НЯКОИ ХАРАКТЕРИСТИКИ НА ИЗПЪЛВАНЕ НА НЕРВНАТА ТЪКАН - Studiopedia
Методи за откриване на елементи от нервната, мастната. еластични структури. Хистохимия.
Оцветяване на нервната тъкан При морфологичните изследвания на нервната тъкан на светлооптично ниво се използват голям брой методи за оцветяване, много от които са модифицирани. Най-често това са селективни (елективни) методи, използвани за идентифициране на един или два елемента. За конкретна цел се използват комбинирани методи.
ФИКСАЦИЯ При изследване на нервната тъкан от прости фиксатори най-често се използват 10 - 20% разтвор на формалдехид и 96% и 100% алкохол, от фиксиращи смеси - сублимат и пиридин. Има и специфични фиксатори, които се използват само при изследване на елементи от нервната тъкан.
Фиксираща смес Ramon y Cajal (за откриване на глия):
неутрален формалин 15 ml амониев бромид 20 g
дестилирана вода 85 мл
Сместа се използва за осребряване на глия по Ramon y Cajal - Hortega. Продължителността на фиксиране на тънки (до 1,5 см) парчета материал е 2-15 дни. Измиване в течаща вода.
Фиксираща смес Ramon y Cajal (за откриване на неврофибрили):
пиридин 40 мл? 96% алкохол 30 мл
Продължителност на фиксиране 2 ч. Измиване в течаща вода 1 час.
ДЕХИДРАТАЦИЯ
Характеристика на обработката на нервната тъкан е нейната пълна дехидратация. За дехидратиране на парчета с дебелина 5–6 mm се използва следната схема:
100% алкохол I 6 часа
100% алкохол II 6 часа
Време за дехидратация 32 часа
НЯКОИ ХАРАКТЕРИСТИКИ ПРИ ИЗПЪЛВАНЕ НА НЕРВНАТА ТЪКАН
Нервната тъкан за хистологично изследване се излива в парафин, целоидин и желатин. Техника на вграждане в парафин и целоидинна този етап няма особености на обработката на нервната тъкан.
Изливане в желатин по Снесарев Методът е подходящ за ембриологични изследвания. Има предимството, че не мачка материала. Препоръчва се за разкриване на фината междуклетъчна структура на съединителната тъкан, както и за някои цитологични изследвания.
За пълнене вземете безцветен прозрачен хранителен желатин и първо пригответе 25% разтвор от него. За да направите това, нарежете на ситно необходимото количество желатин, изсипете в буркан с широко гърло и поставете в термостат на 37 ° C, докато се разтвори. След това част от готовия желатин се разрежда наполовина с топъл 1% разтвор на фенол (карболова киселина) и така се получава 12,5% разтвор. Желатиновите разтвори се приготвят най-добре в малки количества, ако е необходимо. След фиксиране, добре измитият материал се прехвърля в 12,5% разтвор на желатин, където се съхранява, в зависимост от размера на парчетата, от 1-2 часа до 1-2 дни, след което се прехвърля в 25% разтвор на желатин при 37 ° C за същото време. След заливането следва бързо охлаждане в хладилник и пресоване в 5-10% формалин. Блоковете се изрязват само на микротом за замразяване.
Първите специални хистохимични изследвания са извършени от френския учен F. Raspail (1825-34). Г. започва да се развива интензивно от 40-те години. 20 век, когато се появяват надеждни методи за определяне на протеини, нуклеинови киселини, липиди, полизахариди и някои неорганични компоненти в клетката. С помощта на хистохимични методи беше възможно например за първи път да се покаже връзката между промените в количеството на РНК и синтеза на протеини и постоянството на съдържанието на ДНК в хромозомния набор.
4.Видове микроскопия.
Техники на светлинна микроскопия Техники на светлинна микроскопия (осветяване и наблюдение).Методите за микроскопия се избират (и предоставят конструктивно) в зависимост от естеството и свойствата на изследваните обекти, тъй като последните, както беше отбелязано по-горе, влияят на контраста на изображението.
Методът на светлото поле и неговите разновидности Методът на светлото поле в пропусната светлина се използва при изследване на прозрачни препарати с абсорбиращи (светлопоглъщащи) частици и части, включени в тях. Това могат да бъдат например тънки цветни срезове от животински и растителни тъкани, тънки срезове от минерали и др.
Методът на тъмното поле и неговите разновидности Използва се специален кондензатор за подчертаване на контрастиращите шарки на неоцветен материал. В този случай лъчите от осветителя попадат върху препарата под наклонен ъгъл и обектът на изследване изглежда осветен в тъмно поле.
Метод на фазов контраст Когато светлината преминава през цветни обекти, амплитудата на светлинната вълна се променя, а когато светлината преминава през неоцветени обекти, фазата на светлинната вълна се променя, което се използва за получаване на изображение с висок контраст.
Поляризационна микроскопия Поляризационната микроскопия ви позволява да изучавате ултраструктурната организация на тъканните компоненти въз основа на анализ на анизотропия и/или двойно пречупване
Метод на интерферентен контраст Метод на интерферентен контраст (интерферентна микроскопия) е, че всеки лъч се разделя на две, когато влезе в микроскопа. Единият от получените лъчи се насочва през наблюдаваната частица, а другият - покрай нея по същия или допълнителен оптичен клон на микроскопа. В очната част на микроскопа двата лъча се свързват отново и се намесват един в друг. Един от лъчите, преминавайки през обекта, изостава във фаза (придобива разлика в пътя спрямо втория лъч). Стойностот това забавяне се измерва от компенсатора
Метод за изпитване на луминесценция Методът за изпитване на луминесценция (флуоресцентна микроскопия или флуоресцентна микроскопия) е да се наблюдава под микроскоп зелено-оранжевото сияние на микрообекти, което възниква, когато те са осветени със синьо-виолетова светлина или ултравиолетови лъчи, невидими за окото.
Ултравиолетова микроскопия. Основава се на използването на ултравиолетови лъчи с дължина на вълната под 380 nm, което позволява увеличаване на разделителната способност на лещите от 0,2. 0,3 µm до 0,11 µm. Изисква използването на специални ултравиолетови микроскопи, които използват ултравиолетови осветители, кварцова оптика и преобразуватели на ултравиолетово към видимо. Много вещества, които изграждат клетките (например нуклеинови киселини), селективно абсорбират ултравиолетовите лъчи, което се използва за определяне на количеството на тези вещества в клетката.
Не намерихте това, което търсихте? Използвайте търсачката: