Хибридомна технология за получаване на моноклонални антитела

Въвеждането на антиген (бактерии, вируси и др.) предизвиква образуването на различни антитела срещу много детерминанти на антигена. През 1975 г. G. Köhler и K. Milyptein (носители на Нобелова награда) получават моноклонални антитела с помощта на хибридомна технология.

Моноклоналните антитела са имуноглобулини, синтезирани от един клетъчен клон. Моноклоналното антитяло се свързва само с една антигенна детерминанта на антигенна молекула.

Хибридомната технология е сливането на лимфоцити от далака на предварително имунизирани организми с определен антиген с помощта на полиетилен гликол с миеломни (ракови) клетки, способни на безкрайна пролиферация (деление). Хибридните клетки се избират в HAT среда (среда, съдържаща хипоксантин, аминоптерин и тимидин). Неразпръснатите лимфоцити умират във всяка тъканна култура. Миеломните клетки също умират в тази среда, тъй като са били дефектни в HGPT (хипоксантин-гуанозин-фосфорибозилтрансфераза). Избират се клетъчни клонинги, които синтезират необходимите антитела (фиг. 28). Желаните клонове могат да се съхраняват замразени.

По този начин хибридомите са безсмъртни клетъчни клонове, които синтезират моноклонални антитела.

Получаването и използването на моноклонални антитела е едно от значимите постижения на съвременната имунология. Те могат да се използват за идентифициране на всяко имуногенно вещество. В медицината изотопно белязани или белязани по друг начин моноклонални антитела могат да се използват за диагностициране на рак и локализиране на тумори, за диагностициране на миокарден инфаркт. Получени са моноклонални антитела срещу различни патогени: малария, трипанозомоза, лайшманиоза, токсоплазмоза и др. Учените смятат, че в много близко бъдеще моноклоналните антитела ще заемат доминираща позиция вдиагностика на заболяването. За използване в терапията моноклоналните антитела могат да се комбинират с лекарство (например токсични вещества) поради специфичността на антителата, те пренасят това вещество директно до раковите клетки

технология

Ориз. 28. Получаване на моноклонални антитела (но Milypteinu, 1982)

или патогенни микроорганизми, което може значително да повиши ефективността на лечението. Моноклоналните антитела (срещу H-Y антигена) могат да се използват за определяне на пола при говеда на предимплантационния етап на развитие, както и за стандартизиране на методите за тъканно типизиране по време на трансплантация на органи, при изследване на клетъчни мембрани (по този начин са изследвани Т-лимфоцитните антигени), за изграждане на антигенни карти на вируси, патогени.

Лекция-15 ембриогенетично инженерство.

План:КЛОНИРАНЕ НА ЕМБРИОН НА БОЗАЙНИК

Ембриогенетичното инженерство е активно преструктуриране на генома на животните чрез намеса в тяхното развитие в най-ранните етапи от онтогенезата. Пренареждането на генома е реконструкция на ембриони чрез клониране, сливане или директно инжектиране на чужда ДНК в техните ядра. Въпреки това, получаването на ембрионални клонове, химери или трансгенни животни е възможно само в резултат на успешна трансплантация на реконструиран ембрион.

Трансплантацията е метод за ускорено размножаване на високопродуктивни животни чрез получаване и трансфер на един или повече ембриони от високоценни животни (донори) към по-малко ценни животни (реципиенти). Използването на трансплантация дава възможност да се получи десетки пъти повече потомство от една генетично ценна женска.

Технологията за трансплантация се основава на големи постижения в биологията на репродукцията на животните и включва следнототехники: 1) хормонална индукция на суперовулация; 2) осеменяване на донори със сперма на производители, оценени по качеството на потомството; 3) екстракция и оценка на качеството на ембриони, консервиране и трансплантация или криоконсервация на ембриони в течен азот, размразяване и трансплантация.

Трансплантацията на ембриони се използва за следните цели:

възпроизвеждане на генетично ценни индивиди; с помощта на този метод може да се реши проблемът с бързото създаване на високопродуктивни линии и семейства, устойчиви на болести;

получаване на идентични животни чрез отделяне на ранни ембриони. Това дава възможност да се изследва взаимодействието между генотипа и околната среда и да се изясни влиянието на наследствеността върху икономически полезните признаци. Технологията за отделяне на ембриони позволява едната половина от получената бластоциста да бъде подложена на дълбоко охлаждане, а другата половина да прерасне в животно. Ако продуцентът (от едната половина на бластоциста) се окаже генетично ценен, тогава е възможно да се възпроизведе неговото копие след определен период от време;

запазване на мутантни гени, малки популации и генофонд и породи;

получаване на потомство от безплодни, но генетично ценни животни според генотипа;

5) откриване на вредни рецесивни гени и хромозомни аномалии;

повишаване устойчивостта на животните към болести;

контрол на болестите чрез замяна на вноса и износа на животни с вноса и износа на криоконсервирани ембриони;

аклиматизация на вносни животни от чужди породи;

определяне на пола на ембриона и получаване на животни от определен пол;

получаване на химерни животни, които се развиват от ранни ембриони, конструирани от бластомери на различни животни.