Лечение на чума и парвовирусен ентерит при месоядни животни с химиотерапия и имуностимуланти

Като ръкопис

ДАНИЛОВСКИ МИХАИЛ ВАСИЛЕВИЧ

ЛЕЧЕНИЕ НА ЧУМА И ПАРВОВИРУСЕН ЕНТЕРИТ НА МЕСОЯДНИ С ХИМИКАЛИ И ИМУНОСТИМУЛАНТИ

16.00.03. – ветеринарна микробиология, вирусология

епизоотология, микология, имунология

Дипломна работа за научна степен

кандидат на ветеринарните науки

Работата е извършена във ветеринарната клиника "Айболит", Уляновск

Доктор на биологичните науки, професор ВАСИЛЕВ Д.А.

Доктор на биологичните науки, водещ изследовател ОБУХОВ И.Л.

РАХМАТУЛИН Е.К. -D.V.S., професор UGSHA

СЕРЕДА АД - д.б.с., ул. изследовател във ВНИИВВиМ

Водещата институция е All-Russian Scientific Research

Институт за хуманно отношение към животните (ARRIAH)

Защитата ще се проведе "____" ___________2000 г. в ____ часа на заседание на дисертационния съвет K 120.82.03 в Уляновската държавна селскостопанска академия.

Адрес: Уляновск, булевард "Нови Венец", 1.

Дисертацията може да бъде намерена в библиотеката на UGSHA.

Резюмето е изпратено "____" ___________ 2000 г.

академичен секретар на дисертационния съвет,

1. ОБЩА ХАРАКТЕРИСТИКА НА РАБОТА

1.1. Уместност на темата

Сред вирусните заболявания на месоядните основното място принадлежи на чумата и парвовирусния ентерит. Без да се отрича водещата роля на ваксинацията в осигуряването на защита срещу тези заболявания, трябва да се приеме, че намаляването на разпространението на редица инфекциозни заболявания на месоядните животни и смъртността от тях може да се постигне с активно научно търсене на лекарства от различни направления.

Практиката показва, че собствениците на домашни любимци се обръщат към ветеринарните институции, като правило, в периода на проява на клинични признаци.инфекциозни заболявания. В този случай ветеринарният лекар започва лечение без резултатите от лабораторната диагностика. Колкото по-широк е спектърът на действие на използваните лекарства, толкова по-голяма е вероятността за положителен резултат от лечението, тъй като в процеса на развитие на вторични имунодефицити при вирусни инфекции започват да се появяват вторични вирусни и бактериални заболявания. Ето защо от научен и практически интерес са комплексните лекарства, които блокират или инхибират възпроизвеждането на вируси и бактерии, стимулират имунната система на животните.

Проблемът с неспецифичното стимулиране на имунната система привлича все повече внимание. Това се дължи на редица обстоятелства: намаляване на нивото на хранене, контрол на инфекциозните заболявания, замърсяване на околната среда. Имунодефицитните състояния обикновено са придружени от много заболявания. Корекцията на имунната система може до голяма степен да коригира ситуацията. Един от начините за предотвратяване на болестите по животните и повишаване на тяхната естествена устойчивост е използването на имуностимулиращи лекарства.

Веществата, които могат да повлияят на имунната система, могат да бъдат разделени на три големи групи по произход: екзогенни, ендогенни и синтетични. Екзогенни - включват препарати от микробен произход, предимно бактериални и гъбични. Ендогенни - комбинират екстракти от органите на имунната система, както и биологично активни протеини, произведени от лимфоцити и макрофаги. Синтетични - препарати от микробен или животински произход; известни лекарствени препарати с допълнителни имунотропни свойства; получени в резултат на насочен химичен синтез.

Ефективността на имуностимулиращата терапия може да се увеличи чрез комбинирано използване на лекарства. Използването обачеимуностимулиращата терапия е възпрепятствана от липсата на данни за сравнителната ефективност на имуностимулиращата монотерапия. Изложеното по-горе показва, че търсенето на средства за повишаване на имунния статус на месоядните животни и начини за лечение на вирусни инфекции е спешна задача за ветеринарната медицина.

Понастоящем наборът от вещества с изразена антивирусна активност, както в превантивен, така и в терапевтичен аспект, е много ограничен. Следователно, в допълнение към създаването на местни аналози на чуждестранни лекарства, оценката на употребата на антивирусни лекарства на практика е от научен и практически интерес.

Най-обещаващите области за профилактика и лечение на инфекциозни заболявания са следните:

- блокиране или инхибиране на възпроизвеждането на вируса в лезията, както и намаляване на нивото на виремия с помощта на високоефективни инхибитори на вирусната репродукция;

- стимулиране на имунния отговор на организма с помощта на специфични ваксинални препарати, както и неспецифични имуностимуланти.

1.2.Цел и задачи на изследването

Целта на тази работа е да се определи превантивният и терапевтичен ефект на различни имуностимуланти и химиотерапевтични лекарства за чума и парвовирусен ентерит на месоядните животни.

В съответствие с целта бяха решени следните задачи:

  1. да се определи ефективността на антивирусните химиотерапевтични лекарства за лечение на чума и парвовирусен ентерит при месоядни животни;
  2. да изследва ефекта на имуностимулаторите върху показателите за неспецифична и специфична резистентност на месоядни животни, с експериментален имунен дефицит, причинен от ваксинация;
  3. за изследване на терапевтичната ефикасност на имуностимулантите при кучета с чума и парвовирусен ентерит;
  4. оценете ефективносттакомбинирано използване на ваксини с имуностимуланти;
  5. да даде препоръки за лечение на нервни форми на кучешка чума с помощта на имуностимуланти и химиотерапевтични лекарства.

1.3. Научна новост

Установено е, че нивото на виремия при животни, лекувани с рибамид, рязко намалява още един ден след началото на лечението.

За първи път беше предложено да се използват кучета, ваксинирани с ваксина Vanguard 5/L като модел за изследване на имуномодулатори в имуносупресивно състояние.

Установено е, че от шестте изследвани имуностимуланта само Immunofan и GMDP стабилизират бактерицидната активност на кръвта и концентрацията на IgG в серума, намаляват продължителността на лимфопенията, т.е. всъщност имат имуностимулиращи свойства.

Доказано е, че имуностимулаторите на GMDP и имунофан повишават нивото на следваксиналния хуморален имунитет.

1.4. Практическо значение

Предлага се използването на имунофан и GMDP за лечение на различни форми на тежест на заболявания, причинени от вируси на кучешка чума и парвовирусен ентерит на месоядните животни.

Разработени са оптимални схеми за лечение на чума и парвовирусен ентерит при месоядни животни с химиотерапевтични лекарства римантадин и риботан. Предложена е и препоръчана за прилагане в практиката схема за лечение на нервни форми на кучешка чума с комплекс от тези лекарства.

1,5. Апробация на работата

Резултатите от изследването са докладвани на републикански и научно-практически конференции от 1987 до 2000 г.

1.6. Публикации

1.7. Основните положения на дисертацията, предложена за защита

Разработената схема за фармакологично лечение на инфекциозни заболявания на месоядните с комплекс от римантадин и рибамид осигурява възстановяване на повече от 90% от животните.

Използването на имунофани GMDP повишава имуногенността на живите и инактивираните ваксини. Тези лекарства могат да се считат за адюванти.

1.8. Обхват и структура на дисертационния труд.

Дисертационният труд е представен на 118 листа машинописен текст и включва: въведение, преглед на литературата, материали и методи, резултати от собствени изследвания, дискусия, изводи, практически предложения и списък с използвана литература (92 източника, включително 42 местни). Работата е илюстрирана със 7 таблици, 6 фигури и допълнена с приложения.

2. СОБСТВЕНИ ИЗСЛЕДВАНИЯ

2.1. Материали

Изследванията са проведени върху кучета на възраст от 3 месеца до 8 години.

В работата са използвани ваксини Vaccum, Vanguard 5/L Multican-4; лекарства за химиотерапия римантадин (-метил-1-аминометиладамантан хидрохлорид), виразол (1--D-рибофуранозил-1,2,4-триазол-3-карбоксамид), продигиозан, мастим, риботан (1-D-рибофуранозил-1,2,4-триазол-3-карбоксамид), миксоферон, имунофан, N-ацетил-глюкозамин ил-N-ацетилмурамил-L-аланин-D-изоглутамин (GMDP); глобулин против ентерит, хепатит, чума.

2.2. Методи

Животните са ваксинирани съгласно инструкциите на производителя.

Фагоцитната активност на кръвните левкоцити се взема предвид от относителния брой на фагоцитните неутрофили и средния брой частици, абсорбирани от един неутрофил.

Определянето на лизозим се извършва чрез способността да се лизозимализира клетъчната стена на Micrococcus lysodeikticus (Blumberg I.A. и Dundure B.L., 1987).

Определянето на HSF антигени в кръвта и антитела в серума се извършва с помощта на теста за пасивна хемаглутинация (TPHA) и теста за забавяне на пасивната хемаглутинация (RPHA), съответно.

Антигените на причинителя на парвовирусен ентерит се определят в теста за хемаглутинация (HRA) иантивирусни антитела - в реакцията на инхибиране на хемаглутинацията (RTGA).

Серумната концентрация на IgG се определя чрез радиална имунодифузия.

Статистическата обработка на данните беше извършена с помощта на персонален компютър IBM PC/AT 486.

2.2. Резултати от собствени изследвания

2.2.1. Лечение на чума и парвовирусен ентерит на месоядни животни с химиотерапия

Научен и практически интерес представляват лекарства, които блокират или инхибират възпроизводството на вируси. Изследвахме действието на ремантадин и рибамид в различни комбинации.

В първата серия от експерименти болните от чума месоядни кученца на кучета, както са получени, са лекувани по две схеми. Общо в експеримента имаше 26 животни, които бяха разделени на две групи (по 8 и 18 глави).

Първата, контролна група животни (12 глави) се третира по традиционната схема, насочена основно към елиминиране на повръщане, дехидратация, ацидоза и вторични инфекции. Започват със стомашна промивка с 0,1% разтвор на калиев перманганат, след това интрамускулно инжектират церукал в доза от 2 ml до спиране на повръщането, интерферон в доза от 1,5-2 ml еднократно и специфичен тривалентен серум - 2 ml два пъти дневно в продължение на 3-4 дни. Интравенозно се прилагат 15-20 ml 5% разтвор на глюкоза. Вътре даде сулфадимезин в доза от 0,25 g три пъти на ден в продължение на 3-5 дни.

Втората експериментална група (18 глави) вместо интерферон се инжектира интрамускулно с ремантадин в доза от 20 μg / kg телесно тегло дневно в продължение на 5 дни и в същото време лекарството се прилага с вода в доза от 40 mg / kg телесно тегло дневно в продължение на 5 дни.

В първата група 3 животни (25%) умряха, останалите се възстановиха, наблюдаваха се ясни признаци на подобрение на клиничното състояние.3-4 дни след началото на терапията. Във втората група умира 1 животно (5,6%). Явни признаци на подобрение на клиничното състояние се наблюдават още 2-3 дни след началото на терапията. Страничните ефекти на лекарството не са регистрирани.

В сравнителен аспект, виремията е определена при кучета с чума или парвовирусен ентерит на месоядни животни, лекувани без и с ремантадин. Установено е, че римантадин потиска размножаването на причинителя на кучешката чума, но не и възпроизвеждането на причинителя на парвовирусния ентерит.

Във втората серия от експерименти беше изследвана ефективността на рибамид при лечението на чума и парвовирусен ентерит при месоядни животни.

Пациентите, подредени по възраст, са разделени в 6 групи в зависимост от предварителната диагноза на заболяването и използвания химиотерапевтичен препарат за лечение.

Схема 1 (контрола):

а) с парвовирусен ентерит, лечението на кучета започва със стомашна промивка с 0,1% разтвор на калиев перманганат, след това церукал се инжектира интрамускулно в доза от 2 ml до спиране на повръщането, интерферон в доза от 1,5-2 ml веднъж. Подкожно се инжектират 10-20 ml физиологичен разтвор, интравенозно - 10-20 ml 5% разтвор на глюкоза. Вътре даде сулфадимезин в доза от 0,25 g три пъти на ден в продължение на 3-5 дни;

б) при чума на месоядни антибактериални средства се използва ампицилин интрамускулно - 25 000 единици, гентамицин - 2,5 mg на 1 kg телесно тегло два пъти на ден. При нарушение на функцията на стомашно-чревния тракт се предписва церукал - 0,25 g три пъти на ден. При диария бифекол се прилага перорално в размер на една доза на 10 kg телесно тегло два пъти дневно. Освен това, ако е необходимо, се накапва смес от 0,5% разтвор на глюкоза с изотоничен разтвор на натриев хлорид.

Схема 2 -в допълнение към схема 1 е използван рибамид на първия ден два пъти 40 и 20 mg/kg, на втория ден 20 mg/kg три пъти, на третия и четвъртия ден 20 mg/kg два пъти.

Схема 3 - в допълнение към схема 1 е използван рибамид през първия и втория ден в доза 40 mg/kg еднократно.

Резултатите са представени в табл. 1.

Таблица 1. Резултати от лечение с рибамид при кучета с чума или парвовирусен ентерит на месоядни животни.