Хранителна среда за култивиране на бактерии bacillus subtilis bn-135 - продуцент на пектат лиаза
Собственици на патент RU 2571945:
Изобретението се отнася до биотехнологиите. Хранителна среда за дълбоко култивиране на бактерии Bacillus subtilis BN-135 съдържа хидролизирано ръжено брашно или хидролизирано ечемично брашно, екстракт от царевица, двузаместен амониев фосфат, монозаместен калиев фосфат, калциев хлорид, натриев карбонат и чешмяна вода при определено съотношение на компонентите. Технически ефект: Изобретението позволява да се увеличи активността на пектат лиаза. 2 табл. 3 Ave.
Изобретението се отнася до микробиологичната индустрия и се отнася до хранителна среда за култивиране на бактерия Bacillus subtilis BN-135, продуцент на пектатна лиаза.
Препаратът на основата на пектат лиаза може да се използва при приготвянето на ензим-съдържащи лекарства, използвани за лечение и профилактика на заболявания, свързани с нарушения на храносмилателния процес, както и при приготвянето на препарати, използвани за увеличаване на добива и подобряване на качеството на зеленчукови и плодови сокове и пюрета, избистрени плодови и ягодови вина, етерични и растителни масла, чай, при преработката на трудно смилаеми растителни фуражи и при производството на биологични продукти. добавки за селското стопанство.
Пектат-лиазният ензим принадлежи към ензимите с мацериращо действие и извършва нехидролитично разцепване на пектинови вещества, включително неразтворим пектин - протопектин от растителна тъкан, който формира основата на междуклетъчните вещества и "циментира" растителната тъкан. В този случай растителната тъкан се разпада на отделни клетки, образувайки хомогенна маса със запазване на диетични фибри. При разделянето на протопектина нивото на разтворимия пектин се повишава и се образуват олигогалактурониди, които подобно на разтворимия пектин сеефективни ентеросорбенти и премахват солите на тежките метали и токсините от тялото.
Съставите на хранителните среди за култивиране на производители на пектатна лиаза са добре проучени на лабораторно и полупромишлено ниво. В техния състав източниците на пектин най-често се използват като източник на въглерод, по-специално цвеклова каша или нейния хидролизат, понякога суровини, съдържащи нишесте.
Известна хранителна среда за дълбоко култивиране на производителя на мацериращи ензими Bacillus circulans 31 (AS СССР 1026405. Хранителна среда за дълбоко култивиране на Bacillus circulans 31 - производител на мацериращи ензими, 1981), съдържаща, g/l: алкален хидролизат от цвеклова каша - 26-80, екстракт от царевица 4 -2 0, урея - 3-10, калциев карбонат - 0,5-5,0, калиев сулфат - 0,5-3,0. Продуцентът се култивира при аеробни условия за 18 часа в слабо алкална зона при начална стойност на pH на хранителната среда 8,2-8,5. Предложената хранителна среда ви позволява да получите активността на пектат-транс-елиминазата (според новата класификация на ензимите - пектат-лиаза) до 60 единици / ml за 18 часа растеж.
Съществен недостатък на тази хранителна среда е ниската активност на пектат-транс-елиминаза (пектат-лиаза) в културалната течност.
Известна хранителна среда за култивиране на факултативни анаеробни бактерии Bacillus polymyxa в метода за получаване на ензим, който унищожава растителния материал - пектат-транс-елиминаза (пектат-лиаза) (немски патент № среда, съдържаща нишесте, захарна тръстика, меласа като източник на въглерод,глюкоза или смес от тези компоненти, а като източник на азот - соево брашно, екстракт от царевица, екстракт от дрожди, пептон, нитрати, амониеви соли или смес от два или повече от тези компоненти заедно с органични и/или неорганични соли, особено калциев карбонат. Предлага се култивирането на производителя да се извършва периодично с постоянно разбъркване и аериране и поддържане на pH на ниво 5,2-7,8 в продължение на 2 до 4 дни. Когато ензимът се изолира от културалната течност, се получава добив на пектат транс-елиминаза (пектат лиаза) до 30 000 единици/ml.
Недостатъците на тази хранителна среда включват достатъчно висока активност на пектат транс-елиминаза (пектат лиаза) и дълъг период на култивиране на производителя.
Недостатъкът на тази хранителна среда е ниската активност на пектат транселиминаза (пектат лиаза) в културалната течност.
За мащабно производство на ензими, в допълнение към наличието на суперпродуктивни щамове-продуценти, съставът на хранителната среда е определящ, което на първо място влияе върху нивото на добив на целевия продукт и съответно върху рентабилността на целия процес.
Техническият проблем, който се решава от настоящото изобретение, е да се разработи нов, по-продуктивен и технологичен състав на хранителна среда, съдържащ достъпни и евтини суровини и осигуряващ висок синтез на пектат лиаза.
Техническият резултат, който може да бъде получен чрез изпълнение на изобретението, е да се повиши активността на пектат лиаза в културалната течност до стойности не по-ниски от 40 000 единици / ml за 18-22 часа култивиране.
За постигане на определения технически резултат за потопено култивиране на Bacillus subtilis BN-135, продуцент на пектатна лиаза, е предложеноизползвайте хранителна среда, състояща се от източник на въглерод, екстракт от царевица, двуосновен амониев фосфат, двуосновен калиев фосфат, хранителни соли и чешмяна вода. За да се повиши активността на пектат лиаза в културалната течност, се предлага да се използва като източник на въглерод вместо пулпа от цвекло субстрат, съдържащ нишесте - ръжено или ечемично брашно, предварително хидролизирано от гъбична целулаза, като хранителни соли - калциев хлорид и натриев карбонат в следното съотношение на компонентите, тегло. %: