Цитологично изследване на отпечатъци от засегнатите области на устната лигавица
Цитологично изследване на отпечатъци от засегнатите участъци на устната лигавица. За да се получат отпечатъци, сухо, обезмаслено, стерилно предметно стъкло се нанася няколко пъти върху изследваната област. Ако засегнатата област е трудно достъпна, можете да използвате ластик. Дъвката се нарязва на дълги тесни колони (работна част с площ 3 × 3 mm), стерилизира се, изсушава се, нанася се върху изследваната област и след това върху предметното стъкло. На всеки слайд се правят 5-10 отпечатъка. Препаратите се фиксират в метилов алкохол за 15-20 минути, микроскопират се с обектив х40, както и с имерсионен обектив х100.
Известно е, че в отпечатъците от засегнатите области на устната лигавица се откриват епителни клетки от ранен и късен етап на диференциация в различно съотношение. Разграничаване на следните етапи на диференциация на епителните клетки с подходящи морфологични характеристики [Bykova I. A. et al., 1987; Lange D., 1972].
стадий - базални клетки, форма от кръгла до овална, диаметър от 16,5 до 22,5 микрона, ядрен диаметър от 10 до 13,5 микрона, ядрено-цитоплазмено съотношение (съотношението на диаметъра на ядрото към диаметъра на клетката) е около 0,6. Хроматинът на ядрото е деликатно мрежест, цитоплазмата образува тесен ръб, тя е базофилна.
парабазален клетъчен стадий, кръгла или овална форма, диаметър от 17 до 45,5 микрона, ядрен диаметър от 7 до 17,5 микрона, ядрено-цитоплазмено съотношение в рамките на 0,5-0,6. Структурата на хроматина е тънка, цитоплазмата е по-малко базофилна.
етап - междинни клетки от тип I, овална форма, диаметър от 31 до 51,5 микрона, ядрен диаметър от 9 до 18,5 микрона, ядрено-цитоплазмено съотношение около 0,3, ядрото е все още доста фино структурирано, цитоплазмата е слабо базофилна, имасклонност към образуване на израстъци.
стадий - междинни клетки от тип II, многоъгълна форма, диаметър от 25 до 88 микрона, ядрен диаметър от 7,5 до 15 микрона, ядрено-цитоплазмено съотношение приблизително 0,2. Ядрото е по-грубо структурирано, цитоплазмата е слабо базофилна, образува израстъци, появяват се първите признаци на кератинизация.
стадий - повърхностни клетки, многоъгълна форма, диаметър от 22,5 до 82 микрона, ядрен диаметър от 6 до 13 микрона, ядрено-цитоплазмено съотношение по-малко от 0,2. Ядрото е пикнотично, цитоплазмата е от слабо базофилна до оксифилна, явленията на кератинизация са изразени, цитоплазмата образува широки израстъци, границите на цитоплазмата са неясно контурирани.
стадий - безядрени клетки, неправилна форма, диаметър от 28 до 55 микрона, оксифилна цитоплазма, с висока степен на кератинизация, често се вижда кухина на мястото на ядрото.
В отпечатъци от здрава лигавица се откриват само клетки от късни етапи на диференциация: единични клетки от етап III, около 10% от клетки от етап IV, около 40% от клетки от етап V и 50% от клетки от етап VI. Съотношението на клетките от различни етапи на диференциация в нормата може да зависи от локализацията в устната кухина на областта на лигавицата, от която е получен отпечатъкът.
За обективна сравнителна оценка на цитологичните характеристики на отпечатъците от устната лигавица, резултатите от цитограмите се обработват математически по следната формула: 1, 2, 3, 4, 5, 6 цифрови обозначения на степените на клетъчна диференциация; a, b, c, d, e, f - буквени обозначения на броя на клетките (%) със съответната степен на диференциация при броене на цитограми на отпечатъци на 100-200 клетки. Съответно индексът на диференциация за нормална лигавица ще бъдеприблизително равно на: IDK \u003d 4 • 10 + 5 • 40 + 6 • 50 \u003d 540 (обикновено може да варира от 450 до 560).
Използването на IDK за оценка на цитограми на отпечатъци при лезии на устната лигавица показа яснотата и удобството на този показател за практическо наблюдение в динамиката на заболяванията. При язвени възпалителни процеси IDC може да намалее до 200-300 в острия период, с хиперкератоза - да се увеличи до 600, на различни етапи от лечението отново да се доближи до нормата.
Освен епителните клетки, в отпечатъците на лигавицата се откриват левкоцити, еритроцити, хистиоцити, макрофаги, което е важно за характеризиране на процеса. От голямо значение за диагностиката е откриването на туморни клетки, клетки на Цанг и др. Препаратите от отпечатъци могат да се използват и за груба оценка на естеството на микрофлората.