Откриване на стафилококи
От отделниколонии, посяти върху агар с кръв, образували хемолиза, се правят петна и се оцветяват по Грам. При откриване на стафилококи тези колонии се засяват върху месен бульон и наклонен агар.
Пигментираните колонии се субкултивират от блюдо с хранителенагар. При липса на пигментирани, субкултивирайте бели колонии. Тези трансфери се правят за по-нататъшни изследвания и по-специално за разграничаване между патогенни и непатогенни стафилококи. Има няколко метода за това:
1.Реакция на плазмена коагулация. В стерилна епруветка с 1 ml стерилен 5% разтвор на натриев цитрат се наливат 10 ml стерилна кръв, взета от сърцето на заек. Получената смес веднага се разрежда с физиологичен разтвор 1: 4 и се излива в стерилни епруветки в 1 ml. Изследваната чиста култура на стафилококи се инокулира с платинена бримка в епруветки с плазма, след което тези епруветки се поставят в термостат при 37 ° и плазмената коагулация се проверява на всеки 2-3 часа. В същото време една епруветка с плазма без култура и епруветка с плазма, в която е засята култура от очевидно патогенен стафилокок, се поставят в термостат за контрол.
Когато плазмата коагулира за 2-4 часа, стафилококите се считат за патогенни. Заешка кръв може да бъде заменена с човешка кръв, ако в близко бъдеще не е приложена глюкоза.
2.При посяване върху 5% кръвен агарсъс заешка или овча кръв, патогенните стафилококи дават рязка хемолиза. 3. Използва се способността на патогенните стафилококи да предизвикват инфилтрация и некроза при въвеждането им в кожата на опитно животно. За биологичнитеизследванияна Staphylococcus aureus, зайците са най-податливите животни.
Суспензия от култураstaphylococcusсе разрежда във физиологичен разтвор, така че 1 ml от суспензията да съдържа 2милиарда микробни тела и 0,2 ml от суспензията се прилага интрадермално на заека върху епилираната кожна област отстрани или отзад.При наличие навъв въведената суспензия от патогенни стафилококи, на мястото на инжектиране се появява инфилтрат, значителна некроза, понякога завършваща със смърт на животното. На един заек можете да поставите не повече от 4-5 проби.
Диагностика на стрептококи
В допълнение къмстафилококите, стрептококите също са причинител на гнойни кожни заболявания.Стрептококитеса кръгли или продълговати коки, най-често разположени в къси или дълги вериги. Оцветени по Грам. Има както патогенни, така и непатогенни форми.
Стрептококите, особено патогенните, трудно се развиват върху прости хранителни среди. За растежа им се добавят 1% глюкоза или 5-10% кръв или 10-20% серум, асцитна течност към хранителна среда, която трябва да бъде леко алкална (рН-7,2-7,6).
Стрептококитеса достатъчно физически и химически стабилни. При температура от + 70 ° те умират след 1 час, а при + 65 ° - след 2 часа. Стрептококите са в състояние да понасят замразяване, не умират в продължение на един месец в изсушена гной или кръв, умират от сублимация при разреждане 1: 1000 след 15 минути. 5% разтвор на карболова киселина също действа върху стрептококи , В случай на пустулозна кожна болест (пиодерма) със съмнение за стрептококова инфекция, за откриване на причинителя на заболяването - стрептококи, е необходимо да се освободи фокусът от гной, след това с тампон, навлажнен със стерилен физиологичен разтвор, вземете материала от дълбочината на фокуса и същия тампон се използва за инокулиране на плака с кръв. гар, както и върху захарен бульон, в който се потапя тампон с тестовия материал. Инокулиран кръвен агар и бульонпоставете в термостат при температура 37 ° за 18-20 часа.
След определеното време върху плоча с кръвен агар се виждат малки колонии със зона на просветление (хемолиза) наоколо, която е няколко (3-4 пъти) по-голяма от самата колония. При изследване на чашата под микроскоп еритроцитите не се откриват в зоната на хемолиза; Това са колонии от хемолитичен стрептокок - бета-стрептокок (Streptococcus haemolyticus). Визготвениот такава колония и оцветени по Грам има грам-положителни коки под формата на къси вериги.
Върху течнахранителнасреда стрептококите се развиват под формата на фина утайка на дъното. Средата остава прозрачна. Воцветения по Грампрепарат, дълги вериги от хемолитичен стрептокок се получават от бульона. В допълнение към хемолитичнияStreptococcusколонии от зелен стрептокок, алфа-стрептокок (Streptococcus viridans), растат в плаката с кръвен агар.
Това са малкиколонии, около които се образува малка, два пъти по-голяма колония, зона на озеленяване на средата. Грам-положителни къси вериги от заоблени стрептококи се виждат воцветен по Грампрепарат от колония зелени стрептококи.
Има и друг вид също малки колонии, но не предизвикващи промени в средата върху кръвен агар (нито хемолиза, нито позеленяване). Това е нехемолитичен стрептокок (гама-стрептокок - Streptococcus anhaemolyticus).
В оцветения сGramпрепарат нехемолитичните стрептококи, подобно на хемолитичните, са подредени в дълги вериги. Нехемолитичните стрептококи се считат за по-малко патогенни. С изключение на посочените типовестрептококи, които могат да причинят гнойни кожни заболявания, има и други видове, които не са пряко свързани с кожните заболявания.