Бъбречна биопсия и морфологични изследвания

Бъбречна биопсия

Диагнозата на много гломерулни и тубулоинтерстициални заболявания е невъзможна без перкутанна пункционна бъбречна биопсия. Показания за биопсия са: стероидно-резистентен нефротичен синдром (NS), остър нефритен синдром с бъбречна недостатъчност, съмнение за бързо прогресиращ гломерулонефрит или тубулоинтерстициален нефрит (с изключение на постстрептококов GN), системни заболявания, засягащи бъбреците (SLE, пурпура на Henoch-Schonlein и др. (виж Таблица 1). 1)). Биопсията е златният стандарт за диагностициране на причините за дисфункция на бъбречната присадка. Отворена биопсия се извършва в изключителни случаи, например при съмнение за тумор. Биопсията не е показана при често рецидивиращ стероид-чувствителен НС, освен при съмнение за нефротоксичност, дължаща се на циклоспорин А. При продължителна изолирана протеинурия биопсията не винаги е показана (в зависимост от динамиката и функциите на бъбреците). Противопоказания за биопсия са единичен бъбрек (роднина), ектопичен бъбрек, нелекувано нарушение на коагулацията или неконтролирана артериална хипертония (табл. 11).

Таблица 11. Показания и противопоказания за бъбречна биопсия.

Показания за бъбречна биопсия: • Протеинурия и хематурия с неизвестна етиология • Хипертония с неизвестен произход • Стероидна резистентност в NS с минимални промени • Неуспех на лечението при който и да е вариант на GN • Подозрение за дисембриогенеза на бъбречната тъкан • Васкулит • Подозрение за амилоидоза • AKI с неизвестна етиология • Влошаване на функцията на присадкатаПротивопоказания за бъбречна биопсия: • Единичен бъбрек • Хеморагична диатеза • Неконтролирана хипертония • Тумор на бъбрека • Паранефрит, хидронефроза, бъбречна туберкулоза, инфекция на пикочните пътищапътища • Терминална фаза на CRF

Примерен протокол за бъбречна биопсия, използван в Детската клиника Хановер (Германия), както и в Детската клинична болница Аксай (Алмати), е даден в Приложение 4. За бъбречна биопсия се използват различни биопсични пистолети: за еднократна употреба (Galeni, Италия), автоматични със сменяеми игли за еднократна употреба (Bard Magnum, САЩ) и др.

Бъбречна биопсия се извършва под ехографски контрол от опитен нефролог или хирург в болнични условия. Процедурата е сравнително проста и отнема около 15-20 минути. Усложненията са редки. Рискът от леко преходно кървене е 5-10%. Най-често има хематом в периреналната тъкан (57-85%), който отзвучава. Редки усложнения са артериовенозна фистула и/или профузно кървене (0,1-0,2%).

Морфологични изследвания Бъбречна биопсия, представителна за морфологична диагноза, трябва да съдържа най-малко 10 гломерула и една артерия. Морфологичното изследване на бъбречна биопсия включва три изследвания: светлинна (LM), имунохистохимична (IHC) или имунофлуоресцентна и електронна (EM) микроскопия. За SM и IHC, бъбречна тъкан, фиксирана в 4% буфериран формалин (минимум 2 часа), се поставя в хомогенизиран парафин, последвано от серийни срезове с дебелина не повече от 2-3 μm върху ротационен микротом. За ЕМ се взема парче биопсия, съдържащо гломерули, дълги около 1 mm, фиксирани в 2,5% глутаралдехид.Светлинна микроскопия Серийните срезове се подреждат на 16 предметни стъкла, по 3 на всяко, за оцветяване по методите: Хематоксилин-еозин, Shika (PAS), Jones silver. Останалите неоцветени слайдове са предназначени за допълнителни хисто- (Конго червено за амилоид) и имунохистохимични изследвания.Имунохистохимия Определят се следните показатели: IgG, IgM, IgA, C3, C1 q, C4d (с трансплантиран бъбрек). Допълнителни индикатори: капа и ламбда леки вериги (за откриване на бъбречни увреждания при мултиплен миелом и др.), SV40 (полиома вирус в трансплантиран бъбрек) и др.Електронна микроскопия Приготвянето на препарати за ЕМ включва: капсулиране в епоксидни смоли, получаване на полу- и ултратънки срезове, поставянето им върху медни решетки с контраст. Морфологичната схема на нормален гломерул е показана на фиг. единадесет.

Основните морфологични промени, които се вземат предвид от нефропатолог при поставяне на диагнозата, както и видовете гломерулонефрит, са изброени в таблица. 12 и 13.

Таблица 12. Основни морфологични промени при бъбречни заболявания

  1. Светлинна микроскопия
Гломерули (фигура): - Структури (ендотел, мезангиум, епител, гломерулна базална мембрана) - Разпространение: дифузно/фокално, тотално/сегментно) - Активни промени (некроза, апоптоза, хиперцелуларност, пролиферация) - Хронични промени (склероза, хиалиноза) Тубули и интерстициум Съдове
  1. Имунохистохимична микроскопия
- Наличие на оцветяване (гранулирано, линейно) за IgA, IgM, IgG, C3, C1q.
  1. електронна микроскопия
- Базални мембрани: удебеляване, ламелиране - Мезангиален матрикс: разширяване - Електронно плътни отлагания: субендотелиални, интрамембранозни, субепителни, мезангиални - Подоцити: топене на педикулите - Други: тубулоретикуларни структури, фибрили и др.

Таблица 13. Морфологични видове гломерулонефрит (GN).

- Болест с минимални промени (нефротичнасиндром с минимални промени) - Фокална сегментна гломерулосклероза - Мезангиопролиферативен GN: със и без IgA отлагания - Мембранопролиферативен GN: типове I и II - Дифузен ендокапиларен пролиферативен GN - Екстракапилярен (сърповиден) пролиферативен GN - Мембранопролиферативен GN - Тромботична микроангиопатия

биопсия

Фигура 11.Морфологията на гломерула е нормална.

Примери за някои гломерулни заболявания са показани на фигури 12-14.

биопсия
а.
биопсия
b.
бъбречна
c.Чертеж. 12. Дифузен пролиферативен ГН (постинфекциозен ГН). (От: UpToDate. Версия 17.2) а) SM е разширен гломерул с оклузия на лумена на някои капиляри поради тежка ендокапилярна пролиферация, главно поради неутрофили (PAS). b) IHC - дифузно глобално гранулирано отлагане на C3c в гломерулната базална мембрана и мезангиума c) EM - голямо субепително електронно-плътно отлагане ("гърбица").
бъбречна
а.
биопсия
b.Чертеж. 13. Фокална сегментна гломерулосклероза. (От: UpToDate. Версия 17.2) a) SM е разширен гломерул със сегментна склероза и хиалиноза, с малка мезангиална пролиферация и увеличен мезангиален матрикс (PAS). б) ЕМ – стопяване на подоцитни педикули.
морфологични
а.
морфологични
b.
биопсия
in.Чертеж. 14. IgA нефропатия. (От: UpToDate. Версия 17.2) a) SM - Дифузно леко разширяване на мезангиалния матрикс и мезангиална пролиферация (PAS). б) IHC - значително отлагане на IgA в мезангиума. в) ЕМ - електронно-плътни отлагания в мезангиума. Основните причини за дисфункция на бъбречен трансплантат са остро отхвърляне, нефротоксичност на инхибиторите на калциневрин, полиомавирусен тубулоинтерстициален нефрит (фиг. 15,16,17).
бъбречна
Рисуване. 15. Тежко остро съдово отхвърляне Banff III.Тежък интимален и трансмурален артериит (PAS). (От: UpToDate. Версия 17.2)
бъбречна
a.
биопсия
b.Чертеж. 16. Нефротоксичност на инхибиторите на калциневрин. (От: UpToDate. Версия 17.2) а) Остра: изометрична вакуолизация на тубуларния епител (G-E). b) Хронична: нодуларна хиалиноза на малки артерии (PAS).
бъбречна
а.
бъбречна
b.Чертеж. 17. Полиомавирусен тубулоинтерстициален нефрит. (От: UpToDate. Версия 17.2) a) SM, увеличени ядра на тубулни епителни клетки с характерни тела на включване, изразена инфилтрация на интерстициума с мононуклеарни клетки (PAS). б) IHC - изразена позитивност за полиомавирусен антиген (SV40).

Не намерихте това, което търсихте? Използвайте търсенето в Google на сайта: