) отбелязват стимулиращ ефект върху растежа на M. avium чрез добавяне на кръвен серум от зайци и хора с хемолитична анемия и хемохроматоза към 7H9 бульон; докато кръвният серум на здрави хора и пациенти с микобактериоза, причинена от M. avium, напротив, имаше депресиращ ефект. Серумът от конска кръв е част от ML средата за култивиране на M. leprae (Osawa N., 1997). VS3E среда, съдържаща 30% фетален говежди серум (Bhatia V., Rao S., 1989), поддържа растежа на M. leprae.
Нативен серум от конска кръв се използва в хранителни среди за пневмококи Balayan LB (1947); Бухарин О. В. и др. (1981).
Кръвният серум е включен в средата за Neisseria (Labinskaya A. S., 1972; Gadzhiyeva A. G. et al., 1982), включително менингококи (Guide. 1973; Shichkina V. P. et al., 1983). Общоприето е последният да се изолира и култивира върху агарна среда с 20% конски серум (Игонина Ю. А. изоавтор, 1976; Костюкова Н. Н. и др., 1980). Използва се и кръвен серум от говеда (авторско свидетелство № 1659485, 1991 г.). Като се има предвид процентното съдържание на протеини в асцита, Андреева 3. М., Бобровникова А. Я. (1984) го замени в подходящата хранителна среда за Neisseria с конски кръвен серум. В същото време, както беше отбелязано по-горе, растежният ефект на 1% серум се обяснява с неутрализирането на токсичния компонент на агара Shichkina V.P. et al. (1983) въвеждат 13–20% животински кръвен серум в средата. Татарников В. М. ии др. (1984) показват ниска инокулация на менингококи върху средата на Гаджиева в сравнение с 20% Hottinger serum agar и препоръчват
добавете 10% естествен конски серум към средата.
ki N., Fujiwara K. (1992) някои видове микоплазми са чувствителни към микоплазмицидното действие на серум от конска кръв. Най-висока активност е установена по отношение на M.pneumoniae. Ефектът се проявява при 37°C в присъствието на Са2+ и Mg2+. След нагряване при 56°С в присъствието на комплемент, ефектът се поддържа срещу M. pneumoniae и M. fermentans, но не и срещу M. neurolyticum и M. laidlawii. Установено е, че тази активност се определя от lgG и М комплекса.
Заешки кръвен серум в концентрация 5-30% е основният компонент на хранителната среда за лептоспира. Малахов Ю. А. (1992) препоръчва използването на кръвен серум само от два вида животни за тяхното отглеждане: зайци и овце. Кръвният серум на говеда, овце, коне и свине има бактерициден ефект срещу лептоспири (Ananyina Yu. V., Chernukha Yu. G., 1983; 1984). Албуминовата фракция допринася най-активно за растежа на тези микроорганизми. Някои изследователи препоръчват използването на хемолизиран серум, отбелязвайки подобряването на растежа на лептоспира с определена степен на хемолиза. Кръвен серум или албумин се използва за детоксикация на тийнейджъри в хранителна среда.
Първоначално в нашата страна, при промишленото производство на ваксина срещу лептоспироза, микроорганизмите се култивират в среда Ulengut, състояща се от вода и заешки кръвен серум. Последващото заместване на този серум с овце не намалява качеството на ваксината. Въпреки това преходът през 1966 г. на биофабриката към албуминова среда VGNKI-1, където серумът е заменен с неговата албуминова фракция, причинява влошаванеантигенни свойства на leptospira, а от 1975-1976 г. за култивиране отново се използва водно-серумна среда с овчи серум. Тогава беше установен отрицателен ефект върху растежа на Leptospira, спонтанно възникващ в кръвните серуми на донорни овце на хомоложни антитела, и в биофабриката беше въведена комбинирана серумно-албуминова среда, която се използва и днес (Sitkov V. I. et al., 1996). В чужбина за тези цели се използват безсерумни полусинтетични (албумин) или синтетични хранителни среди.
Кръвният серум на различни видове бозайници се добавя към среда за спорообразуване на патогенни и непатогенни микроби (Sementini A., 1942), по-специално B. anthracis (Srinivasan V. et al., 1972). Кръвта и нейният серум адсорбират инхибитори на образуването на капсула на хранителната среда (Schaefer W., 1963). Ролята на последния в образуването на капсули във вирулентни щамове на B. anthracis е изследвана от Meynell E., Meynell G. (1964). Нативните говежди или конски серуми в относително високи концентрации са съществени компоненти на много елективни среди, предназначени за образуване на капсула на B. anthracis (GKI; Tomova; Shlyakhova, 1973; Nizamova R. N. et al., 1992; Lefler; serum-
точен агар и бульон). Левина Е. Н. и др. (1974) за натрупване на B.cereus токсин се използва среда на Thorn с добавяне на, наред с други компоненти, 1% кръвен серум.
Кръвта на едър рогат добитък и по-често неговият серум са част от хранителните среди за култивиране на Brucella (Колесникова Н. С., 1961; Alton J., Jones L., 1968). Tween-40 се използва като заместител на серума за подобряване на растежните качества на средата за Brucella. За разлика от други (груби форми) Brucella щам Br. ovis I-65 (гладък вариант) расте само върху хранителни средис нативни кръвни серуми от говеда или коне (Tarasova T. A. et al., 1983).
За култивиране на Campylobacter pylori се използват различни кръвни среди с добавяне на 5-10% овча, конска или човешка кръв и (или) серум (Bazhenov L. G., 1991). Xia H. et al. (1992, 1993) отбелязват, че C. pylori се съхранява в сърдечно-мозъчен бульон с 10% серум от конска кръв за повече от 3 дни.SchulzeEetal. (1987) изолират и диференцират бактерии от рода Campylobacter върху агар Mueller-Hinton, допълнен с 10% телешка кръв.
Allan E., Poxton 1. (1994) показва влиянието на хранителната среда върху чувствителността на различни видове Bacteroides към бактерицидното действие на човешкия серумен комплемент и експресията на повърхностните структури. Изследваните щамове са серумно чувствителни в различна степен, когато се култивират в обогатена среда с протеозен пептон-дрожден екстракт. Въпреки това, когато се отглеждат в минимална среда на Van Tassell и Wilkins, половината от щамовете показват измерима резистентност както към човешки, така и към инактивирани говежди серуми.
За култивирането на патогена на американския гнилец (Bac. larvae) понастоящем широко се използва MPA с добавяне на 10% серум от конска кръв без консервант, въпреки че Bac също присъства в него. ларвите не винаги растат добре.
Савелиев E.P. и др. (1989) изследва ефекта върху растежа на стрептококи от група А чрез добавяне на фракции от говежди кръвен серум, съдържащи съединения с ниско молекулно тегло, към средата за култивиране. Griffiths V., McClain O. (1987) показаха възстановяването на производството на хемолизин Str. pyogenes, когато се добави към серумната среда. Според Shimokawa O. et al. (1994), серумът от конска кръв инхибира растежа на L-формите на St. aureus, но рядкоколониите, отглеждани върху среда, обогатена с този серум, са стабилни L-форми. Иванова Е. и др. (1991) култивират стабилни L-форми на Е. coli WE + протопласти върху соева среда с 10% серум.
Според Evans M. et al. (1986) добавянето на човешки серум към бульон Mueller-Hinton води до 14-50% фалшиво положителни резултати за чувствителност към Ps. aeruginos до моксалактам. Значително повишава чувствителността
Активност на Ps.aeruginos в човешки серум, когато се отглежда в среда с дефицит на Mg (Tzouvelekis L. et al., 1990).
Кравцов А. Н. и др. (1987, 1992) показват връзка между спирането на растежа на Y. pestis в нативния кръвен серум и ограничаването на приема на желязо в микробната клетка. Установено е, че Y. pestis хемин в серума не се използва. Смята се, че асимилацията на трансфериново желязо зависи от температурата и се извършва само при 28°C. Инкубацията в човешки кръвен серум допринася за обогатяването на антигенната структура на патогена на чумата, като по този начин повишава вирулентността и имуногенността.
Pasteurella върху среда без серум не винаги расте задоволително, поради което при бактериологичната диагноза на пастьорелоза се препоръчва използването на серумен MPA и MPB, както и серумен бульон и Hottinger агар, които включват 10% естествен серум от конска кръв (Метод, инструкции. 1992).
Наличието на цистиназа, основната видова характеристика на C. dipt-heriae, се определя в среда на Piso с 10% конски серум. Батурина А. В. и др. (1990) замени конския серум в него със среда 199. Липсата на кръвен серум в агарната среда не влияе върху качеството на тестване на токсигенността на дифтерийните култури, а най-добрият от серумните заместители (tween-40, GLA, аминопептид, протеин) се оказа среда 199(Газизова Г. Р. и др., 1990).
Сидоров М. А. и др. (1995) отбелязват най-добър растеж на актиномицети A. pyogenes и A. hardeovulneris върху серумни среди. Заешки кръвен серум също е част от средата на Beigton и Colman (1976).
Пушкарева В. И. и др. (1997) показаха връщане на латентни Listeria във вегетативно състояние под въздействието на фетален серум.
Според Н. А. Ожередова (1997) стимулиращият ефект на кръвния серум на рибите върху растежа и размножаването на C. albicans е по-висок от този на зайци.