Метод за лечение на състояния, придружени от хиперагрегация на тромбоцитите
Изобретението се отнася до медицината и е предназначено за лечение на състояния, придружени от хиперагрегация на тромбоцитите. За да направите това, към автоплазмата се добавя аденозинтрифосфорна киселина (АТФ), определя се нейното количество, достатъчно за максимална агрегация на тромбоцитите, и се инжектира в същия обем непокътната автоплазма. След това се центрира и полученият супернатант (автохемокомпонентен препарат) се прилага интравенозно в количество 5,0 -10,0 ml. ЕФЕКТ: методът позволява ефективно лечение на състояния, придружени от хиперагрегация на тромбоцитите. 2 табл.
Настоящото изобретение се отнася до терапията и е предназначено за лечение на състояния и заболявания, придружени от хиперагрегация на тромбоцитите. Понастоящем в резултат на многобройни експериментални и клинични проучвания е установено, че повишената способност на тромбоцитите да агрегира придружава хода на редица сериозни човешки заболявания: инфаркт на миокарда, сърдечна и церебрална исхемия, атеросклероза, захарен диабет, хипертония и др. По-специално при захарния диабет хиперкоагулацията е един от етиологичните фактори на диабетната ангиопатия, която става водеща причина за инвалидност и смърт на пациенти. Хиперагрегацията води до натрупване на тромбоцитни агрегати в циркулиращата кръв и в крайна сметка до съдова оклузия. Известно е, че с прогресията на горните заболявания се увеличава хиперкоагулацията на кръвта и депресията на фибринолизата.
При лечението и профилактиката на заболявания и състояния, придружени от хиперагрегация на тромбоцитите, понастоящем широко се използват антиагреганти: пентоксифилин (трентал); тиклопедин (тиклид).
Недостатъкът на горните лекарства, както интравенозно, така и орално, е хеморагиченусложнения, тромбопения, левкопения, агранулоцитоза, тежки алергични реакции, както и невъзможността за използване на тези лекарства поради техните противопоказания при тежка склероза на коронарните съдове и мозъчните съдове, с обостряне на язва на стомаха и дванадесетопръстника, чернодробни заболявания, бременност и кърмене.
Целта на предложения метод е да се получи лекарство, което разширява обхвата на употреба и ви позволява да получите желания дезагрегиращ ефект при липса на странични хеморагични усложнения и др. поради употребата на лекарство, което има както дезагрегиращ, така и фибринолитичен ефект.
Въз основа на това беше поставена задачата да се получи лекарство от автоплазма, което има дезагрегиращ и фибринолитичен ефект. Тъй като веществата, инхибиращи фибринолизата и агрегантите, преобладават в тромбоцитната запушалка, докато веществата с противоположния ефект, тъй като се образува тромбоцитен съсирек (тромб), се секретират от тромбоцитите в плазмата и се отвеждат от кръвния поток, следователно, чрез задействане на механизма на необратима тромбоцитна агрегация (in vitrum) с последващото им отстраняване, се получава плазма - автохемокомпонентно лекарство с дезагрегиращ и фибринолитичен ефект. Образуване на тромбоцитна тапа, т.е. задействането на механизма на необратима агрегация възниква, когато тромбоцитите са изложени на тромбин, колаген и ADP (аденозин дифосфорна киселина). Горните агрегати се използват широко в клиничната и лабораторна практика. Известно е, че аденозинтрифосфорната киселина (АТФ) не се класифицира като агрегант и следователно никога не е била използвана в клиничната и лабораторна практика като такъв. Въпреки това през 1965 г. G. Marr показа, че в плазмата, след няколко секунди, 50% от АТФ се превръща в ADP (Barkagan 3.S.,"Хеморагични заболявания и синдроми". М., 1980, стр. 12-13).
Проучванията показват, че предложеният метод за лечение на състояния, придружени от хиперагрегация на тромбоцитите чрез интравенозно приложение на автохемокомпонентно лекарство, значително намалява агрегацията на тромбоцитите (P 0,01) (виж Таблица 1). Освен това в автолекарството се наблюдават следните качествени и количествени промени в сравнение с интактната плазма: концентрацията на плазминоген се увеличава (P 0,01), концентрацията на инхибиторите на протеолитичните ензими намалява (P 0,01) (1 - протеазен инхибитор; 2 - макроглобулин), концентрацията на фибриноген и фибронектин намалява (P 0,01) с едновременно повишаване на фибрино литична активност (P 0,01) (виж Таблица .2). Методите за определяне на показателите, посочени в таблицата, са добре известни (Калашников В.В., Маркова 0.А., Платонова Т.К., Свищев А.В. // Резюмета на международния симпозиум "Проблеми на развитието на работата по лабораторно диагностично оборудване". ВНМТО Министерство на здравеопазването на СССР, Смоленск, 1988 г., стр. 41-44 и стр. 47-50; Андреенко Г.В., Карабасова М.А., Лютови Л.В. и др. "Методи за изследване на фибринолитичната кръвна система. - М., Издателство на Московския университет, 1981, стр. 43-46; Манчини Г., Ваерман И.П., Карбонава А.0. Хереманс И.Е. Единично-радиално-дифузионен метод за имунологично количествено определяне на протеини, в Peeters H (Ed.). Protides of thebiological Fluids, Elsevier Publis ching Comp. Amsterdam, London, New-Jork, 1964; 11th colloguirn, Brudes, 1963, pp. te, което е необходимо за максимална агрегация на автотромбоцитите. Резултатите от тези изследвания послужиха като предпоставка за предложения метод на лечение.
Методът се провежда по следния начин: взема се кръв от кубиталната вена в количество, като правило, 10,0 ml със спринцовка с вместимост 10,0 ml, която съдържа антикоагулант - хепарин в количество 34 IU. След това агрегацията на тромбоцитите се определя съгласно добре известния метод на Born-O'Brien (Born V.R. Aggregation of blood platelets by adenosine diphosphate and its reversal. Nature, 1962, vol. 194, p. 927-939), но като се използва аденозинтрифосфорна киселина ATP като агрегант в количество от 0,1-0,5 mg/ml, в зависимост от индивидуална реакция на тромбоцитите към експозиция на АТФ за постигане на максимална тромбоцитна агрегация (средно до 50% спад в оптичната плътност на тромбоцитите). След това получената суспензия се центрофугира при скорост 3000 rpm в продължение на 2-3 минути и така полученият супернатант (автохемокомпонентен препарат) се инжектира венозно в количество от 5,0-10,0 ml.
Пример 1. Пациент N.I.D., 37 години. Диагноза. Диабет. Препролиферативна диабетна ретинопатия и на двете очи. Страдащ от диабет от 20 години. През последните 2 години е отбелязано намаляване на зрителната острота и на двете очи. Коефициентът на тромбоцитна агрегация е повишен - 165,0 mm. От 4 години приема трентал и тиклид, но коефициентът на тромбоцитна агрегация остава рязко повишен.
Преди лечение. Коефициент на агрегация на тромбоцитите 170,0 mm. Флуоресцентна ангиография на фундуса на двете очи разкрива области на исхемия на ретината. Зрителна острота: дясно око -0,3 с корекция = 0,4, ляво око - 0,3 с корекция = 0,5.
Лечение. Взета е кръв от кубиталната вена в 20,0 ml със стерилна спринцовка с вместимост 10,0 ml, в която преди вземането на кръвта има хепарин 34,0 единици. Еритроцитите се отделят от кръвната плазма по конвенционален начин. Получената плазма се разделя за удобствона порция от 2,0 мл. В първия се определя агрегацията на тромбоцитите (съгласно горните методи), като постепенно се добавя АТФ. Максималната тромбоцитна агрегация се постига при общо приложение на АТФ 0,4 mg/ml. Същото количество АТФ - 0,4 mg/ml се инжектира едновременно в останалите порции интактна плазма и при достигане на максимална агрегация на тромбоцитите се извършва центрофугиране при скорост 3000 rpm за 2-3 минути и така полученият супернатант (автохемокомпонентен препарат) се инжектира интравенозно в количество 5,0-10,0 ml, след 14 дни, Общо 5 инжекции.
Резултати от лечението. Коефициентът на тромбоцитна агрегация се понижи до горната граница на нормата - 41,0 mm. Зрителната острота се повишава с 0,1 във всяко око; броят на зоните на исхемия на ретината намалява.
Пример 2. Пациент Ш.В.А., на 58 години, страда от коронарна болест на сърцето (ангина пекторис) от около 9 години. През последната година болката в областта на сърцето зачести до 4-5 пъти на ден, въпреки максималния прием на Sustok, Nitrong и Panangin, синдромът на болката не спря до 2 часа, болката беше придружена от усещане за липса на въздух (задух) и сърцебиене. В допълнение към промените в електрокардиограмата, характерни за коронарната болест на сърцето, коефициентът на агрегация на тромбоцитите се увеличава почти 5 пъти (180,0 mm).
Лечението се провежда с автохемокомпонентно лекарство (на фона на конвенционалното лечение - нитронг, сустак), което се прилага интравенозно в количество от 5,0-10,0 ml, необходими са 4 инжекции за курса на лечение. На втория ден след началото на лечението състоянието на пациента се подобри значително - задухът изчезна, честотата и интензивността на болката в областта на сърцето намалява при изследване на тромбоцитната агрегация - беше разкрит изразен ефект на дезагрегация. Коефициентът на агрегиране намалява до 46 mm.В допълнение, ЕКГ показва положителна динамика на процеса, което показва ефективността на използваното лекарство.
Метод за лечение на състояния, придружени от хиперагрегация на тромбоцитите, чрез интравенозно приложение на лекарство - дезагрегант, характеризиращ се с това, че като дезагрегант се използва автохемокомпонентно лекарство, което е супернатант от автоложна кръв на пациента, получена в резултат на агрегация на тромбоцитите при едновременно въздействие на 0,1 - 0,5 mg АТФ на 1 ml плазма и последващо центрофугиране, и лекарството се прилага изтегля се в количество 5,0 - 10,0 мл.