Препоръки на международни организации на имуногенетиците за изследване на донори и реципиенти в

Виктория Белавина преди 2 години Прегледи:

1 Препоръки на международните организации по имуногенетика за изследване на донори и реципиенти за трансплантация на твърди органи Оксана Гулидова, Дмитрий Рудик ЗАО BioChemMac, Москва Член на Европейската асоциация по имуногенетика (EFI)

2 Статистика на СЗО За извършваните трансплантации на органи в света годишно: бъбречни трансплантации чернодробни трансплантации сърдечни трансплантации белодробни трансплантации трансплантации на панкреас Нужда от бъбречни трансплантации 50 трансплантации на 1 милион души Общият брой трансплантации покрива около 10% от нуждата

3 Ръст на трансплантационната дейност в България Брой трансплантационни центрове в Руската федерация* 2009 бъбрек черен дроб 7 14 сърце 4 9 панкреас 2 5 бял дроб 1 3 Трансплантации на органи, извършени в Русия* 2009 бъбрек черен дроб сърце панкреас 8 19 бял дроб 1 12 Въз основа на населението на България от 146 милиона души, годишната нужда от бъбречна трансплантация е година Необходимостта е задоволена sfied с 13% *Според "Бюлетин по трансплантология и изкуствени органи", и g.

4 Кой разработва стандарти за трансплантационна диагностика Основните международни организации, които обединяват специалисти в областта на имуногенетиката и лабораторната трансплантология са: Американското дружество за тъканна съвместимост и имуногенетика ASHI (Американско дружество за хистосъвместимост и имуногенетика), основано през 1972 г., официален уебсайт на организацията Европейско дружество по имуногенетика EFI (Европейска федерация по имуногенетика), основано през 1972 г. 1985 г., официален уебсайторганизация Азиатска асоциация по имуногенетика APHIA (Asia Pacific Histocompatibility and Immunogenetics Association), събрала делегати на първото си заседание през 1989 г., официалният сайт на организацията

5 годишни конференции на дружествата по имуногенетика

6 Научни и информационни публикации 1. Човешка имунология (AHSI) излиза ежемесечно. Списанието публикува статии за структурния полиморфизъм на HLA гените при здрави хора и връзката с различни заболявания, изследвания върху структурата и функцията на молекули, които играят роля в активирането и регулирането на имунната система, влияещи върху имунния отговор при пациенти с трансплантации, автоимунни или инфекциозни заболявания. Статии по невроимунология, имунофармакология. 2. Бюлетин на EFI Тримесечен бюлетин, който информира за работата на различни регионални комисии и дружества, обучителни семинари, школи, конференции и други събития, свързани с дейността на EFI. 3. Месечно списание Tissue Antigen, съдържащо резюмета на тематични HLA конференции и месечни актуализации на базата данни на HLA алели 11/(ISSN)

9 HLA типизиране HLA типизирането е определянето на генетичното съответствие на тъканните (или левкоцитни) антигени на донора и реципиента (HLA генотип / фенотип) Методи: серологични (лимфоцитотоксичен тест) генетични (SSP, SSO, SBT, NGS)

10 Изисквания на стандарта EFI за HLA типизиране за донорство на органи Открити локуси За реципиента: HLA-A, B, DRB1 За донора: HLA-A, B, C, DRB1, DQB1 Степен на разделителна способност Ниска (Ниска резолюция)

11 HLA-A*02:01:01:02 HLA HLA-A HLA-A*02 HLA-A*02:01 HLA-A*02:01:02 HLA-A*13:01:01:02 HLA-A*24:09N HLA-A*30:14L HLA-A*24:02:01:02L HLA-B*44:02:0 1:02S Комплекс за хистосъвместимост Генен комплекс върху хромозома 6 Специфичен локусHLA (напр. HLA-A) Група от алели, кодиращи A2 антиген (антигенен епитоп, разпознат от специфични HLA антитела) Специфична HLA алелна специфичност с ниска разделителна способност, съответстваща на определена аминокиселинна последователност на антигена (протеина) Заместване на единичен нуклеотид с висока разделителна способност в екзона (кодираща област) в сравнение с див тип om A*02:01:01:01 Не води до аминокиселинна субституция Показва нулев алел на „нулевия“ алел, който не се експресира Показва алел, кодиращ силно редуциран протеин на клетъчната повърхност (Ниско) Показва алел, кодиращ силно намален протеин на клетъчната повърхност, където мутацията се намира извън кодиращия регион (екзон) Алелът кодира протеин, който се експресира само като секреторна молекула HLA-A*32:11Q Известно е, че протеинът се експресира, но локализация изразяването му остава под въпрос

12 Причини за имунологично отхвърляне В идеална ситуация, ако органи са трансплантирани със 100% съвпадение за всички HLA антигени, или както обикновено се нарича „0“ несъответствие (с нулево несъответствие), реакцията на имунологично отхвърляне би била практически намалена до нула. На практика обаче това е трудно постижимо и 90-95% от трансплантациите се извършват с различна степен на генетично несъответствие между HLA антигените на реципиента и донора.

13 Причини за имунологично отхвърляне Развитието на имуносупресивни лекарства през 1980-те и 1990-те се фокусира върху потискането на Т-клетъчния алоимунен отговор. Тъй като са разработени успешни и ефективни протоколи, честотата на острото отхвърляне е намаляла значително,както и честотата на отхвърляне на трансплантант. Тези постижения подчертаха сравнително слабата способност за контролиране на процесите на антитяло-медиирано или хуморално отхвърляне и насочиха вниманието към относителното значение както на острото, така и на хроничното антитяло-медиирано отхвърляне (AMR) отхвърляне на трансплантант.

14 Стратегически аспекти Стратегически задачи на лабораторията - Анализ на съдържанието на анти-hla антитела в реципиентите от "списъка на чакащите" преди трансплантация - Разделяне на реципиентите в рискови групи в зависимост от сенсибилизацията от съществуващи антитела - Определяне на донор-специфични HLA антитела (DSA) след трансплантация за ранно прогнозиране на риска от отхвърляне

15 - Преди трансплантация: Стратегически аспекти HLA типизиране на реципиента в локуси A,B,DRB1 HLA типизиране на донора в локуси A,B,C,DR,DQ Определяне на профила на HLA антитела на реципиента Изчисляване на PRA% PRA = Брой специфичности x честота на поява в популацията x 100%

16 Доклад за резултатите от изследването на реципиента Дати на вземане на проби и анализ на пробите HLA-генотип PRA% - показва процента на потенциалните донори, срещу които реципиентът има HLA антитела Определяне на специфичността и оценка на нивото на антителата Вид на изследването и метод на анализ

17 Стратегически аспекти – Разделете реципиентите на рискови групи въз основа на съществуваща сенсибилизация Пациенти с много висок риск (със сенсибилизация) Пациенти с висок риск (DSA положителни/отрицателни за кръстосано съвпадение) Пациенти със среден риск (с анамнеза за сенсибилизация към донорни антигени, открити чрез CDC и твърдофазов имуноанализ, но в момента резултатите от теста са отрицателни) Пациенти с нисък риск (без сенсибилизация на антитела)

18Стратегически аспекти - Определяне на донор-специфични HLA антитела (DSA) след трансплантация за ранно прогнозиране на риска от отхвърляне Luminex тест с рекомбинантни антигени (LSA) Откриване на комплемент-фиксиращи антитела

19 Насоки за мониторинг на HLA антитела Консенсусни насоки относно проблемите на тестването и клиничното управление, свързани с HLA и не-HLA антитела при трансплантация, трансплантация и усилвател; Том 95, номер 1, 15 януари 2013 г.) Обобщени насоки за мониторинг на HLA антитела при трансплантация (резултат от обширни тестове и анализи, проведени във водещи клиники по света)

20 Метод за изключване на неприемливи донори Въвеждането на метода Luminex и развитието на мултиплексните технологии направи възможно точното определяне на наличието на неприемливи антитела, което преди не беше възможно, особено при пациенти с високо ниво на сенсибилизация

21 Наличие на анти-донорни антитела Наличието на донор-специфични антитела (DSA) не винаги е противопоказание, а по-скоро може да се счита за рисков фактор.Има два начина за намаляване на риска от отхвърляне на присадката и смърт: (а) чрез избор на донор, при който пациентът няма да има DSA; или (b) премахване на DSA по време на протоколи за десенсибилизация

22 Трансплантация без кръстосано съвпадение Трансплантацията на бъбрек и сърце може да се извърши без проспективен тест за кръстосано съвпадение чрез серология преди трансплантация, ако LSA (Luminex тест с рекомбинантни антигени) е ОТРИЦАТЕЛЕН

23 Luminex 200 универсална платформа за трансплантационна диагностика 1. Генетични тестове SSO HLA типизиране на A,B,C,DR,DQ локуси 2. Имунологични тестове Скрининг на антитела Идентификация на профила на антитела Кръстосано съвпадение Имунологични маркери за отхвърляне

25 Благодаря завнимание! Москва, Leninskiye Gory, Московски държавен университет, 1 сграда 11 Телефон: +7 (495)

---