Морфология на тромбоцитите, цитохимия на мегакариоцитите и тромбоцитите
В кръвния поток тромбоцитите имат дисковидна форма с диаметър от 2 до 5 микрона. Извън кръвния поток те се разпространяват и освобождават процеси. Обикновено приблизително 230 000 тромбоцити циркулират в 1 µl.
Изследването на ултрафината структура на тромбоцитите позволи да се идентифицира периферната част на клетките - хиаломера, съдържаща микротубули и микрофибрили, които определят контрактилните свойства на плочите, и централната част - грануломера, в която се намират много малки митохондрии с 1-2 кристали, гликоген, елементи от ламеларния комплекс, както и големи, така наречените а-гранули от лизозомна природа центриран.
Морфологичният анализ на ултраструктурата на тромбоцитите показва, че 54,2% от тях са хиалоплазма, 16,8% - система от везикули, 15,0% - α-гранули, 6,9% - гликоген, 3,1% - митохондрии, 2,3% - микротубули, 1,4% - демаркационна система от тубули, 0,3% - серотонинови везикули [36]. 0]. Тромбоцитите са най-близки до неутрофилните гранулоцити по отношение на съдържанието на гранули и съотношението клетъчна повърхност към обем. Съдържанието на митохондрии в тромбоцитите е значително по-високо, отколкото в гранулоцитите, но по-малко, отколкото в моноцитите.
Микротубулите на тромбоцитите, често образуващи маргинален ръб, се състоят от специфичен протеин, синтезиран в тромбоцитите - тромбатенин, открит през 1961 г. от Bettex-Galland и Luscher. Този протеин съставлява 15% от общия брой на тромбоцитните протеини, подобен е по свойства на мускулния актомиозин и има свойствата на АТФ-аза. Когато се гледа под електронен микроскоп, тромбастенинът има фибриларна структура. В тромбоцитите се открива системата ehanneb, състояща се от везикули и тубули, свързани с повърхността на тромбоцитите. Тази проводяща система осъществява транспортирането на частици и по-специално Ca ++ в клетката, фагоцитоза на чужди частици и секреторни процеси.
Тромбоцитни алфа гранулисъдържат лизозомни ензими - кисела фосфатаза, р-глюкуронидаза, катепсин и други, съдържат 3-ти коагулационен фактор. Почти целият кръвен серотонин се съдържа в тромбоцитите, но очевидно не се синтезира в тях, а се адсорбира от плазмата и се концентрира в специални органели. Тромбоцитните гранули съдържат фибриноген. Общо от тромбоцитите са изолирани повече от 10 фактора, участващи в процеса на коагулация на кръвта.
При млади тромбоцити с правилна форма хиаломерът е ясно видим, грануломерът е представен от деликатни гранули при оцветяване по Романовски. В зрелите клетки, които имат правилна закръглена форма върху петна, грануломерът е ясно изразен, а в старите "набръчкани" пластини грануломерът заема почти цялата клетка. Формите на дразнене - гигантски, като правило, са тесни ивици с дължина до 10-15 микрона. Вакуолизираните тромбоцити обикновено са розови на цвят и съдържат повече от 2 вакуоли.
Известни са формулите на T.V. Kenigson, O.A. При лица на млада и средна възраст няма значителни колебания в броя на младите, зрелите и старите тромбоцити. Авторите смятат, че по-голямата част от тромбоцитите при здрави хора са зрели форми (80-85%) и само 15-20% са млади и стари тромбоцити, както и форми на дразнене. Дегенериращите форми на тромбоцитите при здрави хора са изключително редки.
Липсата на яснота в тази класификация подтикна търсенето на други критерии за конструиране на тромбоцитна формула. Вземайки само размера на тромбоцитите като основна характеристика, A. A. Tonkaya разработи формула на тромбоцитите, използвайки автоматичен анализатор на микрообекти. При здрави хора(при пациентите тези стойности определено се променят, дори при лека пневмония понякога се наблюдават промени от два до три пъти) Идентифицирани са четири основни групи тромбоцити, които се различават една от друга по размер:
1-ва група - 1-1,9 микрона (33% от тромбоцитите); 2-ра група - 2-2,9 микрона (48,3% от тромбоцитите); 3-та група - 3-3,9 микрона (17,7% от тромбоцитите); 4-та група - 4-5,0 микрона (1% от тромбоцитите).
За съжаление, поради липсата на подходящо оборудване в лечебните заведения, този брой на тромбоцитите не се използва широко в клиничната практика.
В сравнение с тромбоцитите на бозайниците, човешките тромбоцити имат среден обем от 66,6±0,70 µm3. Проучване на диаметри и обеми в популация от човешки тромбоцити показа, че всички измервания се вписват в симетрични криви на Гаус. Тромбоцитометричните данни могат да бъдат полезни при диагностицирането на патологични състояния, но сега е ясно, че хетерогенността на размера на тромбоцитите при здрав човек, и още повече при патологията, се определя не толкова от възрастта на плочите, а от вариациите в "територията на растеж и демаркация" в мегакариоцитите.
През последните години идеята за тромбоцитите като по-ниски клетки, метаболитно инертни цитоплазмени образувания, беше напълно изоставена. Това са високоспециализирани клетки с богата ензимна активност. При тях гликолизата протича интензивно както при анаеробни, така и при аеробни условия, дишането, синтезът на гликоген се извършва активно с помощта на ензима гликоген синтетаза, по пътя на уридин дифосфат глюкозата, синтеза на тромбастенин и други протеини.
По химичен състав и метаболизъм тромбоцитите имат много общо с неутрофилните гранулоцити. Процесите на гликолиза и синтез на гликоген обаче протичат по-интензивно в тромбоцитите. В сравнение сдруги кръвни клетки, тромбоцитите съдържат най-големи количества АТФ и АДФ и имат метаболитни характеристики, свързани с функционална специфичност - участие в процесите на хемостаза.
Цитохимичните изследвания на мегакариоцитите и тромбоцитите разкриват сходството на тези клетки в повечето реакции. Маркерна реакция за мегакариоцити и тромбоцити при плъхове, морски свинчета и котки е определянето на ацетилхолинестераза. При хората този ензим не се открива нито в мегакариоцитите, нито в тромбоцитите.
Както мегакариоцитите, така и тромбоцитите проявяват пероксидазна активност, малко по-различна от миелопероксидазата. При оцветяване със суданско черно B се наблюдава умерено сиво оцветяване с единични гранули. Реакцията е много по-малко интензивна, отколкото в промиелоцитите и миелоцитите. PAS-реакцията разкрива гликоген в мегакариоцитите под формата на множество малки гранули на фона на дифузно розово оцветяване. С узряването на мегакариоцита количеството гликоген в клетката се увеличава. Тромбоцитните клетки съдържат повече гликоген, отколкото функционално неактивните клетки. 90% от тромбоцитите в периферната кръв на здрави деца съдържат PAS-положителни гранули с различни размери; в 10% от тромбоцитите реакционният продукт се открива в дифузна форма.
Мегакариоцитите проявяват висока активност на α-нафтил ацетат естераза, която е устойчива на действието на натриев флуорид. Продуктът от тази реакция се открива в половината от тромбоцитите на здрави деца под формата на 1-3 гранули, в останалите плочи под формата на дифузно оцветяване. Активността на друг лизозомален ензим, киселата фосфатаза, е висока както в незрелите, така и в зрелите мегакариоцити. Сред тромбоцитите не повече от 15% дават положителна реакция. Реакционният продукт според Goldberg и Barka се открива като единична гранула или яркорозов дифузоцветяване. Интересно е, че това е може би единственият пример сред хемопоетичните клетки, когато активността на α-нафтил ацетат естераза надвишава активността на киселата фосфатаза. Във всички останали клетки се наблюдава значително преобладаване на активността на киселата фосфатаза.