Инструкция за използване на комплекта реактиви за определяне концентрацията на белтък в урината
САМО ЗА ИН ВИТРО ДИАГНОСТИКА!
ПРИНЦИП НА МЕТОДАКогато протеинът, съдържащ се в урината, взаимодейства със сулфосалициловата киселина, се развива равномерно помътняване поради образуването на протеинова утайка. Степента на мътност на разтвора е пропорционална на концентрацията на протеин.
Единична порция урина или дневна урина. Срокът на годност на тестовите проби при температура 2-8 ° C в продължение на 12 часа.
1. 3% разтвор на сулфосалицилова киселина.
2. Дестилирана вода.
Линейност - от 0,025 до 0,8 g / l.
Към 1 ml урина се добавят 3,5 ml 3% разтвор на сулфосалицилова киселина. Разбъркайте добре и след 5-10 минути вземете показания на FEC при дължина на вълната 590-650 nm срещу дестилирана вода в кювета с дължина на оптичния път 1 см. Преди измерване на оптичната плътност разбъркайте добре съдържанието на епруветката, внимателно се уверете, че цялата утайка преминава в разтвора, постигайки равномерна мътност. Недостатъчното разклащане може да доведе до подценени резултати!
Изчисляване на концентрацията на протеинспоред кривата на калибриране. За изграждането му се приготвят разреждания на стандартен разтвор на човешки серумен албумин в 0,9% разтвор на натриев хлорид с концентрации: 0,025; 0,05; 0,1; 0,2; 0,4; 0,8; g/l. За всеки от разтворите измерванията се правят по същия начин, както при проба от урина.
Забележка. Ако стойността на абсорбция е по-голяма от 1,0 (концентрация на протеин по-голяма от 1 g/l), пробата трябва да се разреди 10 пъти, определянето да се повтори и резултатът да се умножи по разреждането.
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ НА РЕЗУЛТАТИТЕНормално отделянето на протеин в урината не надвишава 0,08-0,150 g / ден. Протеинурия - увеличаванеконцентрация на протеин в урината над 80-150 mg / ден.
Въпроси за консолидиране на знанията
1. Каква е разликата между получаването на кръвен серум и плазма. Каква е маркировка на вакуумни епруветки за еднократна употреба за събиране на серум и кръвна плазма.
2. Какви нарушения по време на вземането на кръвни проби могат да доведат до фалшиво високи резултати при определяне на общия протеин в кръвния серум?
3. Защо има относително повече протеини в кръвната плазма, отколкото в кръвния серум?
4. Какво е относителна хиперпротеинемия? На какво се дължи?
5. Какво е относителна хипопротеинемия? На какво се дължи?
6. Защо се наблюдава хипопротеинемия при чернодробни заболявания?
7. Защо се наблюдава хипопротеинемия при бъбречни заболявания?
8. Формулирайте основния закон на колориметрията. Напишете формула.
9. Как да изчислим фактора за изчисляване на концентрацията на протеин в кръвния серум?
10. Напишете формула за изчисляване на концентрацията на протеин с помощта на калибратора.
11. Обяснете защо при концентрация на общ белтък в кръвната плазма ˃100 g/l пробата трябва да се разрежда два пъти и определянето да се повтаря? След това резултатът се умножава по степента на разреждане на пробата.
12. Как бъбреците нормално ограничават отделянето на плазмени протеини?
13. Какво е протеинурия? Какви видове протеинурия познавате?
14. Защо албумините се губят през бъбречния филтър на първо място? Какво е селективна и неселективна протеинурия?
15. Как се нарича качествената реакция за откриване на индикан в урината?
ЗАДАЧА 1.
Между кои аминокиселини в посочения полипептид:
хидролизата на пептидната връзка ще се извърши под влияние на:
а) пепсин; б) химитрипсин; в) трипсин; d) карбоксипептидази;
Кое отот тези ензими принадлежат към ендопептидазите, а кои принадлежат към екзопептидазите? Кои храносмилателни сокове съдържат всеки от своите ензими?
ЗАДАЧА 2.
При пациент, приет в центъра за изгаряния, за да се оцени протеиновият метаболизъм, се изчислява показателят за азотен баланс в динамика. Резултатите са представени в таблицата:
Изпитни дни | Входящ протеин, g/ден | Общ азот в урината, g/ден |
1-во | 65 гр | |
2-ро | 72 гр | |
5-ти | 99 g | |
12-ти | 100 гр |
Задача.1) Какво е азотен баланс? Назовете формите на азотния баланс. 2) Защо азотният баланс се използва за оценка на протеиновия метаболизъм в тялото. 3) Изчислете стойността на азотния баланс (AB) за всеки ден от изследването, като използвате формулата:
AB (g) = [прием на протеин: 6,25] - [общ азот в урината + 4]
където 6,25 е коефициентът на преобразуване на количеството протеин в количеството азот: 6,25 g протеин = 1 g азот; 4 g - корекция за допълнителна загуба на азот от организма.
4) Анализирайте получените резултати: как се промени азотният баланс по време на периода на възстановяване на пациента и какво показва това?
ЗАДАЧА 3.
Пациентът е имал значителна кръвозагуба в резултат на нараняването. Физиологичният разтвор се прилага като заместителна терапия. Пациентът разви оток.Задание.1) Как се променя общият протеин в кръвния серум в резултат на загуба на кръв? 2) Каква е ролята на албумините в кръвната плазма? 3) Защо пациентът е развил оток след въвеждането на физик. решение?