8.3. Оценка на качеството и количеството на храчките
При изследване на храчките на пациенти със съмнение за туберкулоза понятието "качествена храчка" има конкретно определение. Прясно изолирана храчка от дълбоките отдели на дихателните пътища с минимални примеси на слюнка или назофарингеална слуз е с високо качество. Най-добрата проба за изследване се счита за проба от храчка, в която има лигавични или мукопурулентни бучки, което е много по-важно от количеството събрана храчка. Достатъчно е да имате 3-5 ml храчка, но добри резултати от теста могат да се получат при изследване на по-малки обеми храчка.
Индуцирана, т.е. получена чрез аерозолно вдишване или други манипулации, храчките приличат на слюнка по вид и консистенция. Важно е този материал да не бъде погрешно отстранен като неподходящ за изследване. Поради това е необходимо да се отбележи в придружаващия документ, че материалът е получен след вдишване на аерозол.
IX. Изготвяне на цитонамазки за микроскопско изследване
На практика се използват два метода за микроскопско изследване:
- метод на директна микроскопия, когато намазката се приготвя директно от суровия диагностичен материал или неговата утайка (течен материал);
- метод за микроскопиране на натривка от утайка от материал, подготвен за културно изследване чрез третиране с хомогенизиращи и дезинфекциращи агенти и последващо центрофугиране.
Първият метод се използва широко в онези лаборатории, в които се извършва само микроскопско изследване (клинико-диагностични лаборатории на общата медицинска мрежа), последвано от оцветяване по Ziehl-Neelsen и изследване в светлинен микроскоп. Този метод обаче е по-малко информативен от микроскопията на утайката, тъй като по време на подготовката на утайката тя се "обогатява" запоради освобождаването на микроби от заобикалящата ги слуз и тяхното утаяване по време на центрофугиране.
В случаите, когато намазката се оцветява с флуорохромни багрила и се изследва под флуоресцентен микроскоп, трябва да се има предвид, че висококачественото и ефективно оцветяване с флуорохромни багрила изисква задължително спазване на киселинността (pH) на намазката, както и освобождаването на микобактерии от заобикалящата слуз, което предотвратява проникването на багрилото в микробната клетка. Неспазването на тези условия води до намаляване на ефективността на луминесцентната микроскопия. Следователно, оцветяването с луминесцентни багрила се препоръчва да се използва главно при изследване на намазки, приготвени от утайката на материал, третиран с детергенти или муколитични агенти.
9.1. Оборудване и реактиви за приготвяне на намазки от диагностичен материал за оцветяване по метода на Ziehl-Neelsen
Преди да започнете работа, оборудването, реактивите и материалите трябва да бъдат поставени така, че да е удобно за работа и в бъдеще да се опитате да следвате този обичаен ред.
Всички манипулации по изготвянето на цитонамазките трябва да са стандартизирани, а за максимална безопасност всички материали и реактиви винаги да са на едни и същи постоянни места и подредени в еднакъв ред.
За приготвянето на намазки се нуждаете от:
- бутилки с материал за изследване, постъпили в лабораторията;
- дървени пръчици (апликатори) или бактериологична примка с диаметър 3 mm за събиране на съсиреци от храчки и разпределянето им върху стъклото;
- предметни стъкла за еднократна употреба (обезмаслени, без драскотини и чипове) GOST 9284-75;
- незаличим маркировъчен молив за нанасяне на идентификационен номер върху стъкло (диамантен молив);
- пинсети или клещи за вземане на предметни стъкла с петна;
- контейнер (колба, стъклен буркан) с измит речен пясък, напълнен с технически алкохол (70 °), за почистване на бактериологичния контур от остатъците от материала преди следващата стерилизация в пламъка на горелката;
- спиртна лампа или газова горелка Bunsen за калциниране на контура;
- еднократни или стерилни стъклени петриеви панички за селекция на гнойни бучки от храчки (материал);
- стерилни 10 и 5 ml пипети за прехвърляне на храчки в петриеви панички;
- тави (тави), облицовани с филтърна хартия за сушене на приготвени петна;
- контейнери за събиране и последващо автоклавиране на заразен материал и замърсени съдове. При липса на автоклав в лабораторията за дезинфекция на стъклария и използван диагностичен материал се използват специални резервоари, в които се извършва дезинфекция чрез кипене;
- контейнер с дезинфекционен разтвор за обработка на повърхността на маса или други предмети в края на работа и при случаен контакт с диагностичен материал;
- памучни топки за третиране на замърсени повърхности с дезинфекционен разтвор.