RIF кръвен тест за сифилис, диагностика на сифилис RIF в лабораторията

Реакция на имобилизация на бледа трепонема (RIBT). Задължително условие е изключването преди изследването на приема на антибиотици от пациента, които имат токсичен ефект върху бледа трепонема, причинявайки тяхното неспецифично обездвижване.

Положителните резултати от RIBT се откриват приблизително от средата на вторичния пресен период на сифилис и могат да се запазят дълго време след лечението. Ако е необходимо, методът се използва за откриване на антитела в CSF, това изследване се отличава с висока специфичност, но ниска чувствителност (около 40%).

RIBT не е много подходящ за диагностициране на ранни форми на сифилис поради късното (не по-рано от 8-9 седмици от момента на инфекцията) появата на AT-иммобилизини; методът може да даде фалшиво положителни резултати, особено при пациенти с автоимунна патология, злокачествени заболявания, диабет. Освен това RIBT е доста сложен, отнемащ време и скъп анализ, който изисква висококвалифициран персонал и наличие на вивариум, поради което през последните години се използва само в отделни лаборатории. При диагностицирането на RIBT се използва като арбитърна реакция в случай на несъответствия в резултатите от други серологични изследвания, за разграничаване на фалшиво положителни резултати и за установяване на диагноза на късни форми на сифилис.

Реакция на свързване на комплемента с трепонемален антиген (RSK с TA)Чувствителността на метода е около 80%, специфичността е 98%. Методът е част от комплекс от стандартни серологични тестове за сифилис, регламентиран със заповед на Министерството на здравеопазването на СССР № 1161 от 02.09.1985 г. "За подобряване на серологичната диагностика на сифилис". Понастоящем използването на тази реакция, както и CSC с кардиолипин антиген, е ограничено до отделни лаборатории.

Реакцияимунофлуоресценция (RIF)5. За диагностика на сифилис се използват няколко модификации на RIF: RIF-c - за откриване на антитела в CSF, RIF-200 (тестовият серум се разрежда 200 пъти преди реакцията); RIF-abs (RIF с абсорбция), IgM-RIF-abs (за определяне на IgM антитела). По отношение на чувствителността и специфичността RIF-abs не отстъпва на RIBT, но прилагането на този метод е много по-просто. Резултатите от RIF-abs стават положителни от 3-та седмица след инфекцията (преди появата на твърд шанкър или едновременно с него), това е метод за ранна диагностика на сифилис. Често положителни резултати от изследването много години след пълното лечение на ранен сифилис, а при пациенти с късен сифилис - в продължение на десетилетия.

Индикации за RIF-abs:

положителни резултати от НТТ при бременни жени при липса на клинични и анамнестични данни, показващи сифилис;
изследване на лица с различни соматични и инфекциозни заболявания, при които се отбелязват положителни резултати от НТТ;
изследване на лица с клинични прояви, характерни за сифилис, но с отрицателни резултати от НТТ;
ранна диагностика на сифилис;
в някои случаи - като критерий за успех на антисифилитичното лечение: преминаването на положителен RIF-abs в отрицателен след лечението е 100% критерий за излекуване на сифилис.

IgM-RIF-abs се използва за отделно откриване на антитела от клас Ig, което е от особен интерес при диагностицирането на вроден сифилис, когато антителата срещу трепонема, синтезирани в тялото на детето, са IgM, а антителата IgG са от майчин произход. Показания за това изследване са: диагностика на вроден сифилис; оценка на резултатите от лечението на ранен сифилис.

RIF имависока чувствителност (98,5%) и специфичност (99,6%) при почти всички форми на сифилис. Недостатъците на РИФ са: невъзможност за автоматизиране на изследването и записване на резултатите; трудности при приготвянето на висококачествен антиген от суспензия от бледа трепонема, получена от тестис на заразен заек; субективизъм при оценката на резултатите.

Реакцията на пасивна хемаглутинация (RPHA). Сравнението на резултатите, получени с помощта на RPHA и RIBT, RIF-abs, CSR, MRP показа висока чувствителност и специфичност на RPHA при диагностицирането на сифилис, съвпадащи с резултатите от RIF-abs.

RPGA може да се изпълнява в качествена и количествена версия, има макро- и микромодификации. Количественият метод на RPGA ви позволява да оцените концентрацията на специфични трепонемни антитела в кръвта. Титри от 1:640 и по-ниски са типични за пациенти, лекувани за сифилис в миналото. По-високите титри обикновено са за активна нелекувана инфекция.

Положителните резултати от RPHA, като правило, се отбелязват 3 седмици след появата на твърд шанкър и след това при пациенти, които са имали сифилис в продължение на много години, често за цял живот.

Чувствителността на RPHA е 76% за първичен сифилис; 100% за вторичен сифилис; 97% с латентен сифилис; 94% с късен сифилис. Специфичността на RPGA е по-висока от специфичността на RIF-abs, тя е 99%.

Поради съотношението на висока специфичност, чувствителност, лекота на прилагане, стандартизация на реагентите сред трепонемните тестове за серодиагностика на сифилис, RPHA постоянно заема водеща позиция в клиничната практика в света.

Специални предимства на ELISAса: висока чувствителност и специфичност на метода; автоматизация на настройката на реакцията; висока степен на стандартизация; възможностиизследвания на голям брой серумни проби; в количествено отчитане и обективно документиране на получените резултати; възможността за едновременно определяне на титъра на антитрепонемни антитела от различни класове (IgG и IgM) в една проба; пригодност за ранна диагностика на сифилис и диагностика на вроден сифилис; в лесна употреба за изследване на кръв в службата за кръвопреливане; приложимост като потвърдителен специфичен трепонемален тест. ELISA чувствителност 98-100%, специфичност 96-100%.

Недостатъците на ELISA включват: непригодност за изследване на единични проби; по-дълъг период за получаване на резултат и по-кратък срок на годност на комплектите ELISA, например, в сравнение с RPHA.

Имунен блотинг (IB).Един от съвременните методи за диагностициране на сифилис е IB за определяне на IgG или IgM антитела към определени антигени на бледа трепонема.

Методът има висока чувствителност (до 100%), специфичност (98%) и възпроизводимост (100%). Изследването дава възможност да се изследва спектърът на антителата към няколко антигена на T. pallidum наведнъж, използването на високо пречистени рекомбинантни и пептидни антигени, които минимизират неспецифичната реактивност на серума.

Всичко това определя възможността за предпочитане на използването на IB метода пред други трепонемни тестове за проверка на диагнозата сифилис в трудни случаи, по-специално за диагностициране на сифилис през втората половина на инкубационния период, латентен вроден сифилис в първите дни от живота на детето, за откриване на латентен сифилис при хора със слаб хуморален отговор, както и за разграничаване на фалшиво положителни резултати от други тестове.