зарастване на рани цитология
Цитологичните методи за изследване на заздравяването на ранисе основават на идеята, че протичането на процеса на раната протича в съответствие с универсален модел, който се изразява в строга последователност на развитие на биохимични реакции и промяна на цитологичните елементи в раната по време на нейното зарастване. Въз основа на това цитологичното изследване на рани в динамиката на зарастването дава обективна информация за протичането на процесите на репаративна регенерация и позволява своевременно идентифициране и уточняване на различни нарушения и отклонения в зарастването на раните.
Цитологичният методпри изследване на рани е един от първите, използвани от Carrel и Dehetly, които през 1918 г. предлагат да се изследва отделянето от рана, за да се оцени естеството на хода на процеса на раната. А. Г. Алексеев (1925) на VIII Всесъюзен конгрес на терапевтите в Москва докладва за своя метод за цитодиагностика на гнойни рани. Sarast и Fowert (1940), L. B. Levison и N. S. Skladovskaya-Stroganova (1943), въз основа на цитологични изследвания на рани, изразиха мнение за прогностичната стойност на динамиката на полиморфонуклеарните неутрофили и макрофагите. Това мнение беше потвърдено от Z. N. Katsielson (1947), който изследва ексудата на следоперативни рани, използвайки оригинална техника, разработена за тази цел.
През 1942 г. М. П. Покровская и М. С. Макаровпредлагат оригинален метод за микроскопско изследване на цитологичните елементи на раневия ексудат чрез изследване на препарати от тъканни отпечатъци от рани. Техниката беше посрещната с интерес от много хирурзи по време на Втората световна война и след това стана широко използвана в хирургически, онкологични и гинекологични клиники, като в момента е един от най-разпространените методи за изследване на зарастването на отворени рани. Това се доказва от положителните отзиви на мнозинаместни изследователи и практически лекари.
Метод на "отпечатъци от рани"
За цитологично изследване на ранипо метода на М. П. Покровская и М. С. Макаров е необходима предварителна подготовка на отпечатъчни препарати. За тази цел се използват обикновени предметни стъкла, единият край на които за удобство на етикетирането на препарата е направен непрозрачен, за което между краищата на двете стъкла се втрива малко количество мокър пясък. Чисти, готови за употреба предметни стъкла се съхраняват в алкохол в буркан със запушалка.
Предида направитепрепарата, стъклото се изважда от буркана със стерилна пинсета и веднага се изгаря върху пламъка на спиртна горелка (т.е. предметното стъкло се дезинфекцира два пъти). Топло стъкло вече може да се използва за приготвяне на препарат за отпечатък от повърхността на раната.
От повърхността на ранатас помощта на стерилна памучна топка първо се отстранява гной (но не и горният слой левкоцити). Придържайки стъклото за ръба с матова повърхност, противоположният му край последователно се допира до мястото на раната, която ще се изследва. След това върху стъклото остават отпечатъците от полепналите по него клетки.
Върху матовата повърхност на стъклотое посочено името на пациента, датата, номерът на лекарството и др.. Надписът се прави с обикновен черен молив, след което графитните зърна се измиват с парче памук, за да се избегне замърсяване на фиксатора с прах.
С целфиксацияпрепаратът се потапя в метилов алкохол (за 5 минути) или в смес на Никифоров (за 15 минути), или в денатуриран алкохол (за 20 минути). След фиксиране препаратът подлежи на оцветяване. Добри препарати се получават чрез оцветяването им с азур-еозин, според Максимов, хематоксилин-еозин и други методи. най-добротое метод за паноптично оцветяване на Романовски с предварително оцветяване на препарата според May-Grunwald. Един от съществуващите методи може да се използва за откриване на оксидазни и пероксидазни вещества в клетъчните елементи на лекарството.
В отпечатъка живите тъканни клетки, полепнали по стъклото, бързо изсъхват и вече са фиксирани до известна степен. Последващото фиксиране на клетките, плътно прилепнали към стъклото с алкохол, не променя значително техния обем, следователно в препаратите за печат клетките винаги изглеждат по-големи, отколкото в хистологичните срезове. Изследването на отпечатъчния препарат от гранулационната тъкан на раната показва, че клетъчните елементи в тях имат редица съществени разлики от тези, които виждаме в хистологичните срезове на гранулационната тъкан. Това се обяснява с факта, че при направата на хистологични срезове, особено много тънки, клетките неизбежно се увреждат, което се влошава от действието на механични и химични фактори, използвани при по-нататъшната обработка на препаратите. При по-дебели хистологични срезове яснотата на изображението се губи и проекцията на клетъчните контури се променя по време на микроскопия.