Тестове за дегранулация
Дегранулационните тестове са спомагателни методи за специфична алергична диагностика. Те включват индиректни и директни базофилни тестове, тест за разрушаване на мастоцитите (мастоцитите). Тестовете за дегранулация се използват, когато не са възможни директни алергични диагностични тестове, например при незабавни алергични реакции с алергени от неинфекциозен произход, главно с антибиотици от пеницилиновата серия, както и с поленови алергени и алерген от дерматофагоидни акари. Тестовете за дегранулация се провеждат при такива форми на алергични реакции като анафилактичен шок (не по-рано от 5-7 дни след шока), остра алергична уртикария, алергичен бронхоспазъм. Тестовете за дегранулация се използват и за гъбични инфекции, които могат да допринесат за кръстосана сенсибилизация към пеницилиновите антибиотици.
Когато се използват глюкокортикостероидни лекарства, не е препоръчително да се прибягва до тест за дегранулация. Положителен резултат е малко вероятен, когато тестовете за дегранулация се извършват след 1 година или повече от началото на алергичната реакция.
Индиректният базофилен тест се основава на изследването на морфологичните промени в базофилите на заека (индикатор). За тази цел базофилите първо се култивират с кръвния серум на пациента и след това се добавя алергенът. При наличие на алерген-специфични антитела настъпва дегранулация на базофилите. Неутралното червено селективно оцветява базофилните гранули в тухлено червено, което им позволява да бъдат разграничени от другите клетки. Резултатът се оценява под микроскоп с имерсионна система. При отрицателна реакция непроменените базофили имат закръглена форма, тухленочервени гранули са разположени вътре в клетката. При положителна реакция се отбелязва деформация на клетките,образуването на псевдоподии и в редки случаи освобождаването на гранули от клетката с нейното разкъсване. В експеримента се преброяват 100 базофили, а в контролата се изчислява процентът на морфологично променени клетки. Разликата между тях при положителен тест трябва да надхвърля 15%.
Директният базофилен тест (тест на Shelly) се основава на изследване на морфологичните промени в кръвните базофили на пациент с алергично заболяване при взаимодействие със специфичен алерген. Резултатите се оценяват по същия начин, както при индиректния тест.
Тестът за разрушаване на мастоцитите се състои в изследване на морфологичните промени в мастоцитите на плъхове, които възникват в резултат на взаимодействие с кръвния серум на пациента и специфичен алерген. Разрушаването на лаброцитите се проявява чрез тяхното подуване, по периферията се появяват вакуоли, в резултат на което клетката става като пчелна пита. Тестът се счита за положителен, когато броят на променените клетки надвишава 10%.
Само положителните резултати от теста за дегранулация имат диагностична стойност. Отрицателните резултати не гарантират липсата на алергични реакции към приложението на тестовите лекарства.