Определяне на мутации в резистентността на вируса на хепатит В към антивирусни лекарства

Лекарствена резистентност (резистентност) - естествената или придобита способност на причинителя на заболяването да поддържа жизнена активност при излагане на лекарства. Като правило, лечението на CHB се извършва с помощта на нуклеозидни / нуклеотидни аналози - инхибитори на РНК-зависима ДНК полимераза (обратна транскриптаза), която се кодира от P-гена на HBV. Антивирусното лекарство се интегрира във вирусния геном по време на обратна транскрипция и конкурентно инхибира вирусната репликация, т.е. тези лекарства ефективно намаляват вирусния товар при пациенти с CHB. Когато възникнат определени точкови мутации в HBV P гена, нуклеозидните/нуклеотидни аналози губят способността си да се интегрират в нарастващата ДНК верига поради конформационна промяна в локуса на свързване на обратната транскриптаза. Мутациите на лекарствена резистентност се класифицират на:

основни (първични) - мутации, които намаляват чувствителността към антивирусно лекарство;
компенсаторни (вторични) мутации, които компенсират функционални дефекти в полимеразната активност, свързани с появата на първична мутация.

Резистентните мутации се идентифицират чрез номера на позицията на аминокиселината в домейна на обратната транскриптаза, като аминокиселината от див тип е посочена вляво от номера на аминокиселината, а вариантът на мутацията на резистентност - вдясно. Например, M204I е заместване на метионин, аминокиселина от див тип, в позиция 204 на домена на обратната транскриптаза с аминокиселината изолевцин, чието присъствие в тази позиция е свързано с появата на мутации на лекарствена резистентност.

Информацията за наличието на мутации на лекарствена резистентност в HBV генома е необходима при избора на лекарстваантивирусна терапия при пациенти, лекувани преди това с нуклеозидни/нуклеотидни аналози.

Показания за изследване

Изследването е предназначено за пациенти с CHB в определени случаи преди започване на антивирусна терапия и по време на приема на антивирусни лекарства (Таблица 8).

Критерии за назначаване на изследвания за определяне на резистентността на HBV към антивирусни лекарства

AVT етап Характеристики на пациента Цел на изследването

Преди HTP	Пациентът не е лекуван преди това.	Не
Предишно прекъснато лечение	да
Неуспешно лечение	да
Докато приемате PVP	Първична резистентност (HTP седмица 12)	да*
Вирусологичен рецидив	да

*Ако пациентът продължава да се придържа към лечението.

Материал за изследванеКръвна плазма.

Методи за лабораторни изследвания

В клиничната диагностика определянето на мутациите в резистентността на вируса на хепатит В към антивирусни лекарства включва PCR амплификация на обратния домен на HBV P гена и последващ анализ на специфични нуклеотидни последователности, като се използват следните методи:

директно секвениране на амплифицирания фрагмент. Този метод е в състояние да открие резистентни мутации, ако делът на вирусната популация с мутацията е повече от 20%. Методът позволява да се идентифицират всички мутации, включително допълнителни потенциални компенсаторни и нови неизвестни;

Особености на интерпретацията на резултатите

В резултат на изследването лекарят получава информация за всяка аминокиселинна позиция, свързана с мутация на лекарствена резистентност, и клиничната интерпретация на резултатите.изследване:

HBV може да бъде резистентен към специфично антивирусно лекарство, т.е. основните мутации на резистентност към това лекарство са идентифицирани в обратната област на HBV P гена;
HBV може да е чувствителен към антивирусното лекарство, т.е. не се откриват резистентни мутации;
HBV може да развие резистентност към антивирусно лекарство, т.е. открити са само компенсаторни (вторични) мутации на резистентност към това лекарство, не са открити големи мутации.

ВЪЗМОЖНИТЕ ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ ТРЯБВА ДА СЕ КОНСУЛТИРАТЕ СЪС СПЕЦИАЛИСТ