Ваксина срещу шап тип инактивирана сорбирана
Изобретението се отнася до областта на ветеринарната вирусология и биотехнология и се отнася до ваксина срещу шап тип А. Ваксината съдържа авирулентен и пречистен антигенен материал от щама на вируса Aphtae epizooticae, фам. Picornaviridae, род Aphtovirus, серотип А, депозиран в колекцията на Федералната държавна институция "VGNKI" под регистрационен номер № 2045/Киргизстан/2007-DEPA № 2045/Киргизстан/2007-DEPA, получен в непрекъсната клетъчна култура на VNK-21, която е суспензия, съдържаща главно 146S и 75S имуногенни компоненти на крак- вирус на болестта на устата, адюванти алуминиев хидроксид със сапонин и поддържаща среда в ефективни пропорции. Ваксината има висока имуногенност и е в състояние да осигури ефективна защита срещу патогена на шап, циркулиращ в страните от Закавказието, Централна Азия, Близкия и Далечния изток. 11 т.п. f-ly, 14 табл., 1 тиня, 4 pr.
Чертежи към патент България 2526570
Изобретението се отнася до областта на ветеринарната вирусология и биотехнологии и може да се използва при разработването и производството на инактивирана адсорбирана ваксина срещу шап тип А.
Шапът е остро заразно вирусно заболяване на парнокопитните животни. Характеризира се с тенденция към широко разпространение и епизоотичен ход. Заболяването е съпроводено с големи загуби на мляко, месо и други видове животински продукти, усложнява търговската дейност и стопанската дейност. За осигуряване на устойчиво благополучие на страната по отношение на болестта шап в България се прилага система от мерки, в която приоритет е предотвратяване на навлизането на вируса на шап на територията, а в зоните с висок риск – ваксинация. В момента в България и страните от ОНД заза имунизация на говеда и дребни преживни животни срещу шап, като правило се използват инактивирани сорбирани ваксини, а за имунизация на свине - инактивирани емулсионни ваксини [1].
Технологията за производство на ваксина срещу шап от инактивиран вирус започва с подбор на производствени щамове въз основа на епидемиологичен анализ на динамиката на шапа в страната и съседните страни. При създаването на препарати за специфична профилактика се използват подходящи видове вирус на шап и се подбират щамове с широк антигенен спектър в рамките на тип с изразена кръстосана имуногенност. Щам с широк диапазон на имуногенност и отговарящ на изискванията на региона се избира чрез тестване в реакция на кръстосана защита или, по-често, в реакция на кръстосана неутрализация. Като правило, като производствен щам се използва вирусна популация, която заедно със системата и условията на промишлено култивиране осигурява гарантирано и високо натрупване на 146S и 75S компонентите на вируса и производството на имуногенна ваксина.
Освен това производственият щам е обект на изисквания за стабилност на вируса по време на пречистване от тъканни компоненти и концентрация, както и запазване на вируса по време на инактивиране и дългосрочно съхранение [2].
Причинителят на шап има значителна антигенна вариабилност на щамове в рамките на един и същ серотип, която се открива на различни интервали от време и на различни територии и зависи от видовия състав на възприемчивото животно, неговия имунен статус и много други различни фактори. Антигенната вариабилност на FMDV се дължи на аминокиселинни замествания в полипептидни фрагменти (антигенни епитопи), изложени на повърхността на капсидните протеини [2, 3]. Антигенни смениспектърът, съответстващ на обновяването на структурата на нов полеви щам, може да варира от незначителен, уловен от моноклонални антитела, до значителен, записан с помощта на традиционните поликлонални имуноглобулини. Значителни промени в антигенните характеристики на естествения щам е вероятно да причинят отслабване на специфичния имунитет, индуциран от нехомоложния антиген. Те също така създават трудности при диагностицирането на специфичния щам.
В резултат на това възниква необходимостта от създаване на нови диагностични средства и специфична имунопрофилактика.
Известни щамове на болестта шап тип А, използвани като производство в СССР и България през последните 50 години.
Те включват следните щамове: A7 № 103, изолиран през 1962 г. в района на Куйбишев; А 7 № 2, разпределен през 1965 г. в Таджикската ССР; A № 717/73, разпределен през 1973 г. в Ставрополския край.
Тези щамове са използвани за получаване на диагностикуми и ваксини срещу шап, използвани в различни региони на страната.
Въпреки това, след изкореняването на болестта шап, причинена от антигенно подобни вирусни щамове, те бяха преустановени и в момента се поддържат само в колекцията от микробни щамове на ФГБИ „ВНИИЗЖ” [1÷4].
Известна е инактивирана сорбирана ваксина срещу шап тип А, съдържаща активното вещество под формата на авирулентен и пречистен антигенен материал от щам А 22 № 550, хомоложен на инфекциозния агент, получен в чувствителна биологична система, и целеви добавки под формата на адювант и поддържаща среда в ефективно съотношение [5].
Щам А22 № 550 на вируса на шап е изолиран през 1964 г. в Азербайджан и се използва в България катопроизводство в производството на специфични средства за профилактика и диагностика, използвани в цяла България и в страните от постсъветското пространство [6, 7].
Известна е инактивирана адсорбирана ваксина от щам А (Грузия) 1999/ № 1721 вирус на шап Aphtae epizooticae тип А, изолиран през 1999 г. в Република Грузия [8].
Известна инактивирана адсорбирана ваксина от щам № 1707 "Армения-98" вирус на шап Aphtae epizooticae тип А [9].
Ваксина срещу вируса на шап тип А от производствен щам А № 1707 "Армения-98", използван в буферната зона на Закавказието.
Недостатъците на ваксините, произведени от тези щамове, са недостатъчната антигенна и имуногенна активност срещу епизоотични изолати на вируса на шапа тип А, циркулиращи в момента в страните от Закавказието, Централна Азия и Близкия изток (Турция, Иран и др.) Поради съществуващите значителни антигенни различия.
Най-близка до предложеното изобретение по съществени характеристики е инактивирана сорбирана ваксина срещу шап тип А, съдържаща активното вещество под формата на авирулентен и пречистен антигенен материал от щам А (Грузия) 1999/ № 1721, получен в чувствителна биологична система, и целеви добавки под формата на адюванти на GOA със сапонин и поддържаща среда в съотношение, μg: