Методи за приготвяне и оцветяване на препарати за микроскопия - Студопедия
Стъпки за направа на цитонамазка:
1. Препаратите за микроскопско изследване се приготвят върху чисти предметни стъкла, като повърхността им се обезмаслява със сапун и след това се отстранява със суха нехигроскопична памучна вата. Капка чешмяна вода се нанася върху обезмаслената стъклена повърхност (капката се разпространява върху добре обезмасленото стъкло).
2. Бактериална примка, изработена от платинова, нихромова или никелова тел, се стерилизира чрез нагряване до червено в пламъка на горелка, като се държи в пламъка първо вертикално, а след това хоризонтално, след което частта от държача, съседна на примката, се изстрелва. Стерилната примка се използва за вземане на микробната маса, като се държи в дясната ръка като молив. В лявата ръка се взема епруветка или колба с хранителна среда, така че повърхността с растежа на културата да е обърната нагоре, запушалката се отстранява от съда с малкия пръст на дясната ръка, като се притиска към дланта на ръката ви. Краищата на съда се изгарят в пламъка на горелка, в него се вкарва калциниран контур, който се докосва с вътрешната повърхност на съда или с хранителна среда, свободна от растеж на микроорганизми, за да се охлади контурът. Те улавят малко количество микробна маса, като я разпределят равномерно в капка вода под формата на кръг или овал с диаметър около 1 см. Ако микроорганизмите се отглеждат върху течна хранителна среда, културата се нанася върху стъклото с примка или стерилна пипета. Пипетата се дезинфекцира с 3-5% разтвор на фенол, остатъците от културата върху бримката се изгарят в пламък на горелка и бримката се поставя вертикално в статив или специално стъкло. Рънък и равномерен препарат може да се получи с помощта на техниката за приготвяне на кръвна натривка. За да направите това, ръбът на смляното стъкло се довежда до капка течност или кръв, нанесена върху края на стъклото под ъгъл от 45 °, капкасе разнася по ръба на това стъкло, след което се прави намазка с бързо движение на шлифовано стъкло. Намазката се изсушава на въздух.
3. Изсъхналата намазка се фиксира, за да убие микробните клетки и да ги прикрепи към стъклото. Обикновено се използва физичен метод - трикратно фиксиране на петна върху пламъка на горелка или спиртна лампа (по 1 сек.) с петна нагоре. Правилно фиксираният препарат, нанесен върху гърба на ръката, предизвиква усещане за изразена топлина, но не и парене. В никакъв случай стъклото не трябва да се прегрява и да се фиксира мокро петно. Това води до деформация и рязко намаляване на размера на вече малък обект на изследване. Химическият метод на фиксиране е по-нежен. Използвайте етанол (10-15 минути), ацетон (5 минути), смес от Никифоров (смес от равни обеми етанол и етер-10-15 минути), метанол (3 минути), пари на осмиева киселина, формалин (няколко секунди).
4. Оцветяване на лекарството по прост начин: 2-3 капки воден разтвор на фуксин (1-2 минути), метиленово синьо (3-5 минути) или друго багрило се нанасят върху намазката с помощта на пипета. След оцветяването натривката се промива с вода, изсушава се с филтърна хартия и се микроскопира с помощта на имерсионна система.
Сред сложните методи за оцветяване на микроорганизми е широко разпространен методът на Грам (обикновено в модификацията на Синев), който има голямо диференциално диагностично значение в бактериологията.
Не намерихте това, което търсихте? Използвайте търсачката: