Глюкозурия. Определяне на глюкоза в урината

Глюкозурия. Определяне на глюкоза в урината.

Глюкозурия

Глюкозурия (глюкозурия) - появата на глюкоза в урината:

физиологичен (с въвеждането на голямо количество въглехидрати с храна, след емоционален стрес);
извънбъбречни (захарен диабет, цироза на черния дроб, панкреатит, рак на панкреаса, тиреотоксикоза, синдром на Иценко-Кушинг, феохромоцитом, черепно-мозъчна травма, удари, отравяне с въглероден окис, морфин, хлороформ);
бъбречни (хроничен нефрит, нефроза, амилоидоза, остра бъбречна недостатъчност, бременност, отравяне с фосфор, някои лекарства).

За правилна оценка на глюкозурията е необходимо да се изследва урината, събрана на ден, и да се изчисли дневната загуба на захар в урината.

При нормално функциониращи бъбреци глюкозурията се проявява само в случаите, когато концентрацията на захар в кръвта се повишава, т.е. с хипергликемия. Така нареченият бъбречен глюкозен праг е концентрацията на глюкоза в кръвта, над която има глюкозурия (7,8–8 mmol/l). Концентрацията на глюкоза в кръвта обикновено не надвишава 4,6–6,6 mmol/l (0,8–1,2 g/l).

По-рядко срещана е бъбречната (бъбречна) глюкозурия, свързана с нарушена реабсорбция на глюкоза в тубулите, когато глюкозурията се появява при нормална концентрация на кръвна захар.

Определяне на глюкоза в урината

Качествени проби

Повечето от качествените тестове, използвани за определяне на глюкозата в урината, се основават на редуциращите свойства на алдехидната група на глюкозата. Лесно редуцираща се сол се използва като окислител, давайки оцветено съединение при редукция. Тези методи включват теста на Fehling, Gaines, Nylander, Benedict, тест за глюкозооксидаза.

Глюкозооксидаза(notatin) тест

Методът се основава на окисляването на глюкозата от ензима глюкозооксидаза (нотатин). Полученият водороден пероксид се разцепва от друг ензим (пероксидаза) и окислява индикаторното багрило (бензидиново производно), променяйки цвета си. За да се определи глюкозата в урината, индикаторната хартия Glucotest се потапя в тестовата урина за 1-2 секунди, така че жълтата лента, нанесена върху хартията, да бъде напълно намокрена. След 2 минути определете приблизително концентрацията на глюкоза в урината, като сравните интензитета на цвета на цветната лента с цветната скала, налична в стандартния комплект. Трябва да се помни, че при много висока глюкозурия (повече от 2%) интензитетът на цвета на цветната лента не се променя. Индикаторната хартия трябва да се съхранява в плътно затворен съд на тъмно и хладно място (но не в хладилник!).

Тест на Gaines

Реакцията се основава на способността на глюкозата да редуцира хидрата на меден оксид в алкална среда (синьо) до хидрат на меден оксид (жълт) и след това до хидрат на меден оксид (червен). За да се предотврати образуването на черна утайка от мед от хидрат на меден оксид при нагряване, към реагента се добавя глицерол, чиито хидроксилни групи свързват хидрата на медния оксид.

Реагентът на Gaines се приготвя, както следва:

1) 13,3 g x. ч. кристален меден сулфат (CuSO4 · 5H2O) се разтварят в 400 ml вода; 2) 50 g натриев хидроксид се разтварят в 400 ml вода; 3) 15 г чаена лъжичка или ч.л. глицерин се разрежда в 200 ml вода. Смесете 2-ри и 1-ви разтвор и веднага изсипете 3-ти. Реагентът е стабилен.

Тестът се провежда в следния ред: 8-12 капки урина се добавят към 3-4 ml от реагента до появата на синкав цвят. Разбъркайте и загрейте горната част на епруветката, докато започне да кипи над пламъка на газова горелка или спиртна лампа. Долна часттръбата е контролът. При наличие на глюкоза в урината се наблюдава ясен преход на цвета от бледосиньо към жълто.

Тестът на Gaines е надежден, тъй като при голямо разреждане на урината (8–12 капки урина и 3–4 ml реагент) възстановяващият ефект на други редуциращи вещества в урината (пикочна киселина, индикан, креатин, жлъчни пигменти), както и някои лекарствени вещества (ацетилсалицилова киселина, кофеин, PAS) е слабо изразен. Наличието на голямо количество протеин в урината пречи на правилната оценка на редукционните проби, затова е препоръчително първо да се отстрани чрез подкисляване на урината с няколко капки оцетна киселина, нагряване до кипене и филтриране.

Количествени методи

Колориметричен метод за определяне на глюкоза в урината по Алтхаузен

Принципът на метода: когато глюкозата се нагрява с алкали, се появява цветна реакция. Техника на определяне: 1 ml 10% натриев хидроксид се добавя към 4 ml урина и се вари 1 минута. 10 минути след кипене цветът на течността се сравнява с цветна скала, на която до всяка оцветена лента е посочено процентното съдържание на глюкоза. По-добре е да използвате везна, приготвена с реактиви. За да направите това, вземете 0,5; 1.0; 1,5; 2.0; 3,0 и 4,0% разтвори на глюкоза се третират по същия начин като изследваната проба от урина и се затварят плътно със запушалки. Цветът на тези разтвори не се променя в продължение на около 10 дни.

Методът на Althausen дава приблизителни резултати и следователно може да се използва при липса на поляриметър. Модифицираният метод на Althausen, който не изисква оскъдни реактиви и отнема малко време, се отличава с изключителна лекота на изпълнение.

Принципът на модифицирания метод на Althausen: когато урината, съдържаща глюкоза, се нагрява с разтвор на каустик, цветът на съдържанието на епруветката се променя.

Таблица 9Приготвяне на разреждания за построяване на калибровъчна графика за определяне на глюкоза в урината по модифицирания метод на Алтхаузен

4 ml от изследваната урина се смесват с 1 ml 10% разтвор на натриев хидроксид и се поставят във вряща водна баня за 3 минути. След 10 минути пробата се колориметрира на FEC с филтър за зелена светлина в кювета с работна ширина 5 mm. Водата се приема като контрола. Количеството захар в урината се намира съгласно калибровъчната крива, за изграждането на която се приготвя 8% стандартен разтвор на глюкоза, от който след това е необходимо да се приготви прозрачна урина с ниска относителна плътност 1,0; 1,5; 2.0; 2,5; 3.0; 3,5; 4.0; 4,5; 5,0% разтвори на глюкоза по схемата, представена в табл. 9: 4 ml разтвор се вземат от всяко разреждане, добавя се 1 ml 10% разтвор на натриев хидроксид и се третират като експериментални проби. Определете оптичната плътност във всяко съответно разреждане и изградете графика. За удобство при работа по графика е съставена таблица. Трябва да се помни, че урината трябва да се смеси преди определянето на глюкозата и при високи концентрации на глюкоза в пробата (4-5%) трябва да се разреди.

Цветна реакция с ортотолуидин

Основава се на факта, че глюкозата при нагряване с ортотолуидинов реагент дава оцветено съединение, чиято степен на оцветяване е пропорционална на концентрацията. За теста се приготвя ортотолуидинов реагент (0,15 g тиокарбамид се разтваря в 94 ml ледена оцетна киселина и се добавят 6 ml ортотолуидин) и стандартен разтвор на глюкоза. Урината се разрежда 2-10 пъти в зависимост от естеството на качествената проба. 0,1 ml разредена урина се смесва с 4,5 ml ортотолуидинов реактив, поставя се във вряща водна баня за 8 минути и след това веднага се охлажда до нормална (стайна) температура. Полученият цветен разтвор е колориметриченна FEC при дължина на вълната 590–650 nm (оранжев или червен светлинен филтър) срещу контролата, която също е зададена, но вместо урина се взема стандартен разтвор на глюкоза. Наличието на белтък в урината не пречи на определянето на глюкозата по този метод, затова е за предпочитане.

Поляриметричен метод за определяне на глюкоза в урината

Поляриметричният метод ви позволява да определите процента на глюкозата в урината с помощта на така наречения захариметър. Принципът на определяне се основава на факта, че глюкозата в разтвора върти равнината на поляризирана светлина пропорционално на съдържанието на глюкоза в разтвора. Преди определянето е необходимо да се отбележат тетрациклинови препарати, екскретирани в урината и изкривяващи резултатите поради допълнителна оптична активност. За изследване урината трябва да бъде освободена от протеини и филтрирана. Ако урината остане мътна след филтриране, тогава се използва адсорбент. Тръбата на поляриметъра се напълва с избистрена урина, покрива се с полирано парче стъкло, завинтва се здраво, избърсва се и се поставя в апарата. Интензитетът на потъмняване на дясната половина на зрителното поле на поляриметъра определя ъгъла на отклонение на поляризирания лъч, който се изразява в градуси по скалата на уреда. Ъгъл на отклонение от 1° съответства на 1% глюкоза (с дължина на тръбата 18,94 cm).

Този метод днес се използва рядко, тъй като има редица недостатъци: той е субективен (индивидуално възприемане на осветлението), доста трудоемък и дава неточни резултати, ако не се постигне пълна прозрачност на урината.

Жив ли е Христос? Христос възкръсна ли от мъртвите?Изследователите изучават фактите