МЕСТНИ ХЕМОСТАТНИЦИ НА БАЗАТА НА КОЛАГЕН
Истранов Л.П., Абаянц Р.К., Истранова Е.В.
ЛОКАЛНИ ХЕМОСТАТИЦИ НА КОЛАГЕНОВА ОСНОВА "ФАРМИНДЕКС-ПРАКТИК" брой 10 година 2006 стр. 56-59
Местните хемостатични средства се използват широко както в хирургическата практика, така и в ежедневието за спиране на леко кървене от ожулвания, порязвания, рани и др. За спиране на локално кървене най-удобни са твърдите лекарствени форми и продукти: прахове, филми, гъби, влакна, нетъкан материал (филц), марля и др. Тяхната хемостатична активност зависи от естеството и структурата на първоначалната матрица, нейната способност да повлиява различни етапи на процесите на кръвосъсирване.
Колагенът, един от основните структурни протеини на тялото, заема специално място сред естествените полимери с хемостатични свойства. Известно е, че колагеновите влакна предизвикват активна адхезия и агрегация на тромбоцитите. In vivo, след локално увреждане на кръвоносните съдове, тромбоцитите започват да се придържат към колагеновите влакна, изпъкнали на мястото на увреждане. Когато влязат в контакт с колаген, ADP, серотонин и други тромбоцитни коагулационни фактори се освобождават, настъпва по-нататъшна агрегация на тромбоцитите, които се прилепват с нов слой към предварително фиксирани клетки, което води до образуване на фибринов съсирек и затваряне на мястото на нараняване. [1-4]. Очаква се, че екзогенният колаген, поставен върху раната, ще действа по подобен начин.
За използването на колаген в състава на хемостатични средства, той се получава от дермата и сухожилията на различни животни и се използва под формата на разтвор, прах, фиброзна маса (филц), колаген-фибринова паста, гъба.
Първото известно хемостатично лекарство Avitene е получено под формата на микрокристална влакнестапрах, нетъкан материал (Superstat), колагенова гъба коластат (Collastat) [5-7]. Колагеновият филц Collastipt и гъбата Liostipt са създадени в Германия [8,9] от диспергиран набъбнал в киселина телешки дермален колаген. Кръвоспиращи гъби Hemostatic - Felt и Superstat (Полша) [10]. Кръвоспираща превръзка Tachotop (Tachotop) [13] е изработена от конска кожа, колагенов филц (Vlies) - от дермата на прасета [14,15] beristypt (Beristypt) - от плацентарен колаген [16].
Понастоящем най-известният вносен ефективен хемостатичен агент е tachocomb (Nycomed, Австрия) на базата на колаген и фибриново лепило. Това е пореста колагенова пластина, чийто повърхностен слой включва тромбин, фибриноген, калциев хлорид и инхибитор на фибринолизата. Клиничните изследвания в България потвърждават високата му хемостатична активност при различни капилярни кръвоизливи.
В България широко приложение в клиничната практика намери хемостатична колагенова гъба, произвеждана от Лужския завод "БЕЛКОЗИН" от 1984 г., която съдържа антисептиците фурацилин и борна киселина. Разработен е в Московската медицинска академия „И. М. Сеченов“ и е направен от колаген от кравешка кожа [17].
Технологията на хемостатичната колагенова гъба се основава на метода на сублимация (лиофилизация), изсушаване на тънък слой от колагенов разтвор, в който се въвеждат различни лекарствени съставки. В процеса на сублимация на замразени водни кристали в дълбок вакуум се получават силно порьозни гъби, в които обемът на проходните и задънените пори е 50-90% от общия обем на гъбата. Такава гъба може да абсорбира до 3000-4000% течност. Хемостатичната активност на колагеновата гъба се обяснява с високата й порьозност.тъкан, която насърчава усвояването на кръвта с едновременна агрегация на тромбоцитите и последващия процес на нейната коагулация.
Всички тези хемостатични агенти на базата на колаген показват висока хемостатична активност поради природата и порестата структура на колагена. Въпреки това, локалната хемостатична активност на материали, базирани на диспергиран или разтворен колаген, е недостатъчна за спиране на капилярно кървене от паренхимни органи. Следователно, за да се увеличи адхезията и да се ускори образуването на тромби, в състава на колагена се въвеждат допълнителни вещества, които влияят на определени етапи на кръвосъсирването: калциеви соли, тромбин, фибриноген, епсилон-аминокапронова киселина, хидроксиапатит и др.
За съжаление, в нашата страна използването на чуждестранни технологии за получаване на ефективни местни хемостатични средства е невъзможно, тъй като характеристиките на технологията на субстанцията от диспергиран колаген, както и производството на хемостатични средства на негова основа, в допълнение към общите принципи, са неизвестни и са предмет на ноу-хау на производителите. В допълнение, цената на тези материали е доста висока, което показва необходимостта от създаване на ефективни домашни хемостатични средства.
За да увеличим локалната хемостатична активност, предложихме да включим тромбоцитите в колагеновата гъба, които в тялото инициират и рязко ускоряват почти всички реакции на каскадата на образуване на тромби [1–4]. За целта от кръвта се изолира богата на тромбоцити фракция, която се използва за лечение на редица заболявания и може да се използва като стимулант на локалната хемостаза.
С въвеждането на тромбоцитен концентрат в разтвор на оцетен колаген се образува хомогенен вискозен течен състав, тромбоцитите равномерносе разпределят в разтвор на колаген и не се наблюдават признаци на физическа несъвместимост. След сушене чрез замразяване на тънък слой от състава се получават порести гъбени плочи.
След това сухите гъби се структурират във формалдехидни пари в продължение на 6-8 часа при стайна температура, опаковат се в торби от полимерни материали и се стерилизират по радиационен метод. Създадените по този начин гъби получиха търговското наименование "Тромбокол".
На външен вид гъбата Thrombocol е пореста бяла пластина, а в присъствието на сангвиритрин - жълта, без мирис.
Специфичното тегло на гъбите е 0,016 ± 0,005 g/cm3. Порьозността, включително обема на проходните и задънените пори, е 78,7 ± 20,3% от общия обем на гъбата. Остатъчната влажност на плочите е 8-12%, pH на водния екстракт е 5,5-7,0.
Тромбокол не се разтваря в студена вода, леко набъбва в нея; в гореща вода при температура над 45 ° C, гъбената проба се свива (заваряване) до 30% от площта си. В органични разтворители (алкохол, ацетон, ксилен и др.) Тромбокол не се разтваря. Гъбата лесно абсорбира течност, количеството влага, абсорбирано от гъбата за 1 час е 4500-5000%.
Хемостатичната активност на пластините Thrombocol и други хемостатици на базата на колаген е изследвана от Belozerskaya G.G. и Макаров В.А. със сътрудници [19,20] при опити върху зайци Чинчила с тегло 2,0-4,0 kg. Под тиопенталова анестезия се извършва лапароскопия с надлъжен разрез по бялата линия на корема. Предната повърхност на черния дроб се извежда в раната и с помощта на специално устройство с остър бръснач се нанася повърхностна рана на черния дроб с площ 1,5 cm и дълбочина 0,1 cm.плоча Thrombocol.
За сравнение бяха изследвани други локални хемостатични средства на базата на колаген - търговски препарати: хемостатична колагенова гъба и Kombutek-2 (Belkozin, Luga), Collastipt, както и гъба Carbocol, получена от нас от същия кравешки колаген чрез сушене чрез замразяване на разтвор с леко алкална стойност на рН. Като контрола се измерва времето за спиране на кървенето с марлен тампон. Резултатите от изследването са представени в таблица 1.
Таблица 1Хемостатична активност на колагенови гъбиХ-гъба, съдържаща тромбин, аминокапронова киселина, калциев хлорид.
Гъбата Тромбокол има много по-изразен хемостатичен ефект в сравнение с марлен тампон, хемостатична колагенова гъба и други известни препарати на базата на колаген. Той спира капилярно-паренхимното кървене за 42 секунди и се доближава по действие до Tachocomb, който съдържа освен колаген фибриноген, калциев хлорид, апротенин. Tachocomb е най-известният ефективен хемостатичен агент. Според нас гъбата Trombokol може да се конкурира добре с добре познатия чуждестранен наркотик Tachocomb.
Заслужава да се отбележи доста високата хемостатична активност на колагеновата гъба Carbocol, направена от слабо алкален разтвор на колаген. В гъбите, направени от кисел колаген, положително заредените странични групи са екранирани, докато в гъбите, направени от слабо алкален колаген, напротив, отрицателно заредените карбоксилни групи са блокирани. Очевидно повърхностният заряд на фиброзните колагенови образувания в гъбата значително влияе върху способността им да активират процесите на кръвосъсирване. Гъбата Carbocol също се характеризира с високахидрофилност и развита структура на порите.
Белозерска Г.Г. [20] формулират основните изисквания към локалните хемостатични средства. Хемостатичното средство трябва:
- предизвикват в най-кратки срокове (до 120 секунди) пълно спиране на капилярно-паренхимното кървене.
- имат висока адхезивност, прилягат плътно към повърхността на раната и предотвратяват възобновяването на кървенето.
- да няма дразнещ ефект върху околните тъкани, нежелан ефект върху тялото на продуктите от неговата биотрансформация.
- не повлияват функцията на хемостазата в общото кръвообращение,
- да бъде удобен за използване, равномерно и едновременно затваряне на повърхността на раната, лесно се отстранява от повърхността на раната при липса на резорбция.
Спондж Тромбокол отговаря на всички тези изисквания: той и неговите резорбционни продукти са нетоксични, неантигенни, имат висока адхезия към раната, плътно прилепват към нея, предизвикват бързо спиране на капилярно-паренхимното кървене и се резорбират в организма за 5-7 дни.
Според резултатите от тези проучвания е разработен проект за гъбения продукт Trombokol и са одобрени технически условия (TU 9391-006-55244568-2003 „Гъбеста плоча, колаген, тромбоцит, хемостатичен, антисептичен, стерилен „Trombokol“).
Физикохимичните и фармацевтичните свойства на плочите са стабилни по време на 3 години съхранение при естествени условия.
Клиничното изследване на пластините Trombokol е извършено в 14-та Централна стоматологична клиника на Министерството на отбраната на Руската федерация, ЦНИИС, ЦСП на ФСБ на РФ.
Плаките Thrombocol са ефективни при спиране на венозно капилярно кървене от меки и костни тъкани, при спиране на кървене от костно-зъбни джобове, спластична хирургия на устната лигавица, като тампон след екстракция, за предотвратяване на кървене и тампонада след екстракция на зъб, при пациенти с повишено кървене и съпътстваща хипертония, както и за предотвратяване на кървене на нервно-съдовия сноп след отстраняване на големи одонтогенни кисти на долната челюст и лигавицата на максиларния синус с нарушение на неговата цялост.
Плочите Thrombokol се използват в хирургията за предотвратяване на стомашно-чревно кървене, тампонада на чернодробни рани след интраренална холецистектомия, спиране на ерозивно кървене от устието на тънкочревна фистула, в онкохирургията по време на операции на рак на гърдата и матката, рак на ректума и гинекология за затваряне на повърхността на раната по време на органосъхраняващи операции, извършвани чрез коремна хирургия или лапароскопия , за спиране на кървенето след лазерна вапоризация.цервикализация. Клиничните проучвания показват, че Thrombocol значително намалява времето за спиране на кървенето, а обемът на загубата на кръв, стимулирайки заздравяването на рани, не засяга системата за коагулация на кръвта в общото кръвообращение. Резултатите от клинично проучване показват обещанието за използване на Thrombocol като локално хемостатично, антисептично и средство за заздравяване на рани.
Тромбокол е одобрен за промишлено производство и клинична употреба, регистриран е във Федералната служба по надзор в България и се произвежда от Лужския завод Белкозин.
1. Barkagan Z.S.Yu Mamot A.P. Диагностика и контролирана терапия на нарушения на хемостазата, М. Newdiamed, 2001.
2. Лице J.D., Clin. Haemotol, 1994.7, 441-452.
3. Габриян З.С., Акопов С.Е., Кръвни клетки и кръвообращение, Ереван, Издателство Айстан, 1985 г.
4. АкерманJ. W., Biochem. J., 1983, 210, 145-155.
5. Murphy D.J., Clough C.A., Surg.Neulogy, 1974, 2, N 2.77-79.
6. Coln D., Horton J. a.at. Am/J. Surg., 1983, 145, 256-259.
7. Sawyer P.N., Stanczewki. Am. Soc. за Artif. Inter organi, 1980.26, 507-519.
8. Engelgardt G.N., Gerhardt H.J. Nagelschmidt M., Arzneim.-Forsch. (Drug. Res., 1989., 31.1.N2, (259-262).
9. Stein M.D., Slkin L.M. a.at. J. Periodontal, 1985, N 1.35-38.
10. Staniszewska-Kus J. Polim. мед., 1985, 15.N1-2.21-34.
11. Chvapil V., Arcy, Хирургия, 1983, 118, 12, 1375-1377.
12. Chvapil V., J. Trauma, 1983, 23, 1042-1047.
13. Adelmann-Grill B.C., Otto K., Arzntim.-Forsch. (Drug. Res., 1987, 37, 802-805.
14. Neimann A.a.at. Medicamtntum, 1986.16, № 4,114-116.
15. Klug B., Knoch X. Medicamtntum, 1986.16, No. 4,114-116.
16. Kondler R., Fuchs, Arzneim.-Forsch. (Drug. Res., 1989., 31.1.N2, (401-403).
17. Колагенопластика, изд. В. В. Кованов, М. Медицина, 1978 г.
18. Белозерская Г.Г., Макаров В.А. и др.. Хирургия, 2004Yu 9Yu55-59.
20. Belozerskaya GG, Изследване на специфичната фармакологична активност на нови хемостатични средства с локално резорбтивно действие, Ph.D., M., 1990.