Подготовка на сперма за изкуствено осеменяване - Репродуктивни технологии

За съжаление има много причини да не забременеете. Ако една двойка е диагностицирана с цервикален фактор на безплодие, при който е невъзможно да забременее поради невъзможността да се получи достатъчен брой сперматозоиди през шийката на матката в маточната кухина, както и някои видове слабо изразен мъжки фактор, изкуственото осеменяване е ефективно решение.

При вътрематочно осеменяване, когато спермата се инжектира през катетър директно в маточната кухина, използването на естествена (непочистена) сперма е неприемливо.Обработката на сперма е задължителна за IUI. Това се дължи на няколко причини. Първо, необработената сперма съдържа протеини, които са чужди за тялото на жената и могат да причинят сериозна алергична реакция и дори анафилактичен шок. Второ, спермата може да бъде заразена с микроорганизми, които могат да причинят възпаление, когато навлязат в матката.

При естественото оплождане ролята на филтър се изпълнява от цервикалния канал на шийката на матката, при преминаване през който спермата се изчиства от нежелани компоненти. При изкуственото осеменяване тази роля се поема от ембриологичната или андрологичната лаборатория на клиниката, в която се извършва тази процедура.

Подготовката на спермата за инсеминация отнема около 2 часа и включва следните стъпки:

1. - събиране на еякулат чрез мастурбация или размразяване (ако спермата е била предварително криоконсервирана);
2. - анализ на спермата за оценка на нейното качество;
3. - втечняване на спермата, което се извършва чрез инкубиране при 37°C за 30 минути;
4. - самата процедура на почистване;
5. - разреждане на получения концентрат от функционално здрави сперматозоиди с хранителни веществазаобикаляща среда.

Задачата пред ембриолога еда пречисти спермата от следните компоненти:

- Семенна течност - течната част на еякулата, съдържаща антигенни протеини, които могат да причинят алергична реакция, и простагландини, които могат да провокират болезнени контракции на матката при навлизане в нейната кухина.

- Чужди клетки - имунни и епителни клетки, левкоцити, незрели зародишни клетки, както и клетъчни елементи.

- Неактивни, повредени, мъртви и умиращи сперматозоиди. Разлагащите се остатъци от такава сперма отделят реактивен кислород, който при високи концентрации влияе неблагоприятно на оцеляването и функционалността на сперматозоидите.Почистването на спермата от тях улеснява движението на жизнеспособните сперматозоиди по време на инсеминация, повишава способността им да се свързват с мембраната на яйцеклетката и да проникват през нея.

- Сперматозоиди с морфологични дефекти, въпреки че понякога могат да оплодят яйцеклетката, но по-нататъшното развитие на такива ембриони може да спре или да бъде нарушено.

- Инфекциозни агенти - бактерии и вируси. Самите бактерии, прикрепени към повърхността на сперматозоидите, намаляват тяхната подвижност и способността за оплождане. В допълнение, ендотоксините, отделяни от такива микроорганизми, намаляват оцеляването на спермата. При навлизане в женските полови органи бактериите и вирусите могат да причинят възпаление.

В допълнение къмпочистването на спермата от примеси, е необходимо да се постигне най-висока концентрация в хранителната среда на живи подвижни сперматозоиди без патологии - тези, с помощта на които е най-вероятно оплождането. В този случай подготовката трябва да се извърши с минимално увреждане на мъжките зародишни клетки. При избора на техника за подготовка на спермата се използва индивидуален подход в зависимост от нейнатаоригинални качества.

Към днешна дата има няколко метода за обработка на сперма за вътрематочно осеменяване. Всеки от тях има както предимства, така и недостатъци.

1. Метод на флотация (изплуване, плуване)
2. Този метод се основава на факта, че подвижните сперматозоиди се движат независимо нагоре в промивната среда, която се прилага върху пробата от сперма. По време на инкубацията на такава проба активните сперматозоиди изплуват от еякулата в промивната среда, която след това внимателно се събира за използване при осеменяване.
3. Методът е относително прост и неизискващ към лабораторното оборудване и персонал.
4. Недостатъкът на тази техника е, че не елиминира сперматозоиди с лоша морфология, бактерии и вируси.
5. Времето за процедурата е 1-1,5 часа.

1. Метод за измиване на спермата
2. Това е традиционен и неусложнен метод за обработка на спермата за отстраняване на течната й част. При този метод спермата се смесва с промивната среда и се центрофугира. В този случай сперматозоидите потъват на дъното на тръбата, образувайки утайка, която отново се измива няколко пъти по същия начин.
3. Времето, прекарано в процедурата, е по-малко от час.

1. Метод на центрофугиране с градиент на плътност
2. Този метод позволява отделянето на жизнеспособни сперматозоиди от всички други компоненти на спермата. При използването на този метод специални колоидни течности с различна концентрация се наслояват внимателно една върху друга в епруветка, в която ще се пречиства спермата. Отгоре се поставя разредена сперма. Епруветка с такава "пластова торта" се центрофугира. В същото време най-подвижните сперматозоиди, утаяващи се на дъното на тръбата и преминаващи през слоевете на колоидния разтвор, се изчистват отсеменна плазма, мъртви сперматозоиди, чужди клетки и бактерии. Остатъкът от течността се отстранява внимателно от епруветката, след което утайката се прехвърля в друга епруветка и се измива, за да се отстранят остатъците от използвания разтвор.
3. Времето за процедурата е от 20 минути до 1 час.

1. Метод на филтриране
2. Този метод се използва след предварително измиване на спермата в промивна среда чрез центрофугиране. Утайката, получена след такова промиване, се филтрира през стъклени влакна под въздействието на гравитацията. Събраният филтрат се използва за вътрематочна инсеминация.
3. Времето за процедурата е около 10 минути.

Специалистът, който подготвя спермата за инсеминация, избира сред наличните методи този, който може да осигури най-добрия резултат за конкретна проба от сперма. Същите техники се използват за подготовка на сперматозоиди в IVF програми.

1. Пробнолечение на еякулата
2. Ако въз основа на резултатите от спермограмата репродуктологът има съмнения към коя репродуктивна технология да прибегне - IUI, IVF или ICSI, е възможно да се извърши пробна обработка на спермата.

Тъй като положителният резултат от вътрематочната инсеминация, както всяка друга процедура на АРТ, до голяма степен зависи от етапа на подготовка на спермата, репродуктивните клиники обръщат голямо внимание на ефективността на своите лаборатории и професионализма на персонала, участващ в такова обучение.

---