Автоматизация на цитологичните изследвания
Автоматизирането на цитологичните изследванияможе да бъде разделено на 2 етапа 1) - първична селекция на препарати с наличие на патологични промени в клетките и изключване на "празни" и нормални препарати, 2) - диагностика, приближаваща се до хистологично ниво в неговото ниво.
Първият етапе пряко свързан с масовите профилактични прегледи. Тъй като в този случай до 97% от препаратите, влизащи в изследването, се оказват нормални, не е препоръчително да се включват голям брой квалифицирани цитолози. На 1-ви етап цитологичните препарати, получени по време на профилактични прегледи, всъщност се разделят на 2 групи „нормални“ и „патологични“ (със съмнение за злокачествен растеж).
Проблемът с автоматичнотосортиране на цитологичните препаратина нормални и препарати със съмнение за злокачествен растеж не е решен и е в процес на разработка.
Основните трудности при автоматичнияанализ на цитологични препаратиса наличието на натрупвания на клетки и тяхното наслояване една върху друга, неравномерното им разположение и оцветяване, наличието на чужди включвания (левкоцити, бактерии, охлюви, кристали от боя и др.), нагъване на цитоплазмата, огъване на клетъчните краища и др. Трудностите тук са свързани с липсата на общоприети параметри, разработени за всяка локализация, и отчасти с трябва да имате компютър с голяма памет.
В това отношение работата на цитолозите-морфолози върху избора на признаци, характеризиращи злокачествени и доброкачествени тумори с различни локализации, е от голямо значение. Тук също възникват големи трудности, тъй като е добре известно, че злокачествените клетки нямат специфични характеристики и следователноНяма абсолютни критерии за злокачествено заболяване.
Правят се не безуспешни опитиза използване на морфометрични методи в клиничната цитология за диференциална диагноза. Анализът на хистограмите, отразяващ разпределението на клетките в зависимост от тяхната площ, показа, че те имат свои собствени характеристики при различни заболявания, ширината на основата на хистограмата, височината на пиковете, местоположението на последните в определени области на хистограмата и процента на клетките, различни по площ.
Проведенитекариометрични изследванияпоказаха, че този метод е ценен не само в диференциалната диагноза на доброкачествени и злокачествени новообразувания, но и до известна степен в диференциалната диагноза на различни форми на последните.
Специално място средизследваниятаот този вид заема количественото определяне на нуклеинови киселини и главно дезоксирибонуклеинова киселина. Към днешна дата вече е натрупан достатъчно материал в тази посока, от което следва, че туморните клетки, за разлика от нормалните соматични клетки, се характеризират с широка вариабилност в съдържанието на ДНК и че увеличаването на средното количество ДНК на ядро е характерна черта на злокачествените тумори. Следователно тези показатели могат да се използват при диференциалната диагноза на доброкачествени и злокачествени лезии.
Изследването на съдържанието на ДНК в клеткитесе извършва чрез различни методи на абсорбционна цитоспектрофотометрия, цитофлуориметрия, радиоавтография с използване на Н-тимидин. Трябва обаче да се отбележи, че изброените методи са доста трудоемки и следователно не е възможно да се изследва голям брой клетъчни елементи във всеки конкретен случай. Държанисъщо изследване на съдържанието на ДНК в ядрата на клетките на различни неоплазми чрез метода на импулсна цитофотометрия.
Бързото развитие на химиотерапиятана тумори като една от най-важните области на съвременната онкология, синтезът и изолирането на огромно количество цитостатични агенти от естествени източници изискват точни, обективни и в същото време бързи методи за изследване, които биха оценили ясно степента на активност и механизма на действие на тези вещества, за да ги подберат за практическа употреба. Цитостатичните лекарства, принадлежащи към различни класове съединения, увреждат туморните клетки на определени етапи от техния жизнен цикъл, причинявайки дълбоки смущения в метаболизма на ДНК.
Доскорорадиоавтографските методи за изследване наДНК синтеза отнемаха време и имат ограничено информационно съдържание. Значително по-големи възможности за изследване на активността към механизма на действие на противораковите лекарства се отварят при използване на метода на импулсната цитофотометрия. Той дава възможност бързо и статистически точно да се определи количествено съдържанието на ДНК в голям брой клетъчни елементи на всички етапи от жизнения цикъл и да се идентифицират анеуплоидни клетъчни клонове. Високата чувствителност на метода и относителната простота позволяват да се анализират голям брой наблюдения за кратко време.
Това го прави незаменим при експерименталното предклинично изследване на нови потенциално активни антитуморни вещества.