Правила за повторно засяване на микроорганизми в лабораторията
Микроорганизмите обикновено се отглеждат в лабораторни условия в епруветки, петриеви панички, върху течни или твърди хранителни среди.
При прехвърляне на микроорганизми от една среда в друга или при извличане на част от клетките за приготвяне на микропрепарат е необходимо стриктно да се спазват условията, които биха предпазили културата от замърсяване с други микроорганизми, както и персонала от инфекция от микроорганизми, присъстващи в тестовия материал.
За приготвяне на препарат от микроорганизми, отгледани на повърхността на плътна хранителна среда, или за прехвърляне на култура от една среда в друга, се използва бактериологичен цикъл.
Примката е тънка платинена или нихромова тел, прикрепена към метален държач. Краят на телта е огънат под формата на пръстен с диаметър около 2 mm, който улавя малко количество микробна маса.
Но преди такава примка да бъде въведена в епруветка, колба или петриево блюдо с култура, тя трябва да бъде стерилизирана, тоест присъстващите в нея микроорганизми трябва да бъдат унищожени. Стерилизирането на бактериологичния контур се извършва в пламъка на горелка, така че телта да се нагрява равномерно навсякъде. Само след такава стерилизация примката може да бъде въведена в епруветка с култура от микроорганизми.
Докосването на твърде гореща примка за култура може да повреди клетките, така че примката трябва да се охлади предварително чрез докосване на вътрешната повърхност на епруветката или хранителната среда без микробни клетки.
Извличането на микроорганизми от епруветка за приготвяне на препарата или за прехвърляне в друга среда се извършва по следния начин.
Епруветката с културата се взема в лявата ръка, така че цялата повърхност на хранителната среда с бактериите, отглеждани върху нея, да е ясно видима.микроорганизми. Тръбата трябва да е в леко наклонено положение. Примката за повторно засяване се взема в дясната ръка и се държи по същия начин, както се държи лъжица по време на хранене (за тези, чиято работна ръка е лявата, работата се извършва в огледален образ на дясната ръка). Без да освобождавате бримките, отворете епруветката, от която е взета културата. Те го правят по следния начин: с малкия пръст и безименния пръст на дясната ръка притискат тапата към дланта на ръката си и я изваждат от епруветката. Корковата тапа, притисната към дланта с пръсти, се запазва през цялата последваща манипулация. В никакъв случай не трябва да се поставя на масата, за да не се замърсява околната среда с микрофлората, чрез нея и културата в епруветката, а също и с цел микробите в епруветката да не заразят околната среда и работещите с тях.
След отстраняване на запушалката от епруветката, краищата на отворената епруветка с култура се изгарят в пламъка на горелка и едва след това стерилната примка се въвежда в епруветката.
Вземайки малко количество микробна маса от повърхността на субстрата, примката се отстранява от тръбата, като се уверите, че прехвърленият материал не докосва стените или ръбовете на тръбата. Краищата на тубата отново се обгарят в пламъка на горелката, след това корковата тапа се изгаря и тубата се затваря с нея. Ако краят на корковата тапа светне, трябва бързо да се въведе в епруветката, където тапата ще изгасне поради липса на кислород.
Запушена епруветка с култура се поставя в стелаж и извлеченият материал се използва за приготвяне на микропрепарат или за прехвърляне на културата в прясна среда.
Ако се субкултивира върху наклонена агарна среда, тогава примката се вкарва в епруветката до дъното на хранителната среда в капка кондензирана вода и, леко докосвайки повърхността на средата с примката, повдигнете примката нагоре с движения, подобни на удар. Засяването трябва да се извърши така, че да не се повредятповърхността на хранителната среда. При прехвърляне в течна среда (в колба или епруветка) примката с микробната маса се потапя директно в средата.
Клетките на микроорганизмите, останали на бримката след повторно засяване или приготвяне на микропрепарат, внимателно се изгарят в пламък на горелка. Калцинирането на примката започва от участъка на телта, съседен на пръстена, така че микробната маса, останала върху примката, да изсъхне. След това примката се прехвърля във вертикално положение и се запалва до червено. Само тогава примката може да бъде поставена на място.
Когато е необходимо да се подготви препарат или да се посее повторно културата на микроорганизми, отгледани в течна хранителна среда, по-добре е да се използва стерилна пипета, а не цикъл.
Пипетата се изважда с горния край от хартията или контейнера, в който е била стерилизирана, и се поставя в епруветката или колбата за култура, като се спазват всички предпазни мерки, описани по-горе. Изборът на течна култура с пипета може да се извърши с помощта на гумена круша. Използваната пипета трябва незабавно да се постави в контейнер с дезинфекционен разтвор, без да се докосват околните предмети.
При засяване на материал в петриево блюдо капакът трябва да се отвори само леко, за да не се замърси културата с микроби от въздуха, които заедно с прахови частици, плаващи във въздуха, могат да се утаят върху хранителната среда в блюдото.
Всички описани манипулации трябва да се извършват в близост до пламъка на горелката бързо, внимателно, внимателно, за да не се замърси културата с чужди микроорганизми и да не се разпространява изследваната култура в околната среда.
По време на работа не можете да правите резки движения, да говорите и да се движите из лабораторията.
Културите от микроорганизми, които не са необходими за по-нататъшна работа, трябва да бъдат унищожени. За това съдове с отпадъцикултури от микроорганизми (колби, епруветки, дюшеци, петриеви панички и др.) се автоклавират и едва след това се измиват.