Изследването на микроорганизмите в родното състояние - Студопедия
Допълнителни материали по темата.
В живо състояние микроорганизмите се изследват, за да се определи тяхната форма, подвижност или да се определи прижизнената им вътрешна структура. Нативните и оцветените препарати се изследват по метода на "натрошени" или "висящи" капки.
Интравитално (жизнено) оцветяване Към капка 0,001% разтвор на метиленово синьо или неутрално червено се добавя суспензия от микроорганизми. След това пригответе препарата "натрошена" или "висяща" капка и го микроскопирайте.
Приготвяне на препарата "натрошена" капка. Капка течна бульонна култура се нанася в центъра на обезмаслено предметно стъкло. Ако културата се отглежда върху плътна хранителна среда, тогава върху стъклото се нанася капка стерилен изотоничен разтвор на натриев хлорид, след което културата се докосва с примка и бактериите, прилепнали към нея, се разбъркват в приготвената капка. Можете предварително да приготвите суспензия от микроорганизми в изотоничен разтвор и да вземете капка от нея. Поставете покривно стъкло върху материала за изследване, така че да няма въздушни мехурчета. Трябва да се вземе капка с такъв размер, че да запълни цялото пространство между покривното и предметното стъкло и да не излиза извън ръбовете на покривното стъкло. Лекарството може да се разглежда както със сухи системи, така и с потапяне. Микроскопски, използвайки 40x или 90x обективи. Много добри резултати се получават при използване на устройство за тъмно поле или фазов контраст. Препаратите изсъхват бързо, затова, ако трябва да се изследват не веднага, а след известно време, те се поставят във влажна камера (блюдо на Петри), на дъното на която се поставят 2-3 мокри кръга филтърна хартия, покрити с две сухи. За да се избегне изсушаване на лекарството и причинено от конвекциятурбулентно движение на течността, такива препарати могат да бъдат запечатани. За целта трябва да използвате парафиново масло, смес от равни части парафин и вазелин или лак за нокти.
В центъра на мокрия препарат бързо възниква недостиг на кислород. Всъщност това помогна на Пастьор да открие анаеробния метаболизъм: наблюдавайки препарата, той забеляза, че облигатните анаероби запазват подвижността си само в центъра, но не и по краищата.
Подвижните микроорганизми понякога могат да бъдат адсорбирани върху стъкло; в такива случаи мобилността е по-лесна за наблюдение при "висяща" капка.
Приготвяне на препарата "висяща" капка. Препаратът се приготвя върху покривно стъкло, в центъра на което се нанася една капка бактериална суспензия. След това предметно стъкло с отвор, чиито краища са предварително смазани с вазелин, се притиска към покривното стъкло, така че капката да е в центъра на отвора, в резултат на което стъклата се слепват. Бързо обърнете образеца с главата надолу с покривното стъкло. Получава се херметически затворена камера, в която капката не изсъхва дълго време. При правилно подготвен препарат капката виси свободно над кладенеца, без да докосва дъното или ръба му. Микроскопски от страната на покривното стъкло, като първо трябва да намерите ръба при слабо увеличение и стеснен отвор, като използвате сух 8х обектив, след това при голям и продължете наблюдението (фиг. 3).
При изучаване на мобилността на микроорганизмите е необходимо да се разграничи истинската мобилност от брауновото движение, което е резултат от въздействието върху бактериите от движещи се в разтвора молекули и се проявява под формата на трептения. Много мобилни микроорганизми се движат много бързо, което затруднява точното наблюдение. Чрез добавяне на метилцелулоза към суспензията на микроорганизмите е възможно да се намали скоростта на тяхното движение исъздайте условия, при които движението на камшичетата става видимо.
Недостатъкът на метода е наличието на редица оптични дефекти, свързани с кривината на отвора, което предотвратява получаването на висококачествени микроснимки, както и невъзможността за използване на тъмно поле и фазово-контрастни устройства поради голямата дебелина на слайдовете с дупки.
Не намерихте това, което търсихте? Използвайте търсачката:
Деактивирайте adBlock! и обновете страницата (F5)наистина е необходимо