МЕТОДИ ЗА ЛАБОРАТОРНА ДИАГНОСТИКА НА ЧУМА

РАЗДЕЛ 2: частна микробиология

ЦЕЛИ НА ДЕЙНОСТТА:

обучение:

  • дават разбиране за правилата за събиране, съхранение и транспортиране на теста
  • да формират знания за хранителните среди, необходими за диагностика на чумата;
  • да преподава методи за бактериологична диагностика на чумата;

КУЕСТОВЕ.

  1. Облечете противочумен костюм.
  1. Извършете микроскопия на препарати, оцветени по Грам, метиленово синьо. Начертайте резултатите.
  1. Оцветете препарата с луминисцентен серум.
  1. Да се ​​изследва морфологията на чумните колонии върху твърда среда и растежа в течна хранителна среда. Скица.
  1. Настройте ускорен метод за изследване с бактериофаг.
  1. Запишете ензимната серия.

ТЕСТОВИ ВЪПРОСИ.

1. Към коя група инфекции принадлежи чумата?

2. Кои са преносителите и източникът на чумата?

3. Какви форми на заболяването се причиняват от Yersiniae pestis?

4. Как се развива патогенът на чумата върху твърди и течни хранителни среди? Каква форма е вирулентна?

5. Какъв токсин се произвежда от патогена на чумата?

ТЕМА: „Микробиологична диагностика на чумата”.

ЦЕЛ НА ИЗСЛЕДВАНЕТО : Установяване на причинителя на чумата.

Причинител на чумата:Yersiniae pestis.

Материал за изследване:

1) Съдържание на бубони (бубонна форма);

2) Съдържанието на язва или карбункул (кожна форма);

3) Храчки (белодробна форма);

4) Екскременти (чревна форма);

5) Кръв (във всички форми);

6) Секционен материал (парчета от органи, трупове, кръв, костен мозък);

7) Бълхи - съдържанието на червата им;

8) Плъхове, мишки и други мъртви (иболни) гризачи - отворете, прегледайте органи и кръв.

Методи за събиране на материал:

Съдържанието на бубони, язви или карбункули се взема със стерилна спринцовка. Храчките, изпражненията се събират в стерилен буркан с широко гърло. Кръв 3-5 ml се взема със стерилна спринцовка и се инокулира до леглото на пациента в бульона.

Основни методи на изследване:

  1. Експресни методи: MFA и RNGA;
  2. Микроскопски;
  3. бактериологични;
  4. Биологичен.

Изследователски ден.

1) Микроскопски метод.

От получения материал се приготвят петна, изсушават се на въздух, фиксират се в сместа на Никифоров за 15-20 минути. Намазката се оцветява с Грам и метиленово синьо за откриване на биполярност. Наличието в намазките на грам-отрицателни яйцевидни пръчки, а при оцветяване с метиленово синьо - наличието на биполярност дава право да се направи предварителна диагноза.

2) Бактериологичен метод.

Материалът се засява в BCH и MPA. За потискане на растежа на чужда микрофлора към MPA се добавя тинтява виолет (1:50 000). Като стимуланти на растежа се добавя кръв или натриев сулфит pH = 7,0-7,2. Културите се инкубират в термостат при 28 - 30 0 С.

Изследователски ден.

Растежът се изследва върху плътна и течна хранителна среда.

На MPB се наблюдава нарастване на сталактит (свободни нишки се спускат от повърхността на средата). От бульонната култура се правят натривки, оцветени с Грам и метиленово синьо.

На MPA след 18-24 часа под микроскоп при ниско увеличение можете да видите колонии под формата на "счупено стъкло". След 48 часа - "дантелени кърпички", в центъра на колонията грануларност.

Подозрителните колонии се отстраняват върху наклонен MPA и се поставят в термостат за изолиране на чиста култура.

Успоредно с това поставете проба с фаг. За 2-3колонии, съмнителни за патогена на чумата, нанасят чумния бактериофаг. Инкубира се в термостат. След 10-12 часа колониите се сменят - лизират.

Изследователски ден.

Те изучават културата, отглеждана върху скосен MPA. На повърхността на агара чумният бацил образува вискозно сиво-бяло покритие. След това изпълнете:

2) изследване на биохимичните свойства. Захаролитичните свойства се проверяват чрез инокулация за захари: глюкоза, захароза, манитол, малтоза, рамноза, арабиноза;

3) поставете проба с фаг (засяване с морава + пътека от чумен бактериофаг, t = 28 0 С).