Антитела срещу кардиолипин в норма

срещу

Кардиолипинът е фосфолипид, локализиран в митохондриите на различни клетки, в който две молекули фосфатидна киселина са свързани с една молекула глицерол (дифосфатидилглицерол).

Този отрицателно зареден фосфолипид е изолиран за първи път от тъканите на сърдечния мускул, което определя името му.

Откриването на висок титър на антитела срещу кардиолипин се използва за диагностициране на APS. Въпреки това, откриването на антитела срещу кардиолипин, въпреки високата надеждност и възпроизводимост, в клиничната практика трябва да бъде допълнено с други методи за имунологична диагностика на APS, както и определянето на VA, тъй като антитела срещу кардиолипин се откриват в редица ситуации при малария, сифилис, туберкулоза и др.

Принцип на метода

Методите за количествено определяне на антитела срещу кардиолипин се основават на ELISA технологии. В първия етап, разредени проби от пациенти се инкубират в ямките на плаката. Ямките на плаките, използвани в комплекта, са покрити с високо пречистен кардиолипин. При наличие на специфични имуноглобулини в изследваната проба, последните се свързват с антигени на твърдата фаза. След добавянето на хромогена сместа придобива цвят поради разцепването му от пероксидаза.

Реактиви и оборудване

  • Гнезда на микроплака, покрити с високо пречистен кардиолипин.
  • ензимен конюгат.
  • Буфер за разреждане на пробата.
  • измиващ буфер.
  • Разтвор на тетраметилбензидин.
  • Стоп реагент.
  • Калибратори.
  • Оборудване за извършване на ELISA (миене, таблетен четец и др.).

Дистрибуторът на комплекта диагностични реагенти е CJSC Biokhimmak.

Кръвни проби за изследване

Като проба за определяне на концентрацията на антителакъм кардиолипин трябва да се използва PRP от стабилизирана с натриев цитрат кръв или серум.

Техника на изпълнение

Изследователската процедура трябва ясно да отговаря на инструкциите за комплекта реактиви.

Оценка на резултатите от изследването

Тъй като понастоящем няма международен стандарт за антитела срещу кардиолипин, резултатите от изследването се оценяват в относителни единици (U / ml).

За качествен контрол определете концентрацията на антитела срещу кардиолипин в положителните и отрицателните контроли.

Причини за грешки

  • Неспазване на температурния режим на съхранение.
  • Нарушаване на процедурата за пране (за ръчно пране е необходимо да се измие поне 4 пъти). След измиване изсушете плаката върху филтърна хартия, тъй като течността, която обикновено остава в ямките след измиване, може да попречи на действието на субстрата и да намали оптичната плътност на тестовата проба.
  • Смесване на реагенти от различни партиди.
  • кондензация на влага вътре в кладенците. За да предотвратите кондензация, не отваряйте торбата, докато не се затопли до стайна температура.

Други аналитични технологии Тъй като откриването на антикардиолипинови антитела се основава на отчитане на взаимодействието между антигена и антитялото, други технологии също са подходящи за тяхното откриване, което позволява да се маркират компонентите на имунното взаимодействие (ензим, радионуклид, флуоресцентно багрило и др.).