Метод за получаване на екстракт от рога на сайга
Изобретението се отнася до медицината и медицинската индустрия, и по-специално до методи за получаване на екстракт от рога на сайга. Целта на изобретението е да интензифицира метода. Тази цел се постига с това, че средният слой от рога се използва допълнително като суровина, суровината се смила на дезинтегратор до прахообразно състояние, екстракцията се извършва с дестилирана вода при 20-25 ° C за мин. при съотношение суровини: разтворител 1:50 с едновременно излагане на ултразвук. 2 ил., 4 табл.
РЕПУБЛИКА ()9) (1 I ) (5I)5 A 61 K 35/32
СЛУЖБА НА СССР (ДЪРЖАВЕН ПАТЕНТ НА СССР) ОПИСАНИЕ НА ИЗОБРЕТЕНИЕТО
КЪМ АВТОРСКО СВИДЕТЕЛСТВО (21) 4917726/14 (22) 10.12.90 (46) 15.05.93. Бик. М 18 (75) М.А.Алиев, В.П.Верболович, Ю.К.Подгорный, Л.М.Подгорная, Ю.П. Верменичев, Г.А.Денисов, Л.П. Зарогацки и В.А.Загородний (56) Нестеренко И.Ф., Брехман И.И. и т.н.
Фармакологични изследвания на лекарството от сайга рога. Владивосток, 1984. (54) МЕТОД ЗА ПОЛУЧАВАНЕ НА ЕКСТРАКТ ОТ РОГ НА САЙГ
Изобретението се отнася до биологичната и медицинската химия и се отнася до получаването на биологично активни вещества с фармакологично действие.
Целта на настоящото изобретение е да разшири суровинната база, използвана за получаване на биологично активни съединения, да увеличи добива на продукта и да повиши неговата активност. За разширяване на суровинната база се предлага да се използват рога на сайга, а лекарството, получено по този метод, се нарича сайгорин.
В експерименти, които позволяват да се оцени резервният капацитет на тялото според времето на плуване на животните, беше установено, че екстрактът от рогата на сайга има стимулиращ ефект (Таблица 1). Методът на плуване и други подобни са изключително трудоемки. При разработването на метода за получаване на сайгорин беше такабеше установено, че лекарството има донорни свойства, т.е. наличие на връзки. подвижен водороден атом. Висока биологична активност на съединения с подвижен атом в (57) Изобретението се отнася до медицината и медицинската индустрия и по-специално до методи за получаване на екстракт от рога на сайга.
Целта на изобретението е интензификация на метода.Целта се постига чрез факта, че средният слой от рога се използва допълнително като суровина, като суровината се раздробява в дезинтегратор до прахообразно състояние. екстракцията се извършва с дестилирана вода при 20-25 С за 5-7 минути. при съотношение на суровини към разтворител 1:50 с едновременно излагане на ултразвук. 2 ил., 4 табл. б"
1 от природата се дължи на техните редуциращи свойства.Известните съединения с тази способност включват глутатион, чиято свободна SH-група определя свойствата му като вътрешен. римолекулен редуциращ агент и във връзка с това широкото му участие в метаболизма.
Наличието на подвижен водород се свързва с биологичната роля на NADH и NADPH.
Донори на водород са редица редуцирани форми на органични съединения, Q, например, аскорбинова киселина, която играе ролята на естествен антиоксидант и др. учението на сайгорин, контролът върху неговата дейност се извършва според този показател.
Фигура 1 показва зависимостта на времето за плуване на мишки от количеството на приложеното лекарство, оценено от наличието на донорни свойства; на фигура 2 - зависимостта на изхода на prs)канала от условията на екстракция, където
1 - традиционни методи за извличане; 2— методразпадане с изместване; 3 - разпадане с изместване + ефекта на предхиперзвука.
Има различни методи за определяне на свойствата на донора, но поради редица присъщи им недостатъци, ние използвахме собствен метод за определяне на този показател. За да направите това, 250 μl и 0.1 М4> фосфатен буфер, рН 8.0; 50 µl от 5 10 М разтвор на пероксидаза от хрян и се поставят в кюветния блок на инструмента. Реакцията започва чрез въвеждане на 200 μl от 5 × 10 3 М разтвор на луминол, съдържащ 7 × 10 М водороден прекис, и кинетиката на реакцията се записва на рекордер до пълното й завършване.Площта под кинетичната крива се приема за 100 . Записва се кинетиката на реакцията в присъствието на тестовите проби, определят се площите под кинетичните криви и по степента на тяхното намаление се съди за активността на тестовите проби. Количеството се приема като единица дейност. лекарство, което причинява 50$ инхибиране на луминесценцията, която възниква в реакцията на пероксидазно окисление на луминол.
Проведените изследвания показват, че само покритието и средният слой на рогата имат биологична активност, за разлика от сърцевината, където такива свойства не са открити (Таблица 2).В тази връзка в бъдеще само покритието и средният слой се вземат за получаване на сайгорин. което позволява да се намали количеството на примесите в целевия продукт, да се намали количеството на суровините, които се обработват допълнително с приблизително 30, да се увеличи неговата специфична активност.
За достатъчно пълна и ефективна екстракция е необходима комбинация от няколко фактора: правилен избор на екстрагенти, степен на смилане, условия на екстракция (температура, време и др.).
В прототипа, когато се анализират предишните методи за получаване на лекарството, се отбелязва, че простото и смилането на еленови рога с многократно емулгиране не ене осигурява нито високото качество на лекарството, нито задоволителния му добив.За увеличаване на добива на целевия продукт в прототипа се предлага рогата да се третират с жива пара преди смилане.
10 отчитат това с 18,7, за да увеличат биологичната си активност.
Анализът на недостатъците, присъщи на аналозите и прототипа, води до заключението, че за да се увеличи добивът
15 продукт и повишаване на активността на лекарството (и следователно увеличаване на ефективността на производството) е необходимо: 1) да се подобри технологията на смилане, 2) използването на зони. притежаващи биологична20 активност. 3) използването на щадящи режими на екстракция.
За да се увеличи добивът на продукта
1 е разработен метод за разпадане на тъкан от еленов рог до протоплазма. За тази суровина
25 се смила до прахообразно състояние в междината между повърхностите на женското и мъжкото тяло, на последното от които се дава прецесионно колебание, което осигурява специфично налягане Z0, равно на границата на якост на клетките на обработения слой рога.Комбинацията от компресия с едновременно срязване създава условия за повишаване на ефективността на последващото извличане. За да се потвърди целесъобразността"35 на разликата на този подход, беше извършен сравнителен анализ на ефективността на традиционните методи на смилане (ударен натиск, рендосване и др.) и използвания метод на разпадане. За да се запази
40 активността на лекарството, екстракцията се извършва при температура 20-25 ° C, като се използва магнитна бъркалка за смесване.
За да се опрости и намали цената на процеса, беше направен опит да се замени етанолът с дестилирана вода.
Предпоставката и оправданието за това беше фактът, че в серията разтворители за хроматография дестилираната вода е по-полярно съединение. Re50резултатите от сравнителния анализ са представени в таблица 3. Може да се види, че водните екстракти със същия обем на пробата намаляват светлинната сума на луминесценцията в по-голяма степен (т.е. съдържат по-голямо количество
55 активна съставка) както за покривния, така и за средния слой. Ние сме изчислили количеството екстракт, което е необходимо за намаляване на светлинната сума на сиянието íà 50 (Vsp). Както може да се види от таблица 2, водният екстракт от покривния и средния слой е необходим в 1.6 и 2.3
Зависимостта на времето за плуване на мишките от количеството на инжектирания наркотик е в пъти по-малка от тази на алкохола, т. е. същите пъти, съответно екстракцията с дестилирана вода е по-ефективна при тези условия.В тази връзка можем да приемем, че този метод на екстракция е много по-евтин и икономически оправдан.
При излъчване на зависимостта на добива на продукта от времето на екстракция (фиг. 2) може да се види, че използването на описания метод за разпадане на суровини в сравнение с традиционния позволява 1,8-2,0 пъти да се увеличи добивът на целевия продукт с повече от десетократно намаляване на времето за екстракция, замествайки етанола с широко разпространена дестилирана вода, извършвайки процеса на екстракция 15 при температура 20 ° C. ″
25 С, като се вземат предвид данните, показващи повишаване на биологичната активност на консервирани еленови рога с намаляване на 20 срока на топлинна обработка, е изследван ефектът от 60-минутна инкубация на получения екстракт при 80 С, което разкрива намаляване на активността на лекарството чрез
За да се извлече по-пълно целевият продукт от суровината, системата суровина-разтворител беше изложена на ултразвукови вибрации в MHz диапазон (F = 2,64 MHz, 1-30
0,6 - 1,0 W / cm, T = 600 - 900 s), което направи възможно увеличаването на добива на продукта с допълнителни 10 - 12% (фиг. 2, крива 3),Екстракцията се извършва при съотношение на суровина; разтворител (KzO) 1; 50 (тегло 35 суровини в g: обем вода в ml), Това съотношение е избрано по време на обработката на метода като оптимално, което позволява да се извлече 9096 от целевия продукт.активно вещество на етапа на екстракция, Разбъркването се извършва на бъркалка от всякакъв тип при стайна температура за 10-15 минути, след което течността се центрофугира при
4500 гр. за 10 мин. Супернатантата се отцежда, подлага се на лиофилизация и целевият продукт се събира.Лиофилизацията не води до намаляване на активността, което се установява чрез сравняване на активността на веществото преди и след процеса на лиофилизация (таблица 4).
Методът се изпълнява по следния начин (конкретен пример):
Сърцевината (ядрото) се отстранява от суровината (рога на сайга). Останалото се смила на прах, както е посочено в описанието на стр. 5. Десет грама от праха се изсипват в 500 ml дестилирана вода, поставят се върху магнитна бъркалка, излъчвателят на генератора на ултразвукови вибрации се поставя отгоре (F = 2,64 m Hz, (= 0,7
W/cm), така че повърхността на емитера да докосне водата, процесът на екстракция се извършва в продължение на 10-15 минути, центрофугира се в продължение на 10 минути при 4500 g, супернатантата се събира и се подлага на лиофилизация, получават се 2,5-3,5 g от целевия продукт.
1. Метод за получаване на екстракт от рога на сайга, включващ смилане на външния слой от рога, екстракция, последвано от отделяне на утайката, характеризиращ се с това, че за да се интензифицира методът, всредният слой от рога се използва допълнително като суровина, суровината се смила на дезинтегратор до прахообразно състояние, екстракцията се извършва с дестилирана вода при 20-25 ° С в продължение на 5-8 минути при съотношение суровина: вода 1:50 с едновременно излагане на ултразвук.
Активността на лекарството според светлинната сума на потискането на луминесценцията в 7;
Зависимостта на активността на екстракта от вида на екстрагента
Ефект от сушенето чрез замразяване върху лекарствената активност
Дейност и епа ата, Е
Воден разтвор на лекарството
След сушене чрез замразяване
t814900, ow-b areparayap, изд.
140
Ts cmpueruu, sue.
Съставител Л. Конюхова
Техред М. Моргентал Коректор V, Петраш
Редактор. Поръчайте абонамент за тираж 1600
ВНИИПИ на Държавния комитет за изобретения и открития към Държавния комитет за наука и технологии на СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5
Производствено-издателски завод "Патент", Ужгород, улица Гагарина. 101