Определяне на циановодородна киселина
Определяне на синилна киселина
дефиниция на качеството. Проба с бензидин и пикратни хартии. Изследваният материал (стомашно съдържимо или хранителна субстанция), предварително добре смлян в хаван, в количество 10-15 g се поставя в конична колба и леко се подкислява с 1% разтвор на солна киселина. Колбата се затваря плътно със запушалка, към която са прикрепени две индикаторни хартии за циановодородна киселина - бензидин и пикрат. Лентите хартия се закрепват така, че да не докосват тестваното вещество. Колбата се поставя в термостат при температура 30-35 ° C. В присъствието на циановодородна киселина бензидиновата хартия става синя, а пикратната хартия придобива червеникаво-оранжев цвят. Ако хартиите не променят цвета си в рамките на 48 часа, можем да приемем, че циановодородната киселина не се съдържа в тестовия материал.
Проба с пикратна хартия може частично да служи за грубо количествено определяне на циановодородна киселина. В последния случай се поставя по малко по-различен начин. Натрошеният материал се поставя в колба и, без да се подкиселява, се навлажнява с вода до консистенция на полутечна каша. Колбата се затваря с тапа с прикрепена към нея лента от пикратна хартия и се поставя в термостат при температура 35-38 °С за 4 часа. розово до средно червено - стотни от процента; интензивен червен до тъмно червено-кафяв цвят - десети от процента.
Приготвяне на бензидинова хартия: накиснете ленти от филтърна хартия с 3% разтвор на меден ацетат и ги изсушете; преди употреба те се навлажняват с 20% разтвор на бензидин ацетат.
Подготвя се пиратска хартияпо този начин: филтърната хартия се импрегнира с 1% разтвор на пикринова киселина, изсушава се, след това се навлажнява с 10% разтвор на натриев карбонат; подсушава се отново и се нарязва на тесни ивици. Хартията е с лимоненожълт цвят.
За грубо количествено определяне на циановодородна киселина в тестовия материал можете също да използвате проба с гваякова хартия. Малко количество (10-15 g) от изпитвания материал се поставя в конична колба, навлажнена с дестилирана вода и подкислена с 5-6 ml 5% разтвор на винена киселина. Колбата се затваря с коркова запушалка, към която е прикрепена лента хартия, импрегнирана с разтвор на гваякова смола. Такива парчета хартия се приготвят предварително, като се импрегнират с разтвор със следния състав: 0,1 g гваякова смола се разтваря в 50 ml 95-градусов етилов алкохол, този разтвор се смесва с 15 ml воден разтвор на меден сулфат (1: 1000) и с този смесен разтвор се импрегнира филтърна хартия.
При наличие на циановодородна киселина в проба от изследваното вещество, взета в количество от 0,05 mg, гваяковата хартия веднага ще се оцвети в интензивно синьо, докато при наличие на циановодородна киселина в количество от 0,001 mg, посиняването настъпва след 1-2 минути. Ако за известно време хартията не промени цвета си, можем да предположим, че циановодородната киселина и нейните соли отсъстват в изследваната храна.
Появата на синьо или синьо-зелено оцветяване може да се дължи на наличието на циановодородна киселина, цианиди, окислители и амоняк. Следователно тази реакция има безусловно значение само с отрицателен резултат, което показва липсата на циановодородна киселина. В случай на положителна качествена реакция с една или друга от горните проби, за да се изясни въпросът за съдържанието на циановодородна киселина, е необходимо да се прибегне допо-нататъшно изследване на фуража чрез по-специфични методи.
Реакция на образуване на пруско синьо. Първо, циановодородната киселина трябва да бъде изолирана от изпитваното вещество. Това може да се получи чрез парна дестилация. 100-150 g натрошен фураж се смесва с вода до консистенция на течна каша, подкислява се с винена киселина и се прехвърля в колба с кръгло дъно. След това колбата се прикрепя към хладилник, горната част на която се спуска в колбата с 5 ml вода. Отделно парогенераторът се загрява до кипене и при сглобяването на цялото устройство се закрепва парогенераторът и се загрява банята под колбата.
Дестилацията трябва да се извършва бавно, като се регулира чрез нагряване на парогенератора. Първо се получава малко количество дестилат от една проба, която се подлага на тест за пруско синьо. Към дестилата се добавя разтвор на сода каустик, докато се получи ясно изразена алкална реакция, след това една капка прясно приготвени разредени разтвори на железен сулфат (FeSO4) и железен хлорид (FeCl3), старателно се разклащат и подкиселяват с разредена солна киселина (1: 3) до леко кисела реакция на лакмус. В зависимост от количеството циановодородна киселина се появява синя утайка или оцветяване - синьо, синьо-зелено, зелено. При много малки количества циановодородна киселина може да се появи утайка или оцветяване след 24-48 часа.Тази реакция е специфична. Чувствителността на реакциите е 1: 5 000 000.
За да се открият много малки количества циановодородна киселина в изследваното вещество, се препоръчва също да се прибегне до създаване на микрореакция за циановодородна киселина. За възпроизвеждане на такава реакция са необходими предметно стъкло с отвор и полирано покривно стъкло, съответстващо на него. Една капка извадка се поставя във вдлъбнатината на предметното стъкло и върху долната повърхност на покривното стъклостъкло - капка 10% разтвор на сребърен нитрат, леко оцветен с метиленово синьо. При наличие на циановодородна киселина в дестилацията, капка течност върху покривното стъкло става мътна поради образуването и утаяването на неразтворим сребърен цианид. Под микроскоп можете да видите малки кристали от сребърен цианид под формата на сини игли и пръчици.
Проба с амониев полисулфид [(NH4)2S2]. 5-10 ml от получения дестилат се поставят в порцеланова чаша, добавят се няколко (5-7) капки 5% разтвор на амониев полисулфид, 3-5 капки 10% разтвор на сода каустик и внимателно се изпаряват до сухо на водна баня. Полученият след охлаждане остатък се подкислява с 10% разтвор на азотна киселина и след това се добавя 1 капка 20% разтвор на железен хлорид (FeCl3). В присъствието на циановодородна киселина разтворът придобива кървавочервен цвят от образувания железен тиоцианат [Fe(CNS)3l.
Тест по Kolypgof. Около 10 ml от изследвания дестилат се поставят в колба, добавят се 20 mg железен сулфат и 10 капки разтвор на карбонат и натриев бикарбонат (8 g NaCOa-10H3O и 8 g NaHCO- в 100 ml дестилирана вода), разклаща се добре и се оставя затворено за половин час, след което се подкислява със сярна киселина. Ако в дестилата има циановодородна киселина (до 5 mg на 1 литър), веднага след подкисляването се появява син цвят.
Аргентометричен метод (метод на Либих). Полученият дестилат се титрува с 0,1 i. разтвор на сребърен нитрат в присъствието на няколко капки калиев йодид (10%), докато се появи неизчезваща мътност. Когато разтвор на сребърен нитрат се добави на капки към алкален разтвор на HCN, на мястото, където са паднали капките, се образува бяла утайка от сребърен цианид, която веднага изчезва при разбъркване на течността, тъй като AgCN се разтваря в излишък от цианидкалий за образуване на сребърен цианид калий: AgCN + KCN Ag (CN)aK.
Веднага след като целият цианоген се преобразува в сребристо-син калий, следващата капка AgN03 дава неизчезваща мътност: Ag(CN) 2K h AgN03 ->gt; I\N03 + 2AgCN. Така две частици CN съответстват на една молекула AgNO3.
Процентното съдържание на HCN се изчислява по формулата:
Ако първоначалната проба от изпитвания материал не е равна на 100 g, тогава количеството HCN, получено по формулата, трябва да се раздели на количеството на пробата и да се умножи по 100.
Тъй като HCN обикновено присъства в много малки количества в изследваните храни, по-добре е дестилатът да се титрува от микробюре.
Претеглена част от изпитвания материал се натрошава едро и се поставя в 500 ml колба с плоско дъно. Към него се добавят 3 ml сярна етер за допълнително подобряване на екстракцията на циановодородна киселина, затваря се с гумена запушалка и се оставя за 6 ч. След това 100 ml вода се излива в колбата и се оставя в продължение на 12-24 часа при температура не по-висока от 20 ° C, като се разклаща в началото и преди дестилацията. През това време настъпва хидролиза на гликозидите в изследвания материал.
След това циановодородната киселина се дестилира по обичайния начин (виж по-горе) с водна пара, получена от парогенератора. Дестилатът, съдържащ циановодородна киселина, се събира в приемна колба, в която преди дестилация се наливат 20 ml 0,01 N солна киселина. разтвор на живачен нитрат (в зависимост от очакваното количество циановодородна киселина количеството на разтвора на живачен нитрат трябва да се увеличи или намали) и 10 ml 8N. разтвор на азотна киселина (за всеки 100 ml дестилация). Когато се дестилират 150 ml течност, дестилацията е завършена, краят на форестоса се измива с няколко ml дестилирана вода, дестилацията се охлажда (ако е необходимо) и се извършва титруването.
Да прогони2 ml индикатор (наситен разтвор на желязо-амонячна стипца) се добавят към приемника и се титруват директно в него с 0,01 N. разтвор на амониев тиоцианат, като се разбърква, докато се появи устойчив розов цвят. Преди титруването се установява съотношението между използвания разтвор на живачен тиоцианат и амониев тиоцианат.
При изчисляване на съдържанието на циановодородна киселина в тестовия фураж (материал) се приема, че 1 ml 0,01 N. разтвор на живачен тиоцианат съответства на 0,00027 g (0,27 mg) циановодородна киселина.
Съдържанието на циановодородна киселина (mg%) се изчислява по формулата:
Определянето на циановодородна киселина в сорго се извършва по следния начин. От различни места в полето се вземат няколко опитни растения, които се отрязват в самата основа. След това с остър нож или по-добре с бръснач се изрязват тънки напречни срезове от долната част на стъблото, които се третират с йоден разтвор и се гледат под микроскоп, лупа или просто с просто око (на бял фон). В случай на наличие на голямо количество нишесте в стъблата, върху участъците на последните се получава плътен син или черен цвят (когато се гледа с невъоръжено око, той е просто тъмен). Такива растения обикновено съдържат поне 0,1% HCN (сухо тегло) и са опасни за хранене на животни. Ако в стъблата има малко нишестени зърна, тогава синьо или черно оцветяване не се появява изцяло върху целия участък, а само около васкуларните влакнести снопове. В този случай соргото съдържа по-малко от 0,1% HCN (сухо тегло) и не е опасно за хранене на животните сутрин и вечер. Ако участъци от стъблата от йод изобщо не посиняват, тогава соргото не съдържа HCN и може да се дава на добитък по всяко време без страх.