Пик - вътрешен стандарт - Голямата енциклопедия на нефта и газа, статия, страница 2
Пик - вътрешен стандарт
Методът на вътрешния стандарт има следните предимства: не е необходимо да се измерва точно количеството на инжектираната проба, не е необходимо да се определя величината на реакцията на детектора или да се поддържа строго постоянна, тъй като не се определят абсолютни стойности, а тяхното съотношение. Пикът на вътрешния стандарт трябва да бъде напълно отделен от пиковете на други съединения, но в същото време трябва да бъде разположен достатъчно близо до пика на аналита, концентрацията на стандарта трябва да бъде приблизително същата като концентрацията на аналита и накрая, стандартът трябва да бъде структурно подобен на аналита. [16]
Той излиза приблизително в средата на хроматограмата на суровия нефт и има въглеводороден атомен номер, който не пречи на други съединения. Приготвя се смес от суров нефт, съдържаща 5% (тегл.) С20Н42; неговият обем на пробата от 0,4 µl се инжектира в колоната. Точността на този метод зависи до голяма степен от правилното определяне на площта на пика на вътрешния стандарт. Относително малки грешки при изчисляването на площта на този пик могат да доведат до значителни грешки при определяне на резултатите от симулираната дестилация. Точността на метода е ограничена и от факта, че количеството продукт, използван като вътрешен стандарт, не трябва да надвишава 5% (маса), в противен случай детекторът може да бъде претоварен. Всичко това води до ниска сходимост на резултатите от определянията. [17]
След това проверете линейността на детектора и определете коефициента на нормализиране. Проби от стандартни разтвори A, B и C се инжектират в инструмента в три екземпляра. За всеки разтвор определете средната стойност на съотношението на площта на пика на пестицида към площтапик на вътрешния стандарт и изчислете коефициента на нормализиране по формулата: K ( SsH. [18]
За да се елиминира ефектът от размера на пробата, понякога се използва вътрешен стандартен метод за количествено определяне на състава на сместа. Съгласно този метод към пробата се добавя известно количество от подходящото чисто вещество (вътрешен стандарт); обикновено се използва вещество, което не присъства в пробата. Пикът на вътрешния стандарт трябва да е близо до пика на определения компонент, но не и да го припокрива. За по-голяма точност височината на пика на вътрешния стандарт не трябва да се различава значително от височината на пика на аналита. За построяване на калибровъчна графика се приготвят изкуствени смеси с точно определено количество вътрешен стандарт и получената смес се хроматографира. [20]
След влизане в режим устройството трябва да регистрира хоризонтална базова линия. За да се провери стабилността на инструмента, се инжектират 3 μl стандартен разтвор С. След като преминат всички пикове и показанията на инструмента достигнат базовата линия, тази операция се повтаря още два пъти. Определете съотношението на площта на пика на пестицида към площта на пика на вътрешния стандарт. Ако се окаже по-високо, е необходимо да се провери херметичността на газопроводите на устройството и да се извърши допълнителна стабилизация на колоната. [21]
Масата на сорбитола, добавен към анализираната смес, трябва да осигури неговата концентрация в разтвора, приблизително съответстваща на концентрацията на отделните монозахариди. Изчислението се извършва съгласно кривата на калибриране. Графиката е получена според хроматографията на референтни разтвори, съдържащи индивидуален монозахарид и сорбитол. Графиката за калибриране е изградена в координати: по абсцисата - масата на чистия монозахарид в референтния разтвор, по ординатата - съотношението на площта на характеристикатапик на същия монозахарид до площта на пика на вътрешния стандарт. Графиката има линейна форма. Начертава се права линия с помощта на метода на най-малките квадрати. [23]
В епруветка внимателно се претеглят около 0,01 g парафин и се добавят точно 0,1 ml разтвор с точно известно количество от съответния въглеводород с нечетен брой въглеродни атоми. Обикновено n-нонадеканът се използва в концентрация от 0-25 до 0-50%, в зависимост от вида на пробата. 1 μl от този разтвор се инжектира в хроматографа и се задава същият температурен режим, както при анализа на разпределението по броя на въглеродните атоми. Хроматографията продължава, докато се освободят всички измерими компоненти и е желателно максималният пик да заема цялата скала. Измерете, както е описано по-горе, площта на пика на вътрешния стандарт (напр. n-нонадекан) и площта на пика на най-тежкия компонент. [24]