Диагностика в биотехнологиите

Пуснато в нед., 11/12/2011 - 15:17 от admin

Нови методи задиагностика в биотехнологиите, предвидени в изискванията на системата за качество НАССР

Откриването и количественото определяне на микроорганизми, които причиняват разваляне на храни, е предпоставка за гарантиране на тяхното качество. Какво се разбира под термина микроорганизми, развалящи храните? Това са микроорганизми, които могат да причинят видими или мирисни и вкусови промени във физичните и органолептичните свойства на продуктите в резултат на метаболитна активност. За откриване и определяне на броя на микроорганизмите в хранителните продукти се използват редица методи, които според метода за отчитане на броя на клетките могат да бъдат разделени на няколко групи:

използване на култивиране;
използване на микроскоп;
използване на други инструментални методи.

Диагностика в биотехнологиите. Тестване на HiDip слайдове (тестова повърхност). Кратка информация за слайдовия метод за контрол на стерилитета. Тестови слайдове HiDip Slides (тестова повърхност) се произвеждат от индийската компания HiMedia, която има представителство в Киев. Фирмата произвежда цяла серия от двустранни слайдове, които могат да се комбинират във всякакви комбинации (предоставени са варианти на възможни комбинации за различни видове комбинанти).

Фигури 1-3 показват двустранни микробиологични тестери - с розов бенгалски агар / триптон соев агар (едната страна на предметното стъкло е розов бенгалски агар за идентифициране на гъбична микрофлора; другата страна на плаката е триптон соев агар за идентифициране на бактерии). Тестовата процедура за тестери е показана на фигури 1-3.

Фигури 1-3 -Визуално представяне на техниката за микробиологичен контрол с помощта на слайдове

Rose Bengal Chloramphenicol Agar (RBCA) е селективен агар за откриване и изброяване на дрожди и плесени. Съдържа хлорамфеникол за потискане на бактериите и бенгалроза за ограничаване на размера на гъбичните колонии. Тази среда се препоръчва особено за пресни протеинови продукти, в които бактериалните замърсители са предимно грам-отрицателни микроорганизми. Когато бактериалното натоварване е много високо, се препоръчва добавяне на други антибиотици към хранителната среда, като гентамицин и окситетрациклин.

TGYA също често се използва за откриване на броя на плесени и клетки от дрожди. Medium TGCA (Tryptone Glucose Yeas Extract Agar) - малцов агар, триптон соев агар с екстракт от дрожди - подкислен със солна киселина. Тази културална среда се препоръчва главно за клетки, подложени на топлинен стрес, храни с висока киселинност и ниска водна активност (aw) и киселинни напитки. Агар с малцов екстракт, агар Czapec Dox или друга среда също може да се нанесе върху повърхността на предметните стъкла за идентифициране на колонии от дрожди и гъбички.

Фигура 4 - Външен вид на гъбични колонии върху агарово блюдо Фигура 5 - Външен вид на бактериални колонии върху

плоча с бенгалска роза - отгледани колонии от агар с екстракт от триптон глюкоза (триптон соев агар)

изглеждат като жълти или бели колонии

Нови методи задиагностикавбиотехнологиите, предвидени в изискванията на системата за качество НАССР

Диагностика в биотехнологиите - ускорено инкубационно тестване. Необходимостта от ускорени биологични тестове възникна във връзка със заплахата от биотероризъм през ХХ век, както и във връзка с появата на американската космическа програма НАСА.

Историята на появата на промишлени методи за микробиологично изследване се състои от следните етапи:

1965-1975 г. - разработване на минидиагностични комплекси;
1975-1985 г. - въвеждане на имунологични методи;
1985-1995 г. - използване на метода PCR, комплекс за имунологични изследвания, сонди;
от 1995 г. до момента - използването на методи на генно инженерство, протеомика и др.

Ускореното лабораторно тестване е често срещано в редица хранителни индустрии в пивоварната, винопроизводството и консервната промишленост. Има три варианта за този тест:

Растеж на микроорганизми в самия продукт при условия, благоприятни за растежа на определена група микроорганизми („принудителен тест“, който често се използва в пивоварството). Този тест е подобен на поставяне под карантина на продукт (бира) при повишена температура в производствена среда за няколко седмици, преди продуктът да бъде продаден;
Отглеждане на микроорганизми директно в продукта при условия, благоприятни за растежа на определен вид микрофлора (например в кисело мляко при условия, благоприятни за растежа на определен вид или щам дрожди или бактерии);
Растеж на микроорганизми директно в продукта при условия, по-благоприятни за растежа на определен вид микрофлора от тези, които могат да бъдат в самия продукт.

Експресните методи за тестване включват диагностични методи в биотехнологиите, а именно методи на биолуминесценция, биоелектрични явления, методи, базирани на измерване на силата на тока. На последнияРаботата на инсталацията "Buck Truck" се основава на принципа - устройството се основава на измерване на електрическия импеданс (електрическо съпротивление) на хранителната среда в резултат на размножаването на микроорганизмите и появата на техните метаболитни продукти. Устройството Tank Truck е разработено от австрийската компания Sy-Lab и се използва в България и Украйна от водещи предприятия от хранително-вкусовата промишленост, по-специално при оценка на микробиологичните показатели за качеството на водата.

Промяната в импедансния сигнал настъпва експоненциално, когато броят на клетките в 1 ml от средата достигне граничното ниво от 10 6-10 7. Това време се нарича импедансно време. Времето на импеданса е обратно пропорционално на концентрацията на микроорганизми в пробата, т.е. колкото по-висока е степента на замърсяване на материала, толкова по-бързо се достига скок в кривата и толкова по-кратко е времето за достигане на точката на импеданса. Продължителността на анализа варира от няколко часа до един ден - колкото по-голямо е бактериалното натоварване в пробата, толкова по-кратък е анализът.

Автор на статията: главен микробиолог на ООО "АЕЦ"Витан " д.м.н. Бондар Ирина Владимировна