Левкоцитни тестове - Образуване на розетка - Библиотека по медицина
Левкоцитни тестовее група от диагностични тестове, при които промените в различни свойства на левкоцитите служат като индикатор за оценка на специфичната реактивност на организма и функцията на имунната система. Левкоцитите включват тест за розетка, бластотрансформация на лимфоцити, инхибиране на миграцията на макрофагите, алергична промяна на левкоцитите и тест с резистентна към глюкокортикоид фракция от лимфоцити.
Тестът с розеткасе основава на разликите в рецепторната структура на левкоцитите (лимфоцити, гранулоцити, моноцити), които при взаимодействие с еритроцитите могат спонтанно да ги прикрепят към тяхната повърхност. В този случай се образуват фигури, наподобяващи розетки, в центъра на които има левкоцит, а около него са разположени поне 3-5 еритроцита. Има няколко разновидности на този тест. При директен тест в образуването на розетки участват антигени на самите еритроцити, а при индиректен тест - антигени, изкуствено фиксирани върху повърхността на еритроцитите. При директен тест се образуват спонтанни и имунни розетки: спонтанни розетки - между човешки или животински лимфоцити и еритроцити на коч; имунни - с еритроцити, използвани за имунизация на донор на левкоцити. Използва се директен тест за определяне на броя на Т-лимфоцитите (тъй като тези клетки носят рецептори за еритроцитите на овцете), широко се използват за оценка на имунния статус, а в някои случаи и за изолиране на В клетки. Розетките могат да се образуват поради имуноглобулини, които се образуват в В-клетките или се фиксират върху клетки (гранулоцити, моноцити). Феноменът на образуване на розетка може да възникне не само при еритроцитите, но и при други клетки и изкуствени гранули.
Същността на метода е да се изолира суспензия от левкоцити (лимфоцити)изследвани, инкубирайки ги със суспензия от овчи еритроцити (третирани или нетретирани с антиген) и преброявайки броя на образуващите розетка клетки.
Инхибирането на миграцията на макрофагитевъзниква под въздействието на специфичен антиген. Има няколко модификации на теста, най-често срещаният е капилярен. Сегмент от капиляр, пълен с клетки, се поставя в ямка с хранителна среда и към него се добавя изследваният антиген. След култивиране на клетките в продължение на 24hпри 37° се измерва един от параметрите на клетките, мигриращи от капиляра (диаметър, зона на миграция и т.н.). Съотношението на експерименталния параметър към контролата (без антиген) е индексът на миграция. Реакцията се счита за положителна, ако експерименталните и контролните стойности се различават с повече от 20%. Описани са методи за оценка на клетъчна миграция от агарозна капка, съдържаща клетки и клетъчна миграция от агарозно гнездо. Като тестови клетки в клиниката най-често се използват кръвни левкоцити, а експериментално - макрофаги и понякога лимфоцити. Клетъчната миграция се инхибира от медиатори, освободени от лимфоцити, сенсибилизирани към този антиген, които винаги присъстват в суспензията на тестовите клетки: фактор на инхибиране на миграцията на макрофагите (MIF), фактор на инхибиране на миграцията на левкоцитите (LIF) и др. Реакциите на инхибиране на миграцията на макрофаги и левкоцити отразяват състояние на свръхчувствителност от забавен тип.
Алергична промяна на левкоцитите- увреждане на левкоцитите под въздействието на специфичен алерген.
Тест за левкоцити с резистентна към глюкокортикоид фракция на лимфоцити— относителна и абсолютна стойност на лимфоцитите на единица обем кръв,
Библиография:Имунологични методи, изд. X. Фримел, прев. от немски., М., 1979; Медуницин Н.В. Свръхчувствителностзабавен тип, М., 1983; Патогенезата на алергичните процеси в експеримента в клиниката, изд. А.М. Чернуха и В.И. Пицки, стр. 206, М., 1979; Пицки В.И. и други методи за определяне на глюкокортикоид-резистентна фракция на лимфоцити в периферна кръв и лимфоидни органи, Pat. физиол. и експериментирайте. тер., № 5, стр. 82, 1986, библиогр.; Фрадкин В.А. Диагностика на алергии чрез реакции на кръвни неутрофили, М., 1985.