Работата на ембриолога е ювелирна прецизност и липса на дреболии
В лабораторията на ембриолога няма дреболии - тук са важни температурата, влажността и висококачественото оборудване, което отговаря на най-високите стандарти на съвременните репродуктивни технологии. Но, разбира се, най-важната гаранция за успех е професионализмът и богатият опит, който ембриологът придобива в практиката и задълбочава чрез участие в международни научни събития.
Ниеразговаряхме за това със Сергей Александрович Коробков, клиничен ембриолог в клиниката по репродуктивни технологии Medkvadrat, член на Европейското дружество за човешка репродукция и ембриология (ESHRE).
Твоята работа все още изглежда като истинско чудо. Много пациенти дори няма да ви видят, а вие сте тези, които в даден момент правите всичко, за да се срещнат клетките на родителите. Интересно е да научите от самия експерт как точно се случва това.
Нека първо си припомним как се случва оплождането на човешки клетки in vivo. Освен това там наистина изглежда като чудо. Факт е, че яйцето е заобиколено от огромен брой помощни клетки. Те са свързани помежду си с различни извънклетъчни молекули, като в тази връзка участва специално вещество - хиалуронова киселина. Достъпът до яйцето е почти невъзможен. И така, в природата сперматозоидите изпълняват свръхестествена задача - те успяват да пробият до яйцеклетката през тази „козина“ от помощни клетки. Рецепторите на спермата реагират на наличието на хиалуронова киселина, която се намира в защитния слой - веднага щом рецепторите заработят, сперматозоидът претърпява реакция на капоцитоза. В главата му има капсула, а в нея специален ензим. По време на капоцитозата ензимът се освобождава иосвобождава пътя за сперматозоида, отслабва връзките между поддържащите клетки, позволява на собственика си да проникне в самото яйце. Сега за това, което се случва в клиниката. В клиниката извличаме зародишни клетки и ги виждаме какви са - така най-накрая ни става ясно каква помощна апаратура ще използвам аз като ембриолог. Яйчниците при жената се аспирират от репродуктивен специалист - те се изваждат от фоликулите с помощта на пункция. Обикновено яйцата почиват след пробиване два часа, защото по принцип това е стресова ситуация за тях и колкото и да се опитваме да ги поддържаме на постоянна температура и постоянна киселинност, стресът е неизбежен. А с яйцата трябва да се работи много внимателно.
Говориш за тях почти като за хора.
Какво означава "малко"?
Малко е, когато ембриологът има по-малко от четири яйцеклетки, с които да работи. Но това не означава, че твърде много е добре. За неопитен специалист една пункция може да доведе до събирането на 40 яйца. Това количество може да се дължи на прекомерна хормонална стимулация на пациента. Но това изобщо не означава, че всичките 40 ще бъдат подходящи за оплождане. А незряла клетка или неправилно подбрана сперма е неуспешна операция, пропиляно лечение, загуба на време. Нямаме право да го правим.
Тоест, всеки път, когато оценявате степента на риск, като вземете предвид характеристиките както на мъжките, така и на женските клетки?
Да, разбира се. Ако не искаме да рискуваме нито яйцеклетката, нито сперматозоидите, тогава преминаваме към процедурата ICSI. Когато подготвяме яйцеклетка за ICSI, ние внимателно я освобождаваме от вече споменатата "обвивка" от помощни клетки, събличаме я до така наречената "брилянтна черупка". Докъде обаче води това? На факта, че рецепторите на спермата не реагиратхиалуронова киселина, която присъства само в повърхностния слой. Ензимът не се изхвърля, а остава в главата - не настъпва реакция на капоцитизация. Обвивката на мембраните на спермата не се разрушава, както при естествения процес на оплождане. Съдържанието на сперматозоидите остава запушено в него - и за да се активира яйцеклетката и да настъпи оплождането, съдържанието на спермата трябва да навлезе в цитоплазмата на яйцеклетката. Как да разрушим целостта на мембраните му? Най-лесният начин е да отрежете опашката на сперматозоида.
Вижте: от една страна казвате, че яйцата изпитват стрес дори в резултат на пробиване, споменавате, че най-малката разлика в температурата, разликата в средата може да бъде критична. И от друга страна, клетките се нарязват, третират се с различни агенти, технологията за криоконсервация ви позволява да замразявате и съхранявате ембриони. Как е възможно всичко това едновременно?
Да, това е много умен парадокс. Факт е, че яйцата и ембрионите са доста прости форми на живот и учените някога са мислили как да ги спасят, дали е възможно да се застраховат, така да се каже, да се замразят шансовете за бъдещето. Разработени са специални криопротектори - вещества, които спомагат за запазване жизнеспособността на тъканите. В крайна сметка какъв е основният проблем, с който се сблъсква живият организъм при ниски температури? Това е образуването на водни кристали, които увреждат необратимо вътрешните структури на клетките. Има два основни начина да се избегне образуването на кристали: или да се премахне водата, да се замени водата с нещо друго, което ще ни позволи да поддържаме структурата на клетката - или да се опитаме да променим кристалното състояние на водата Първият метод се появи по-рано. Същността му е следната: клетките, предназначени за замразяване, се третират с криопротектор. Тогава идвазамразяването е много деликатен, сложен, дълъг процес (2-3 часа на проба), контролиран от компютърни програми, чиято цел е да следва модела на падане на температурата, при който ще се запази клетката. Размразяването е по-бързо, но цялата процедура като цяло изисква много време. За нашата сфера на работа, където всеки момент е от значение, това е много досадно. Затова всички ембриолози бяха щастливи, когато стана възможно да се използва вторият метод - витрификация. В този случай замръзването настъпва почти мигновено, температурата пада от стайна температура до -196. Водните кристали нямат време да се образуват - водата преминава в някакво аморфно състояние, стъклена.Но във всеки случай замразяването е наукоемка технология, трябва да направите всичко бързо и точно, работейки с микроинструменти, микрообеми.
Модерните технологии са това, което прави тази част от вашата работа осъществима, предполагам?
Разбира се, всичко е възможно само с помощта на специално оборудване - моят основен помощник по този въпрос се нарича микроманипулатор.Това е много голям и впечатляващ микроскоп, който ми позволява да управлявам своите микроинструменти с помощта на бутони, джойстици и различни допълнителни функции. Последните са специални микрокапиляри, едната държи яйцеклетката, другата спермата. Трета може също да се използва за нарязване на zona pellucida, ако се използва методът на "излюпване".
Как по принцип научавате за нови методи, постижения във вашата област?
Техниките в ембриологията се разпространяват бързо сред практикуващите. Това е напреднала област на медицината, медицинските центрове комуникират помежду си. Различните ноу-хау и открития, които допринасят за успеха на нашата работа, са много важни за нас - затова се опитваме да ги опознаем възможно най-скоро.уча. Вземете например метода за използване на хиалуронова киселина. Хиалуроновата киселина е най-важният реагент в ембриологията. Тъй като това е елемент от средата на яйцеклетката, зрелите сперматозоиди, а именно тези, които могат да оплодят яйцеклетката, имат рецептори за тази киселина. Незрелите имат или малко рецептори, или никакви. Съответно реакцията с хиалуронова киселина се превърна в начин за проверка на зрелостта на сперматозоида. А да знаем, че е узряло, означава да знаем, че ДНК-то в него не е фрагментирано и имаме всички шансове детето да се развие правилно и да се роди здраво. Методът е открит сравнително наскоро - и сега се използва в индустриален мащаб.