Метод за диагностициране на доброкачествена патология на млечната жлеза
Собственици на патент RU 2283491:
Изобретението се отнася до медицината, а именно до цитологията, и може да се използва за диагностициране на тежестта на доброкачествени патологични промени в тъканите на млечната жлеза (МЖ).
Известен метод за диференциална диагноза на фиброаденом и рак на гърдата, включващ въвеждането на стерилни иглени електроди на кондуктометъра в анестезираната изследвана област на гърдата, измерване на електрическото съпротивление на тъканта първо при високи и след това при ниски честоти и определяне на коефициента на поляризационна дисперсия (CDP), равен на съотношението на електрическата проводимост при ниска честота към електрическата проводимост при висока честота. При стойности на CDP от 1,0 до 1,39 се диагностицира фиброаденом, от 1,4 до 1,69 - рак на гърдата, а CDP от 1,7-2,2 е типичен за нормална тъкан [пат. № 1535168, приоритет 1997.07.20].
Известният метод обаче изисква наличието на специално оборудване, обучен персонал и зависи от наличието или отсъствието на тъканен оток (степен на тъканна хидратация). Но отокът, като съпътстващ симптом, се среща в 70% от случаите, независимо от наличието на фиброаденом, рак или може да бъде единственият признак на патология на гърдата.
Известен метод за диференциална диагноза на фиброаденом и рак на гърдата, който се състои в това, че в хистологичните срезове на тумора се определя морфометрично броят на паренхимните клетки, фибробластите и фиброцитите, локализирани периартериоларно, и когато броят на паренхимните клетки е равен или по-малък от 18,67 ± 1,96, броят на фибробластите е равен или по-голям от 11,91 ± 0,81, броят на фиброцитите е равен или по-голям от 14,00±1,07, диагностициран е фиброаденом и ако броят на паренхимните клетки е равен или по-голям от 44,62±6,56, броят на фибробластите е равен или по-малък от 8,32±0,61, броят на фиброцитите е равен илипо-малко от 8,65±0,72, се диагностицира рак на гърдата [пат. № 2092843, приоритет 1994.07.18].
Известният метод се характеризира с недостатъчна надеждност, тъй като не броят на клетките, а наличието на признаци на клетъчно злокачествено заболяване играе важна роля в злокачествената дегенерация. В допълнение, методът може да се прилага в специална хистологична лаборатория с обучен персонал, т.е. в болница или медицинска асоциация.
Известен метод за скринингова диагностика на заболявания на гърдата, придружени от синдром на галакторея, включително физикален преглед, палпация, изследване на биохимичните параметри и нивото на туморния маркер CA-15.3 в секрета от млечната жлеза и с повишаване на активността на ензимите: аспартат аминотрансфераза (AST), аланин аминотрансфераза (ALT), амилаза (Amyl), лактат дехидрогеназа (LDH), повишени нива на alb mina (ALB), общ протеин (Prot), пикочна киселина (URAC), туморен маркер CA-15.3 и намаляване на активността на гамаглутамил транспептидаза (GGT) диагностицира пролиферативно заболяване на гърдата.
Резултатите се оценяват с помощта на автоматичен биохимичен анализатор, а нивото на туморния маркер CA-15.3 се определя с помощта на автоматичен електрохемилуминесцентен анализатор [заявление № 2003101152/15, приоритет 2003.01.15, дата на публикация. 2004.07.10].
Известният метод може да се приложи само в научна лаборатория. Освен това е доста скъпо за пациентите.
В този случай вземането на проби от клетъчен материал се извършва чрез метода на пункционна биопсия или, при наличие на свободно изпускане от зърната, ексфолиативен метод [Цитологична диагностика на тумори и предракови процеси. Академия на медицинските науки на СССР. / Ед. Петрова А.С. - М.: Медицина, 1985, стр.196].
Прототипният метод не е достатъчно информативен, тъй като неговото прилагане не отчита състоянието на лактоцита (MG клетки). В допълнение, няма начин да се предвиди резултатът от лечението, например, дори при липса на пролиферативни клетки, състоянието на гърдата може да бъде патологично или близко до него.
Заявеното изобретение е насочено към решаване на проблема с навременната диференциална диагноза и определяне на оптималната медицинска тактика при доброкачествени промени в клетките на млечните жлези, т.е. разработване на план за управление на пациента, наблюдение на ефективността на лечението, прогноза на заболяването.
Използването на предложения метод позволява да се постигнат няколко технически резултата:
- повишаване степента на обективност на цитологичното изследване;
- възможността за използване на метода като "контролиращ" резултата от лечението заедно с ултразвук, мамография, дуктография и други методи за изследване на млечните жлези;
- наличието на изследователския метод в амбулаторните условия.
Това се постига с факта, че в метода за диагностициране на доброкачествена патология на млечната жлеза, включващ вземане на проби от клетъчен материал от "проблемната" област, цитологично изследване на получения материал, решение за наличието или отсъствието на патология на тъканите на млечната жлеза чрез наличието или отсъствието на пролиферативни клетки, съгласно изобретението, състоянието на млечната жлеза също се съди по наличието или отсъствието на клетки с пенеста цитоплазма и безклетъчни протеинови маси, докато ако липсват пролиферативни клетки, липсват и клетки с пенеста цитоплазма или се откриват техните малки и безклетъчни протеинови маси, се диагностицира липсата на патология; ако има пролиферативни клетки, но липсват клетки с пенеста цитоплазма и протеинови маси без клетки,състоянието се счита за патологично; ако присъстват пролиферативни клетки, клетки с пенеста цитоплазма и безклетъчни протеинови маси, състоянието се счита за нестабилно, изискващо контрол.
В този случай вземането на проби от клетъчен материал се извършва чрез метода на пункционна биопсия или, при наличие на свободен секрет от зърната на млечната жлеза, чрез ексфолиативен метод.
Диагностичната пункция на млечната жлеза се извършва с тънки игли, чийто диаметър не надвишава 1 mm. За засмукване на материала се използва спринцовка с вместимост 20,0 ml. Във всички случаи при пункцията пациентите трябва да лежат. С локализирането на патологичния фокус в централната част на млечната жлеза, горните, долните квадранти или на тяхната граница, пациентите лежат по гръб. Когато туморът е разположен на границата на външните квадранти, във външните квадранти, особено на значително разстояние от зърното, пациентите лежат на една страна срещу засегнатата жлеза. Ако туморът се намира в субмамарната област, тогава е необходимо да повдигнете млечната жлеза нагоре.
Изхвърлянето от зърното се получава чрез леко натискане на пръстите на дясната ръка върху областта на зърното и перипапиларната зона, а след това върху гръдната тъкан с последователен преход от един от неговите сектори към друг. Ако отделянето е обилно и капките са различни по цвят, те се вземат на различни очила.
Тънки намазки се приготвят от пункции и секрети от зърната (намазка от пункция в случай на пункционна биопсия и натривка с отпечатък при използване на ексфолиативен метод за избор на клетъчен материал). Ако полученият пунктат е течен, тогава той се центрофугира и от утайката се приготвят намазки.
При оцветяване на петна обикновено се използва панхромно оцветяване със смеси от азуреозин във всякаква модификация (по метода на Романовски-Гимза, според Папенхайм, Лейшман). INВ редки случаи, с мукоиден характер на изследвания материал и резки дистрофични промени в тъканта на патологичния фокус, в допълнение към панхромното оцветяване може да се използва и оцветяване с хематоксилин-еозин.
Микроскопски в цитограмите на секрета от зърната и пункциите на непроменената млечна жлеза има различни клетъчни форми, чието количествено съотношение и особеностите на морфологията зависят от възрастта на жената, фазата на менструалния цикъл и лактацията.
Интерес представляват клетките от коластрален тип (също са пенести клетки, също са клетки с пенеста цитоплазма). В тайната на здравата жена те са малко, в случай на патология те могат да бъдат разположени отделно, на групи, на слоеве. Те могат да бъдат преброени по броя в зрителното поле, а именно:
до 5 в зрителното поле - малко;
от 5 до 15 в зрителното поле - средният брой;
повече от 15 в очите - много.
Ръководство за цитологична диагностика на човешки тумори. / Ед. проф. Петрова A.S., проф. Птохова М.П. - М.: Медицина, 1976].
Клетки с пенеста цитоплазма могат да се считат за производни на скитащи елементи на мезенхима и епитела [Цитологична диагностика на тумори и предракови процеси. Академия на медицинските науки на СССР. / Ед. Петрова А.С. - М.: Медицина, 1985].
Разположени в протоплазмата на пенестите клетки, червените или белите кръвни клетки и епителните клетки показват фагоцитната (защитна) природа на пенестите клетки [Degrel I. Атлас на заболяванията на гърдата. - Будапеща.: Издателство на Академията на науките на Унгария, 1977 г., стр.56].
N.N. Kukin в своята монография характеризира телата на коластрата като дегенеративно дегенериращи епителни клетки [Kukin N.N. Диагностика и лечение на заболявания на гърдата. - М.: Медицина, 1972,стр.129].
Обърнахме внимание на особеното "поведение" на така наречените "безклетъчни протеинови маси". Протеиновите маси, които нямат клетъчна структура, когато се оцветяват по описания по-горе метод, стават розови и се диференцират заедно със соли и малко количество течност. Според степента на насищане на цитонамазката, броят на "безклетъчните протеинови маси" може да се изрази в точки, а именно [Ръководство за цитологична диагностика на човешки тумори. / Ед. проф. Петрова A.S., проф. Птохова М.П. - М.: Медицина, 1976]:
ниска наситеност - 1-2 точки,
средна наситеност - 3-4 точки,
цялото зрително поле - от 5 или повече точки.
За цифрова обработка на клетъчен материал, степента на пролиферация на епителните клетки на млечните жлези, ние също оценихме точковата система заедно с описателните заключения на цитолозите, а именно [Насоки за цитологична диагностика на човешки тумори. / Ед. проф. Петрова A.S., проф. Птохова М.П. - М.: Медицина, 1976]:
малки комплекси от клетки - 3 точки;
епителни слоеве без признаци на атипия - 4 точки;
слоеве, групи от епител с изразена пролиферация, с
признаци на клетъчна атипия - 5 точки;
висока наситеност на намазката с клетъчни елементи:
без признаци на атипия - 6 точки,
с признаци на атипия - 7 точки.
За улеснение в практическата медицина предложихме и от около 10 години успешно използваме протокол за цитологично изследване на гърдата (Приложение 1).
Заявеният метод се основава на резултатите от цитологични изследвания на шест хиляди жени в продължение на десет години. За яснота и лекота на изчислението избрахме 100 жени с доброкачествени патологични промени в тъканите от общата маса.млечни жлези. Цитологичните изследвания, заедно с други, са извършени преди и след лечението (методът е описан по-горе, той е общоприет). При точкуване в случай на наличие на безклетъчни протеинови маси, пролиферативни клетки и броя на клетките с пенеста цитоплазма в зрителното поле се получават резултатите, показани в таблицата (Общи показатели на цитологията на гърдата).