Оцветяване по Грам, Андромеда
Оцветяване по Грам
Малко история
Грам учи ботаника в университета в Копенхаген и е асистент по ботаника на зоолога Япетус Стеенструп. Работата с растения му позволи да научи основите на фармакологията и да се научи да използва микроскоп. Постъпва в медицинско училище през 1878 г. и завършва през 1883 г.
Между 1878 и 1885 г. Грам пътува из Европа. В Берлин през 1884 г. той разработва метод за разделяне на двата основни класа бактерии. Тази техника, методът на оцветяване по Грам, продължава да бъде стандартна процедура в медицинската микробиология.
Оцветяването по Грам се основава на разликите в структурата на клетъчната стена на прокариотите. Грам-положителните бактерии имат дебела, здрава, просто подредена стена (с дебелина над 50 nm).Основният компонент на клетъчната стена на тези бактерии е многослоен пептидогликан (муреин), изграден от техния остатък от N-ацетил мурамова киселина. Силата на линейния полимер се дава от напречни тетрапептидни кръстосани връзки, свързващи отделните слоеве на пептидогликана. Тейхоевите или липотейхоевите киселини (от гръцки teichos - стена) са ковалентно свързани с петидогликана на клетъчната стена на грам-положителните бактерии, чиито молекули са вериги от 8-50 остатъка глицерол и рибитол, свързани с фосфатни мостове. Молекулите на тейхоевата киселина са адхезионни рецептори (адхезини), специфични антигени на много бактерии. Протеините (A, M, T, R и т.н.) могат да бъдат свързани с пептидогликан, които също са разположени навън в клъстери. Тези протеини са антифагини, репеленти на фагоцитозата и рецептори за антитела. Смес от S.aureus и E.coli
Грам-отрицателните бактерии съдържат много малко количество неомрежен пептидогликан. Над слоя муреин е периплазменото пространство.играещи важна роля в метаболитните процеси (периплазмени ензими) Следва външната мембрана, която има структура, характерна за биологичните мембрани. Външният лист на външната мембрана съдържа липополизахарид (LPS), който се състои от три компонента: липид А, основна (основна) част или сърцевина и полизахаридна верига, образувана от повтарящи се олигозахаридни последователности.
Основното багрило се свързва интензивно от муреиновия слой. Тъй като този слой в грам-отрицателните бактерии е много тънък и защитен от външната мембрана, тези микроорганизми адсорбират много по-малко багрило от грам-положителните.
Йодът образува сложен комплекс с багрилото и муреина, който по-трудно се отмива с избелващи разтвори. Диференциращите разтвори измиват цялото багрило от клетъчната стена на грам-отрицателните бактерии, докато грам-положителните все още съдържат достатъчно количество багрило.
Допълнителна боя оцветява обезцветените грам-отрицателни бактерии в контрастен цвят.