PCR анализ - точна диагностика на инфекции, Вземете PCR анализ в близост до къщата

Полимеразна верижна реакция (Полимеразна верижна реакция, PCR, PCR) е изобретена през 1983 г. от американския биохимик Кери Б. Мълис. През 1993 г. той получава Нобелова награда за това откритие.

Днес областите на приложение на PCR като съвременен метод на молекулярната биология са изключително широки. PCR диагностиката заема специално място в медицинската практика. И причината за това е съвсем проста: полимеразната верижна реакция прави невъзможното възможно.

Често PCR диагностиката се описва образно като метод, чрез който можете да намерите игла в купа сено и след това да изградите купчина от тези игли. „Иглата“ е малка част от генетичния материал на клетката (ДНК или РНК).

По този начин откриването на този метод е едно от най-забележителните събития в областта на молекулярната биология през последните десетилетия. Развитието на PCR метода позволи медицинската диагностика като цяло да се издигне на качествено ново ниво.

Основи на PCR

Освен това изследването, освен че просто увеличава броя на копията на ДНК участъците, позволява и други манипулации с генетичен материал. Поради това методът намира широко приложение в научните изследвания, биологичната и медицинската практика: при диагностика на инфекциозни и наследствени заболявания, при откриване на мутации, генотипиране, установяване на бащинство, идентификация на личността и др.

PCR в диагностиката на инфекциозни заболявания

Днес PCR диагностиката на инфекции е един от най-точните, чувствителни и ефективни клинични лабораторни методи. Освен това кръгът от откриваеми патогени е практически неограничен - ще бъде разработена тестова система за PCR анализ на желания патоген.

Поради високата си чувствителност, PCR ви позволява да идентифицирате патогена дори с неговия минимумсъдържание (т.е. само няколко молекули от неговата ДНК присъстват в изследвания биоматериал).

PCR открива патогени на инфекциозни заболявания, когато това не може да се направи с други методи (имунологични, културни, микроскопски). Следователно за редица инфекциозни агенти методът на полимеразната верижна реакция се превърна в "златен стандарт", той е изпитан във времето и клинично тестван. В съвременната лабораторна диагностика на инфекциозните заболявания PCR е най-чувствителният и специфичен метод за директно откриване на патогени. Това позволява не само да се установи етиологията на заболяването, но и да се контролира хода на инфекциозния процес и да се оцени ефективността на лечението.

Анализът за ППИ чрез PCR е особено важен при асимптоматичен ход на инфекциозен процес, причинен от безусловно патогенни микроорганизми (Chlamydia, качествено определяне на ДНК; Mycoplasma, качествено определяне на ДНК; Причинител на гонорея, качествено определяне на ДНК; Причинител на трихомониаза, качествено определяне на ДНК). Например, при хронична гонорея при жени, дори при използване на бактериологичен метод, често не е възможно да се открие гонокок, въпреки симптомите на хроничен възпалителен процес в шийката на матката или уретрата.

Съвременната PCR диагностика позволява не само да се идентифицира генетичният материал на инфекциозните агенти, но и да се определи концентрацията на тяхната ДНК / РНК (формат на количествено изследване). Определянето на броя на патогените е важно при вземането на решение дали да се предпише лечение, особено ако се открият опортюнистични микроорганизми (Mycoplasma, ДНК количествено определяне; Ureaplasma типизиране, ДНК количествено определяне).

Едно от основните направления в развитието на PCR метода е разработениятв CMD формат "Multiprime", който ви позволява да идентифицирате в една епруветка (и една реакция) няколко патогена.

PCR диагностика на хепатит

Понастоящем са известни най-малко 5 вируса, способността на които да причиняват увреждане на черния дроб е доказана. Това са причинителите на хепатит A, B, C, D, E. В редки случаи хепатитът може да бъде причинен от вируси на Epstein-Barr и херпес симплекс. Способността да заразяват черния дроб на агенти като ТТ и вирусите на хепатит G днес не се признава от всички. Всички тези вируси принадлежат към различни семейства, имат различни биологични свойства и съответно тактиката на лечение също ще се различава значително в зависимост от етиологията на хепатита.

Като се има предвид горното, много неотложен проблем е адекватната етиологична диагноза на вирусния хепатит с идентифицирането на специфичен патоген. Това е невъзможно без използването на съвременни молекулярно-биологични методи. Следователно диагностицирането на хепатит чрез метода на полимеразна верижна реакция е една от най-важните стъпки при установяване на причината за заболяването и определяне на по-нататъшни тактики за лечение.

PCR при диагностицирането на HIV инфекция

Понастоящем за лабораторна диагностика на ХИВ инфекцията се използва най-достъпният и в същото време чувствителен подход - откриването на антитела срещу ХИВ в кръвта с помощта на ензимно-свързан имуносорбентен анализ (ELISA) - последвано от потвърждаване на положителните резултати от теста чрез имуноблотинг (IB). Ефективността на идентифициране на хора, заразени с ХИВ чрез този подход може да достигне 99% или повече.

Но серологичната диагноза на HIV инфекцията има редица ограничения:

Неефективността по време на т.нар. "серологичен прозорец" (през първите седмици след инфекцията антителата не се откриват поради липсата им или ниската им концентрация).
Антителата срещу HIV се откриват дълго време при всички деца, родени от заразени с HIV майки.
Фалшиво положителни резултати от ELISA поради наличието в кръвта на антитела срещу антигени, подобни на HIV антигените.
Фалшиво-отрицателни и съмнителни резултати от ELISA и имуноблотинг (особено при пациенти в терминален стадий на заболяването).

В Центъра за молекулярна диагностика (CMD) можете да си направите PCR тест за ХИВ анонимно.

Къде да вземете PCR тестове?

За да направите това, вижте раздела на сайта „Къде да правите тестове“.