dnevnik_po_praktike1
Постъпва на летния стаж във ФБУЗ „Център по хигиена и епидемиология” като лаборант в бактериологичната лаборатория.
Този лабораторен отдел се състои от 13 лабораторни стаи:
- стая на завеждащ лабораторен отдел;
- стая за почивка;
- помещение за приготвяне на хранителни среди;
- зала за провеждане на чревни и въздушно-капкови инфекции;
- помещение за перилни материали за стерилност;
- стая за водни изследвания;
- стая за изследване на хранителни продукти;
- помещение за почвени изследвания и резервоарни изследвания;
-стая за паразитологични изследвания;
(Отделът е разделен на чисти и мръсни зони)
През деня се запознах със следните нормативни документи:
- "Инструкция за безопасност при работа с микроорганизми и патогени на паразитни болести";
- „Организиране на вътрешен контрол на качеството на санитарно-микробиологичните изследвания на водата”;
В края на първия учебен ден тя се запозна с въздушния стерилизатор GP-320 "PZ", както и сортира петриевите блюда за стерилизация в стерилизационната зала на лабораторния отдел. Запознах се с документацията за 3 вида контрол на стерилизацията: бактериологичен, химичен, термичен.
На втория ден от практиката приготвих хранителна тиогликолова среда за микроорганизми, разредена с дестилирана вода.
Тиогликолова среда- използва се за контрол на стерилността на различни биоматериали, както и за култивиране на широк спектър от аеробни и анаеробни бактерии.
Приготвяне:Разбъркайте 30g прах в 1 литър дестилирана вода. Вари се докато се разтвори напълночастици. За пълно освобождаване от всички видове микроорганизми, той се стерилизира чрез автоклавиране при 0,5 atm (122 ° C) за 10-15 минути. Охлажда се до 25°C и се оставя за съхранение на тъмно и хладно място (при температура под 25°C).
Запознах се и с други среди, които се използват в микробиологичната лаборатория:
Endo Medium- Синтетична, твърда, избираема среда. Има следния състав, g: пептон - 10, лактоза - 10, K2HPO4 - 3,5, NaHSO3 - 2,5, агар-агар - 15,0, дестилирана вода - 1000 ml. Към средата се добавят 4 ml 10% алкохолен разтвор на основен фуксин, така че тя става розово-кремава на цвят. Средата се стерилизира в автоклав и се съхранява на тъмно. Използва се за отглеждане на ешерихия коли. Върху тази среда бактериите от род Escherichia образуват пурпурни колонии с метален блясък.
Месопептонен желатин (МПЖ)- изкуствена среда, твърда, с общо предназначение. Това е гъста хранителна среда, за приготвянето на която се използва сух желатин. Желатинът е вещество с протеинова природа, киселинен азотсъдържащ продукт, получен чрез смилане на кости и хрущяли. За да приготвите MPZh, добавете 100-150 g желатин към 1 литър MPB, настоявайте за няколко часа, за да набъбне желатинът и след това загрейте, докато се разтвори напълно. Алкал се използва, за да доведе реакцията на средата до леко алкална. Горещата среда се филтрира през нагънат хартиен филтър, налива се в колби и се стерилизира с фракционна течаща пара в апарат на Кох. Използването на NMF е ограничено поради факта, че се втечнява под действието на протеолитични ензими, секретирани от много микроорганизми. В допълнение, гелът, образуван от желатин, вече се топи при 23-25 ºС и се втвърдява при 20 ºС и по-ниски, а повечето микроби се развиват при 30-37 ºС. Използва се за идентифициранекултурни и биохимични характеристики на идентифицираните микроорганизми.
Нишестено-амонячен агар (SAA)- синтетична среда, твърда, елективна. Има следния състав, g: нишесте - 10, (NH4) 2SO4 - 2, K2HPO4 - 1, MgSO4 - 1, CaCO3 - 3, агар-агар - 20, дестилирана вода - 1000 ml. Агарът се разтваря в 300 мл вода. Отделно се разтваря нишестето в 100 мл вода. В останалите 600 ml вода се разтварят соли, загряват се до кипене и във врящия разтвор при непрекъснато бъркане се налива нишесте, след което се добавя вода с агар и се стерилизира в автоклав. Използва се за отглеждане на актиномицети
Включително издадена придружителната документация за взетите проби и извършените изследвания.
Оцветени препарати по Грам и с метиленово синьо
Извършен бактериологичен и химичен анализ на бутилирана вода. Изготвена съпътстваща документация за този вид анализ
MCH- е трудна и отнемаща време задача, като критерий за бактериологично замърсяване се използва общият брой колониеобразуващи бактерии в 1 ml вода. При този метод за анализ на водата определено количество вода преминава през специална мембрана с размер на порите около 0,45 микрона. В резултат на това всички бактерии, присъстващи във водата, остават на повърхността на мембраната. След това мембраната с бактерии се поставя за определено време в специална хранителна среда при температура 30-37 o C.
През този период, наречен инкубационен период, бактериите имат възможност да се размножават и да образуват добре дефинирани колонии, които вече лесно се преброяват.
Извършено бактериологично засяване за Staphylococcus aureus (Staphylococcus aureus) от носа
Култура от носа -микробиологично определянеинфекция със Staphylococcus aureus, което води до развитие на неспецифични инфекциозни заболявания на горните дихателни пътища. Основни показания за употреба: определяне на назалното носителство при медицински персонал, за предотвратяване на нозокомиални инфекции. Избор на ефективна антибиотична терапия. Нормалният резултат е липса на растеж.
Елективен солен агар- хранителна среда, предназначена да изолира стафилококи от тестовия материал.
Тампон от носа и фаринкса се взема с помощта на стерилна памучна вата, навита около същата стерилна примка. След това примка с памучна вата се вкарва последователно в носните проходи на дълбочина 1-2 cm, последвано от меки кръгови докосвания на стените им.
Изготвена съпътстваща документация за този вид анализ
Запознах се със санитарно-бактериологичното изследване на водите - Микробиология с техниката на микробиологичните изследвания. Метод за засяване на вода върху мембранни филтри
Изследването на водата чрез инокулация върху мембранни филтри се използва в повечето бактериологични лаборатории през последните години. В сравнение с метода на ферментация, той има следните предимства:
намалява времето за анализ до 24 часа;
спестява среда и време;
прави възможно откриването на най-малкото количество микроби във водата;
позволява директно и сравнително точно преброяване на броя на колониите;
ви позволява да изолирате всеки микроб в чиста култура.
Извадените от опаковката филтри се проверяват. От матовата страна има знак с молив - точка. Филтрите не трябва да имат дефекти (пукнатини, счупвания). Филтрите се поставят в емайлиран или порцеланов съд, в който се налива топла дестилирана вода, престоява 20-30 минути, отцежда се и се долива отново.дестилирана вода. Това се прави 3 пъти. Така приготвените филтри се варят в дестилирана вода за 1 минута, след което водата се отцежда, заменя се с прясна и отново се кипва 15-20 минути. Това се прави, за да се премахнат химикалите, съдържащи се във филтрите, и да се предотврати навиването им. След като течността се охлади, пристъпете към сеитба. За филтриране на водата се използва апаратът Seitz (виж фиг. 32) или специален апарат на водопроводната станция Rublevskaya.
В края на филтрирането на водата филтърът се отстранява със стерилна пинсета и се поставя върху средата Endo с ефирна матова повърхност. Върху блюдо на Хайденрайх-Петри могат да се поставят 4-5 филтъра. На дъното на чашата, срещу всеки филтър, поставете номера на анализа. Инсталиран в термостат на 37 °. На следващия ден филтрите се гледат с лупа. Отсъствието на микробен растеж изобщо или E. coli върху филтрите е основание за отрицателен отговор, който се дава след 24 часа.
Ако има увеличение на Escherichia coli, тогава се извършва допълнителен анализ, както следва.
Преброяват се типичните за чревната група колонии.
Запознах се с изготвянето на цитонамазка от гной или храчка. Материалът се взема със стерилна пипета или примка и се нанася в средата на предметното стъкло. Покрийте първия слайд с втория предмет, така че една трета от първия и втория слайд да останат свободни. Очилата се раздалечават с усилие. Вземете два големи тампона.