Процесът на подготовка на клетки за гинекологични прегледи
Този материал е ръководство с инструкции за употребата на продуктите TriPath при подготовката на клетки за гинекологични изследвания чрез течна цитология. Специалистите отCYTOVET използват ключовите точки от това ръководство за извършване на течни цитологични изследвания при животни.
Предназначение
Използва се за ин витро диагностика.
Методът представлява процес на получаване на клетъчни препарати на течна основа. Той е предназначен да замени традиционния метод за подготовка на цитонамазка, използван при скринингови тестове за рак на маточната шийка.
Средата за събиране и транспортиране на гинекологични проби, тествани в BD ProbeTec™ Chlamydia trachomatis (CT) Q I и Neisseria gonorrhoeae (NG) Q I амплифицирани ДНК анализи, е SurePath® Preservative Fluid. За инструкции относно използването на SurePath® Preservative Fluid за подготовка на пробите, използвани в тези анализи, вижте листовките в опаковките на комплекта за анализ.
Кратък преглед и описание
Скринингът за рак на маточната шийка с помощта на метода Papanicolaou (Pap) включва микроскопско изследване на екто- и ендоцервикални клетъчни проби, нанесени върху предметни стъкла и оцветени по Pap метода. Цервикалният цитологичен скрининг с цитонамазка е намалил смъртността от инвазивен цервикален карцином с 50-70%. Тъй като цервикалната цитология е скринингово изследване, всички открити патологии трябва да бъдат потвърдени чрез хистологично изследване.изследвания.
За точна диагноза цитонамазка е важно да следвате процедурите за вземане и подготовка на проби. За пълна точност рандомизирането и еднаквото подбиране на част от извадката е изключително важно. Традиционната процедура за вземане на цитонамазка не включва смесване на пробата преди подготовка на предметното стъкло. Тъй като клетките на устройството за вземане на проби са потопени в слуз, тези клетки, прехвърлени върху предметното стъкло, може да не са представителна проба за всички клетки в тампона. Клетките се прехвърлят върху предметното стъкло в зависимост от това къде са били в устройството за вземане на проби. Много клетки остават върху устройството за вземане на проби.
Хетерогенността на типичната проба от цервикален тампон прави конвенционално приготвените тампони трудни за подготовка, изследване и интерпретация. Често големи площи от традиционно приготвени слайдове са покрити с примеси, възпалителни клетки и ламели от епителни клетки, които могат да скрият ценен диагностичен материал. Освен това, ако цитонамазката не се фиксира веднага след подготовката, клетъчната морфология може да се изкриви, докато изсъхне (въздушни артефакти).
Принципи на методиката
Методът на течната цитология е процес на получаване на клетъчни препарати от цервикални клетки на течна основа.
Гинекологичните проби се събират от квалифициран медицински персонал с помощта на устройство за разбиване (напр. Cervex Brush®) или комбинирано устройство за ендоцервикална четка и шпатула (напр. Cytobrush® Plus GT или Pap Perfect® от MedScand (USA) Inc.) с подвижни глави. Главата на устройството се отстранява от дръжката и се поставя във флакон с течен консервант.SurePath® консервираща течност. Бутилката се затваря със запушалка, поставя се етикет и се изпраща със съответните документи в лабораторията за обработка.
Cytobrush Plus шпатула.
В лабораторията консервираната проба се смесва чрез разклащане и след това се прехвърля в епруветка с PrepStain® Density Reagent (плътен реагент). Етапът на обогатяване, който се състои от утаяване на лекарството върху центрофуга през плътен реагент, частично премахва примесите и излишните възпалителни клетки от лекарството, които не са необходими за диагностика. След центрофугиране, епруветката с обогатения клетъчен компонент се възстановява с дейонизирана вода и клетъчният материал се суспендира повторно с помощта на пипетен дозатор чрез последователно изтегляне и освобождаване на течност. След това материалът на пробата се прехвърля в камера за утаяване PrepStain®, поставена върху предметно стъкло SurePath® PreCoat. Клетките се отлагат чрез гравитация по време на кратък период на инкубация. Излишният материал се отцежда. Слайдът SurePath® PreCoat се оцветява, избистря и покрива с покривно стъкло. Клетките са подредени в кръг с диаметър 13 mm. Микропрепаратът се изследва под микроскоп от квалифициран цитотехнолог или патолог, като се вземат предвид и други данни за пациента.
Слайдове PreCoat (SurePath® PreCoat Slides).
Ограничения
Предупреждения
- SurePath® Preservative Fluid съдържа воден разтвор на денатуриран етилов алкохол и не е предназначен за поглъщане. Сместа съдържа малки количества метилов и изопропилов алкохол, които при поглъщане могат да бъдат опасни за здравето и да доведат до слепота.
- PrepStain® Density Reagent съдържа натриев азид. Азиднатрият може да реагира с медни и оловни тръби, за да образува силно експлозивни метални азиди. Когато изхвърляте, изплакнете обилно с вода, за да предотвратите натрупването на азид.
Предпазни мерки
- Трябва да се спазват указанията за добра лабораторна практика, както и всички процедури, препоръчани при използване на метода на течната цитология.
- Всички реактиви са стабилни до посочения срок на годност при препоръчаните условия на съхранение.
- Бактериалното замърсяване на реагентите може да доведе до неправилни резултати.
- Замяната на предметни стъкла SurePath® PreCoat може да доведе до неоптимални резултати.
- Избягвайте пръскане и пръскане на течности. Използвайте подходящи средства за защита на ръцете и очите и защитно облекло.
- SurePath® Preservative Fluid е бактерициден и е тестван срещу следните микроби: Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Candida albicans, Mycobacterium tuberculosis и Aspergillus niger. Въпреки това, универсалните предпазни мерки за работа с телесни течности трябва да се спазват през цялото време.
Вземане на допълнителна аликвотна част
Предлага се бутилка за събиране на тампони с течен консервант в обем, достатъчен за събиране на до 0,5 ml хомогенна смес от клетки и течност за допълнително изследване преди извършване на SurePath® Pap тест (тест на Папаниколау). Оставащият обем след вземане на пробата е достатъчен за теста на Папаниколау.
Въпреки че няма доказателства за ефекта от вземането на аликвотна част от бутилка за събиране на тампони с течен консервант върху качеството на пробата за цитологично изследване, в редки случаи по време на този процесвъзможно е неравномерно разпределение на съответния диагностичен материал. Ако резултатите от теста не съвпадат с медицинската история на пациента, може да се наложи здравните специалисти да вземат нова проба. Освен това цитологията служи за клинични цели, различни от тестване за болести, предавани по полов път (ППБ), така че аликвотирането може да не е подходящо в някои клинични ситуации. Ако е необходимо, може да се вземе отделна проба за тестване за полово предавани болести, вместо да се вземе аликвотна част от флакона с тампон с течен консервант.
При аликвотиране на проби с ниска клетъчна сатурация, SurePath® Preservative Fluid Collection Vial може да остави недостатъчно материал за извършване на SurePath® Pap тест (тест на Papanicolaou).
Аликвотна част трябва да бъде отстранена преди извършване на SurePath® Pap тест. Само една аликвотна част може да бъде изтеглена от флакона с тампон с течен консервант преди извършване на Пап тест, независимо от размера на аликвотната част.
Флакон за събиране на тампони с течен консервант (SurePath® Preservative Fluid Collection Vial).