FLUORESCEINUM NATRICUM FLUORESCEIN SODIUM Молекулна формула
Молекулярна формула. C2oH10Na205. Относително молекулно тегло. 376.3. Структурна формула.
 |
Описание. Оранжево-червен прах без мирис.
Разтворимост. Разтворим в 1,5 части вода; разтворим в етанол (
750 g/l) TS; практически неразтворим в хлороформ R.
Категория. Диагностичен инструмент, използван в офталмологията.
Съхранение. Флуоресцеин натрий трябва да се съхранява в добре затворен контейнер, защитен от светлина.
Допълнителна информация. Флуоресцеин натрият е хигроскопичен.
Общо изискване. Флуоресцеин натрий съдържа не по-малко от 98,0 и не повече от 100,5% C2oHioNa205 по отношение на сухото вещество.
А. Разтвор на тестваното вещество във вода дава силна флуоресценция, дори при екстремно разреждане; флуоресценцията изчезва, когато разтворът се подкисли и се появява отново, когато разтворът се алкализира.
Б. Запалете 20 mg от изпитваното вещество и разтворете остатъка в оцетна киселина (
60 g/l) TS. Разтворът дава реакция В, характерна за натрий, описана в раздела „Общи тестове за автентичност” (том 1, стр. 131).
B. Разтворете 1 mg от изпитваното вещество в 2 ml вода, нанесете 0,05 ml от този разтвор върху парче филтърна хартия; образува се жълто петно. Третирайте влажната хартия с бромни пари R за 1 минута и след това с амонячни пари (
260 g/l); IR жълтият цвят на петното се заменя с ярко розово.
Хлориди. Разтварят се 0,07 g от изпитваното вещество в смес от 2 ml азотна киселина (
Цинк. Разтворете 0,10 g от изпитваното вещество в 10 ml вода, добавете 2 ml солна киселина (
420 g/l) TS, филтрува се и се добавят 0,1 ml калиев фероцианид (45 g/l) TS;нито мътност, нито утайка се появяват веднага.
Вещества, които са разтворими в хлороформ. Разтварят се 0,20 g в 10 ml натриев хидроксид (0,1 mol/l) VS и се екстрахират с 10 ml хлороформ R. Оставят се слоевете да се разделят, изсушава се хлороформният слой над безводен натриев сулфат R и се филтрува. Измерва се абсорбцията на филтрата в кювета с дебелина 1 cm при максимум 480 nm спрямо контролна кювета, съдържаща хлороформ R; абсорбцията не надвишава 0,10.
Вещества, неразтворими в етанол. Сварете 0,2 g от изпитваното вещество с 20 ml етанол (
750 g/l) TS за 1 минута, филтрирайте през филтър от синтеровано стъкло, промийте филтъра с етанол (
750 g/l) TS, докато филтратът стане почти бистър, изсушете филтъра при 105 °C за 1 час и претеглете; остатъкът е не повече от 2,0 mg.
Загуба при сушене. Изсушава се до постоянно тегло при 105°C; загуба не повече от 100 mg/g.
pH на разтвора. pH на 20 mg/ml разтвор на тестваното вещество във вода без въглероден диоксид R е 7,0-9,0.
Диметилформамид. Извършете теста, както е описано в Газова хроматография (том 1, стр. 105). Пригответе вътрешен стандарт, състоящ се от смес от 20 µl диметилацетамид R и 100 ml вода. Инжектирайте следните 3 разтвора: (1) смес от 2 µl диметилформамид R и 10 ml вода, съдържаща 10 ml от вътрешния стандартен разтвор; (2) за да се определи времето на задържане на изпитваното вещество, 1,0 g от него се разтваря в 10 ml вода, добавят се 10 ml солна киселина (0,5 mol/l) VS при разбъркване, оставя се за 15 минути, центрофугира се и се разтварят 0,10 g тринатриев ортофосфат R в 5 ml от супернатанта; (3) разтворете 1,0 g от изпитваното вещество в 10 ml разтвор на вътрешен стандарт, добавете 10 ml солна киселина (0,5mol/l) VS, оставя се за 15 минути, центрофугира се и след това се разтварят 0,10 g тринатриев ортофосфат R в 5 ml от супернатанта.
За тестване използвайте стъклена колона с височина
1,5 m и вътрешен диаметър 4 mm, напълнен с подходящо количество сорбент, състоящ се от 1 g макрогол-1000 R, нанесен върху 9 g промита с киселина силанизирана диатомитна пръст R. Тестът се провежда при 120 °C. Като газ-носител се използва азот R. Използва се пламъчно-йонизационен детектор.
В хроматограмата на разтвор 3 съотношението на площта на всеки пик, съответстващ на диметилформамид, към площта на пика на вътрешния стандарт не надвишава съответното съотношение в хроматограмата на разтвор 1.
Резорцинол. Извършете теста, както е описано в Тънкослойна хроматография (том 1, стр. 92), като използвате силикагел R1 като сорбент (предварително покрити плочи от търговски източници също са подходящи) и като подвижна фаза смес от 6 обема хексан R и 4 обема етил ацетат R. Нанесете 5 µl от всеки от следните 2 разтвора отделно върху плочата: (A) Разтворете 1,0 g от тестваното вещество в 10 ml вода, добавете бавно при непрекъснато разбъркване, 10 ml солна киселина (0,5 mol/l) VS, оставете за 15 min, центрофугирайте и използвайте супернатантата; (B) Разтворете 2,5 mg резорцинол R в 10 ml вода. След изваждане на плаката от хроматографската камера се оставя да изсъхне на въздух и се обработва с йодни пари R за 30 минути. Разгледайте хроматограмата на дневна светлина. Петното, създадено от разтвор B, трябва да бъде по-интензивно от всяко съответно петно, произведено от разтвор A.
чужди примеси. Извършете теста, както е описано в раздел "Тънкослойна хроматография" (том 1, стр. 92), като използвате силикагел R1 като сорбент.(предварително покрити плочи от търговски източници също са подходящи), а като подвижна фаза, смес от 8 обема хлороформ Р и 2 обема метанол R. се нанася върху плочата поотделно 5 μl от всеки от двата разтвора в разтвор на солна киселина (0,1 mol/l), съдържащ (а) от 10 ml от 1 ml от 1 ml от 1 ml и (В) от 20 μg от субекта на субекта в 1 мл. След като извадите плаката от хроматографската камера, оставете я да изсъхне на въздух и я изложете на йодни пари за 30 минути. Разгледайте хроматограмата на дневна светлина. Всяко петно, получено от разтвор А, различно от основното петно, не трябва да бъде по-интензивно от петното, получено от разтвор Б.
Количествено определяне. Разтворете около 0,5 g от изпитваното вещество (точно претеглено) в 20 ml вода, добавете 5 ml солна киселина (
70 g/l) TS и екстрахирайте с 4 обема, всеки по 20 ml, от смес от равни обеми 2-бутанол R и хлороформ R. Разделете и комбинирайте екстрактите, промийте с 10 ml вода, екстрахирайте промивните води с 5 ml от същата смес и добавете към комбинираните екстракти. Събраните екстракти се изпаряват до сухо на водна баня в поток от въздух, остатъкът се разтваря в 10 ml етанол (
750 g/l) TS, изпарява се до сухо на водна баня, суши се до постоянно тегло при 105°C. Всеки грам остатък съответства на 1,132 g C2oH10Na05.