Клетъчни и молекулярни механизми на имуномодулираща активност на репродуктивните хормони
480 търкайте. 150 UAH $7.5 ', MOUSEOFF, FGCOLOR, '#FFFFCC',BGCOLOR, '#393939');" onMouseOut="return nd();">
Резюме -безплатно, доставка10 минути, денонощно, седем дни в седмицата и празници
Куклина Елена Михайловна Клетъчни и молекулярни механизми на имуномодулираща активност на репродуктивните хормони: Дис. . д-р биол. Науки: 14.00.36 Москва, 2003 236 с. RSL OD, 71:04-3/97
Съдържание към дисертацията
Списък на съкращенията 4
Глава 1. ПРЕГЛЕД НА ЛИТЕРАТУРАТА 13
Механизми на имунна толерантност на майката към плода. 13 Хипотези и факти
Характеристики на имунната система по време на 15-та бременност
Ролята на човешкия хорионгонадотропин в регулацията на 23 имунни процеса
Женските полови стероиди като регулатори на имунния отговор 37
Глава 2. МАТЕРИАЛИ И МЕТОДИ НА ИЗСЛЕДВАНЕ 46
Хормони и инхибитори 46
Обекти на изследване 47
Клетъчна култура 49
Методи на изследване 52
Статистическа обработка на резултатите
Глава 4
Влияние на репродуктивните хормони върху пролиферативната 82 активност на Т-лимфоцитите
Хормонално зависима регулация на апоптозата на Т-лимфоцитите 90
4.3. Влияние на репродуктивните хормони върху производството на 105 цитокини от Т-лимфоцитите на периферната кръв Глава 5. РЕПРОДУКТИВНИ ХОРМОНИ В РЕГУЛАЦИЯ
ФУНКЦИОНАЛНА АКТИВНОСТ НА НЕУТРОФИЛИТЕ 120
Влияниерепродуктивните хормони върху фагоцитната 121 активност на неутрофилите
Хормонално зависима регулация на окислителната активност на 126 неутрофили
Ролята на репродуктивните хормони в регулирането на апоптозата на 139 неутрофилите
ЛИТЕРАТУРА 177
АКМ - активни кислородни метаболити
KLA - клетки, произвеждащи антитела
AET - аминоетилизотиурониев бромид
DTH - свръхчувствителност от забавен тип
DN-тимоцити - двойно отрицателни (CD4"CD8") тимоцити
DP-тимоцити - двойно положителни (CD4 + CD8 +) тимоцити
ЕК - естествен убиец
IFNu - интерферон
LH - лутеинизиращ хормон
LH/CHG-R - рецептор за лутеинизиращ хормон и
LZHL - луминол-зависима хемилуминесценция
mAb - моноклонални антитела
PBMC - мононуклеарни клетки на периферната кръв
PIBF - прогестерон-индуциран блокиращ фактор
PPS - пълноценна хранителна среда
GVHD - болест на присадката срещу приемника
SKL - смесена култура на лимфоцити
Txl, Tx2 - Т-хелпери от типове 1 и 2
TEC - тимусни епителни клетки
TNFa - фактор на туморна некроза а
FSH - фоликулостимулиращ хормон
HCG - хорионгонадотропин
CTL - цитотоксични Т-лимфоцити
ЕВ - овчи еритроцити
cAMP - цикличен аденозин монофосфат
AP-1 - активиращ протеин-1
CD - левкоцитни мембранни маркери
Кон А - конканавалин А
G протеин - GTP-свързващ протеин
HLA - тип антигени на основния комплекс на хистосъвместимостта
MAPK - митоген-активирана протеин киназа
MHC - главни антигени на хистосъвместимия комплекс
NFAT - ядрен фактор на активирани Т-лимфоцити
NFkB - ядрен фактор kV
PICA - протеин киназа А
PKC - протеин киназа С
PLC - фосфолипаза С
PLD - фосфолипаза D
TCR - Т клетъчен рецептор
Въведение в работата
Неотложността на проблема. Бременността, дължаща се на експресията на бащини антигени от плода, е естествен феномен на алотрансплантация и изисква ефективни регулаторни механизми за предотвратяване на реакции на имунно отхвърляне. Известно е, че имунната система на майката е способна да разпознава и реагира на фетални антигени [90, 178, 288] и поради проникването на фетални [18, 173] и плацентарни [119] клетки в кръвообращението на майката, тези реакции се проявяват не само на локално, но и на системно ниво, но обикновено нямат негативни последици.
Дълго време хипотезата за системна имуносупресия по време на бременност преобладаваше при обяснението на причините за толерантността на майката към генетично чужд плод. Многобройни проучвания показват потискане през този период както на адаптивния [245, 353], така и на вродения имунитет [54, 85, PO, 141, 202], както и намаляване на антиинфекциозната резистентност на организма [70, 204, 413] и до средата на 80-те години тези промени се считат за необходимо условие за успешното развитие на бременността.
Впоследствие обаче става ясно, че взаимодействието между имунната и репродуктивната система не се изчерпва само с антагонизъм. Напротив, наличието на имунен отговор към феталните антигени е условие за успешното протичане на репродуктивните процеси [273]. През 1987 г., въз основа на анти-абортния ефект на алоимунизацията от родителските лимфоцити, беше представена теорията за плацентарния имунотрофизъм, според която разпознаването на феталните антигени от имунокомпетентните клетки на майката води до производството на цитокини, които стимулиратрастеж и функция на плацентата [411]. Тази теория е намерила и множество експериментални потвърждения [48, 49, 95, 413].
Според съвременните концепции промените в имунната система по време на бременност не се ограничават до пълно потискане - те са много по-сложни и разнообразни и осигуряват не само фетопротекция, но и фетостимулация, както и нивото на имунореактивност на организма, достатъчно за ефективна антиинфекциозна защита.
Изследването на факторите и механизмите, отговорни за тези промени, е неотложен проблем на репродуктивната имунология и най-важната област на изследване в рамките на този проблем е анализът на ролята на репродуктивните хормони в контрола на имунните процеси.
Целта на работата е да се изследва модулиращата активност на хормоните на бременността хорион гонадотропин, естрадиол, прогестерон и техните физиологични комбинации по отношение на основните ефектори на адаптивния и вроден имунитет, както и да се определят вътреклетъчните механизми на действие на хормоните.
В съответствие с тази цел в работата бяха решени следните задачи: 1. Да се изследва ефектът на репродуктивните хормони върху тимусния етап на диференциация на Т-лимфоцитите.
Оценете ролята на репродуктивните хормони в контролирането на активирането на зрелите Т-лимфоцити.
Да се изследват регулаторните ефекти на репродуктивните хормони върху неутрофилите.
Да се изследва хормоналната регулация на Т-клетъчната активност в присъствието на автоложни неутрофили и обратно, да се определи реакцията на неутрофилите към действието на репродуктивните хормони в присъствието на автоложни Т-лимфоцити.
Оценете вътреклетъчните механизми на прилагане на хормоналните ефекти, като вземете предвид основните системи за съобщения на клетката.
Научна новост на работата. Комбинирани имуномодулиращи ефекти на основните хормони, изследвани за първи пътбременност - хорион гонадотрогаз (ХГ), естрадиол и прогестерон. Доказано е участието на репродуктивните хормони в регулацията на тимусния стадий на диференциация на Т-лимфоцитите. Изследвани са механизмите на хормонален контрол на производството на основните Txl- и Tx2-цитокини, които определят промяната в техния баланс по време на бременност. Доказана е многопосочна регулация на активността на неутрофилите от хормони в зависимост от вида на стимулацията. Разкрита е способността на репродуктивните хормони да регулират апоптозата на Т-лимфоцитите и неутрофилите. За първи път са анализирани молекулярните механизми на осъществяване на имуномодулиращите ефекти на репродуктивните хормони, като се вземат предвид основните информационни системи на клетката, а за стероидните хормони е направен опит за разграничаване на геномните ефекти от негеномните.
Теоретично и практическо значение. Работата значително разширява разбирането за хормоналния контрол на имунната система по време на бременност, разкривайки нови клетъчни и молекулярни механизми на имуномодулиращата активност на репродуктивните хормони. Доказано е по-специално, че репродуктивните хормони са в състояние да стимулират Т-клетъчната връзка на имунитета на етапа на диференциация на тимуса, което позволява нова интерпретация на промените, настъпващи в тимуса по време на бременност. Доказано е, че апоптозата на Т-лимфоцитите и неутрофилите е чувствителна към действието на репродуктивните хормони и промените в нейното ниво могат да служат като един от начините за хормонална регулация на активността на тези клетки. Разкрита е зависимостта на хормоналния контрол на неутрофилите от нивото на тяхното активиране. Установени са основните вътреклетъчни механизми за осъществяване на ефектите на CG, естрадиол и прогестерон в Т-лимфоцитите и неутрофилите, което дава доста ясна представа за начините на хормонална регулация на функционалната активност на тези клетки икоето позволява да се предвидят ефектите на други хормони и протеини на бременността въз основа на вътреклетъчни сигнали, инициирани от тях. Бяха разкрити разлики в ефектите, които CG, естрадиол и прогестерон проявяват поотделно и във физиологични комбинации, и беше показано, че в зависимост от дозата, вида на целевите клетки и нивото на тяхното активиране, хормоните могат да действат адитивно, в антагонизъм, а също така показват взаимни разрешителни и / или сенсибилизиращи ефекти. Разкрита е промяна в хормоналната регулация на Т-лимфоцитите в присъствието на автоложни неутрофили и обратно, показана е способността на Т-лимфоцитите да модулират реакцията на неутрофилите към действието на хормоните. Тези данни разкриват нови перспективи в изследването на невроендокринния контрол на имунната система.
Разкритите имуномодулиращи ефекти на CG, естрадиол, прогестерон и техните комбинации могат да се появят не само по време на бременност, но и при различни физиологични и патологични състояния, придружени от извънматочен синтез на тези хормони в тялото или в случай на терапия с CG и женски полови стероиди. Те ще представляват интерес и ще намерят приложение в работата на гинеколози, акушер-гинеколози, ендокринолози и други специалисти, работещи в тази област.
Разпоредби за защита:
Във физиологична комбинация, съответстваща на първия триместър на бременността, CG, естрадиол и прогестерон причиняват фенотипно и функционално съзряване на непокътнати тимоцити и също така засилват диференциацията на тези клетки, индуцирана от тимусния епител.
Хормоналната регулация на зрелите Т-лимфоцити зависи пряко от техния статус на активиране. Хормоните засилват спонтанната пролиферация на Т клетките, но значително намаляват техния пролиферативен отговор към митогена, въпреки че леко увеличават броя на активираните Т клетки порадиинхибиране на тяхната апоптоза. Физиологичните комбинации от CG и стероидни хормони не променят производството на Т-лимфоцити
IFNy, но стимулират синтеза и секрецията на IL-4, което в крайна сметка води до промяна в баланса на секретираните Tx1 / Tx2 цитокини в полза на типа Tx2.
Ефектите на репродуктивните хормони върху неутрофилите се проявяват само в комбинация от дози, съответстващи на третия триместър на бременността, и също се определят от наличието и нивото на активиране на тези клетки - в спонтанен вариант или в случай на слаба стимулация, хормоните повишават окислителния потенциал на неутрофилите, докато при условия на интензивна стимулация, напротив, те го намаляват. Неутрофилната апоптоза се потиска от репродуктивните хормони, независимо от нивото на клетъчна активация.
Хормоналната регулация на активността на Т-лимфоцитите се променя в присъствието на автоложни неутрофили. От своя страна Т-лимфоцитите модулират отговора на неутрофилите към действието на репродуктивните хормони. Резултатът от такова взаимодействие може да бъде както премахването на хормоналните ефекти при съвместно култивиране, така и тяхното засилване, в зависимост от дозата на хормоните, клетъчния тип и специфичната функция.
Индивидуалните модулиращи ефекти на CG както в Т-лимфоцитите, така и в неутрофилите се медиират от cAMP-зависим сигнал, докато действието на стероидните хормони се осъществява по два начина - геномен и негеномен, първият от които, като правило, води до инхибиране на функциите на тези клетки, докато вторият води до стимулация. В същото време негеномните ефекти на естрадиола и прогестерона се медиират главно от калций. Хормоналната комбинация, в зависимост от дозата на хормоните, вида на клетките, нивото на тяхната диференциация и активиране, може не само да неутрализира или напълно да блокира отделните хормонални ефекти, но, напротив, да осигури тяхното проявление.
Структура и обхватдисертации. Дисертационният труд е представен на 236 страници печатен текст и се състои от въведение, преглед на литературата, материали и методи, три глави от експерименталната част, заключение и изводи. Работата съдържа 33 фигури и 27 таблици. Списъкът с литература включва 423 източника.